脉冲高强度聚焦超声联合微泡介导兔肝VX2移植瘤细胞凋亡的研究

目的:探讨脉冲高强度聚焦超声(pulsed high intensity focused ultrasound,PHIFU)联合微泡(microbubbles,MBs)以非热效应导致兔肝VX2移植瘤细胞凋亡。方法:建立兔肝VX2移植瘤模型,将36只荷瘤兔随机分为对照组、PHIFU辐照组和PHIFU+MBs辐照组。PHIFU辐照参数为频率0.87 MHz、空间峰值声强(spatial peak intensity,ISP)5900 W/cm2、脉冲重复频率100 Hz、占空比15%、辐照时间90 s,MBs采用0.1 m L/kg Sono Vue。HIFU辐照后1 d处死动物,取部分肿瘤组织采用TUNEL法检测细胞凋亡,免疫组化染色检测PCNA抗原,剩余肿瘤组织进行2,3,5-氯化三苯基四氮唑(2,3,5-triphenyl tetrazolium chloride,TTC)染色观察。结果:对照组、PHIFU组和PHIFU+MBs组经TTC染色后,肉眼可见肿瘤组织被均匀红染,表明各组均无肉眼可见的凝固性坏死形成。TUNEL法检测发现,对照组发现少量阳性染色的肿瘤细胞,PHIFU组和PHIFU+MBs组见较多细胞核棕褐色染色的阳性细胞。PCNA检测结果表明,对照组靶区见大量着色部位在肿瘤细胞核的阳性细胞,而PHIFU组和PHIFU+UCA组阳性染色细胞少。PHIFU辐照组和PHIFU+UCA辐照组凋亡指数(apoptosis index,AI)比对照组高,增殖指数(proliferating index,PI)比对照组低(P=0.000);PHIFU+MBs辐照组AI最高,PI最低(P=0.000)。结论:PHIFU联合MBs可促进兔肝VX2移植瘤细胞凋亡。