镉对培养大鼠睾丸支持细胞的损伤及黄芪的拮抗作用

目的:探讨镉对培养大鼠睾丸支持细胞的损伤及黄芪的保护作用。方法:对照组和经镉、镉加黄芪处理的原代培养大鼠睾丸支持细胞用于波形蛋白、E-钙黏蛋白免疫组织化学检测、细胞内钙离子浓度测定及电镜观察。结果:镉处理后2种蛋白阳性产物表达较对照组减弱。镉加黄芪组阳性产物较对照组减弱但明显强于镉组。对照组、镉和镉加黄芪组细胞内钙离子浓度分别为(81.773±3.711)、(161.602±1.978)和(104.278±1.963)。镉处理后支持细胞超微结构受损明显,部分细胞核异染色质凝聚或核碎裂,胞质空泡化。镉加黄芪组细胞破坏较轻。结论:镉对培养支持细胞具有明显的毒性作用,而黄芪可以拮抗镉对支持细胞的损伤。

微量镉对胎鼠睾丸超微结构及P450scc表达的影响

目的研究孕期微量镉暴露对胎鼠睾丸超微结构的损伤及细胞色素P450胆固醇侧链裂解酶(P450scc)表达的影响,探讨镉对雄性子代生殖发育的干扰作用。方法成熟雌性SD大鼠12只,随机分为2个镉染毒组[1.2、1.5 mg/(kg·d)]和对照组,于孕期第9、11、13天腹腔注射氯化镉,对照组给予等体积生理盐水。妊娠第18天行剖宫产取雄性胎鼠睾丸作光镜、电镜观察及P450scc免疫组化分析。结果光镜下1.5 mg/(kg·d)镉染毒组睾丸精曲小管内支持细胞排列紊乱,间质异常增生,1.2mg/(kg·d)镉染毒组无明显改变。电镜下两个镉染毒组均见支持细胞、精原细胞及间质细胞内线粒体肿胀、内质网扩张,间质细胞内脂滴堆积,尤以支持细胞和间质细胞损伤最为明显。镉染毒组间质细胞中P450scc阳性产物表达均显著低于对照组(P<0.01)。结论孕期微量镉暴露可致性分化期胎鼠睾丸超微结构损伤,降低睾酮合成关键酶的活力。

镉对大鼠睾丸间质细胞损伤及锌对其保护的形态学研究

用透射电镜和葡萄糖６ 磷酸酶（Ｇ ６ Ｐａｓｅ）电镜细胞化学定量技术，观察小剂量氯化镉（２ ｍ ｇ／ｋｇ 体重）腹腔内注射后１ ｈ 至６０ｄ 大鼠睾丸间质细胞超微结构与Ｇ ６ Ｐａｓｅ活性改变及锌对其的保护作用。镉注射４ ｈ 后滑面内质网（ＳＥＲ）扩张，脂滴增多，髓样结构形成，部分毛细淋巴管及毛细血管内皮胞质出现空泡；２４ ｈ 后脂滴进一步增多，体积增大，少数细胞核固缩和胞质溶解；３～１５ ｄ 上述损伤继续加重，线粒体基质有絮状沉积物；３０ ｄ 后退变减轻；６０ ｄ 后间质内纤维成份显著增多，大部分睾丸间质细胞超微结构仍呈退变。镉注射１ ｈ 后内质网Ｇ ６ Ｐａｓｅ 反应产物下降；２４ ｈ 后明显减少；３～１５ ｄ 减少最显著；３０ ｄ 有较明显恢复。锌保护各组较对应单纯镉组超微结构损伤显著为轻，其Ｇ ６Ｐａｓｅ 反应产物亦明显多于相应单纯镉组。结果表明小剂量镉对睾丸间质细胞超微结构和Ｇ ６ Ｐａｓｅ 活性有早期直接损伤，且酶活性改变早于超微结构变化。毛细淋巴管及毛细血管损伤及间质纤维增生进一步加重损伤改变。锌则具有明显保护作用。

环境雌激素对雄性性分化影响的研究进展

环境雌激素(EEs)对人类的生殖毒性效应成为当今环境科学与生殖医学研究的前沿和热点。大量流行病学资料及实验显示,EEs 可显著导致雄性性分化异常诸如小阴茎、尿道下裂、隐睾、雄性化行为异常等。该文对其作用机制包括拟雌激素作用、抗雄激素作用以及其他影响激素代谢的反馈调节和信号传递途径等的研究进行了综述。

支持细胞骨架与血睾屏障的研究进展

血睾屏障(BTB)对精子的发生、穿越及排放有特殊的调控机制。支持细胞骨架成分与BTB有极其密切的关系。支持细胞骨架成分如微丝、微管、中间丝等及其所表达的肌动蛋白、微管蛋白、Claudins、波形蛋白、4.1蛋白家族等多种蛋白,可通过支持、黏附、信号转导和基因位点表达等对BTB的结构和功能起维持和促进作用。着重对支持细胞骨架成分所表达的各种蛋白与BTB的结构和功能的关系做进展性综述。

镉对大鼠附睾体部的损伤及锌的保护作用

目的探讨镉对大鼠附睾体部的超微结构影响及其作用机理。方法单纯小剂量氯化镉（２ｍｇ／ｋｇ体重）及加锌腹腔内注射后，用透射电镜及硫胺素焦磷酸酶（ＴＰＰａｓｅ）电镜细胞化学定量分析。结果镉注射后４ｈ，主细胞出现轻度超微结构损伤；２４ｈ至３ｄ进一步加重；７～１５ｄ退变最严重；３０～６０ｄ基本恢复。ＴＰＰａｓｅ反应产物４ｈ后明显减少，３ｄ后暂时回复，但７～１５ｄ再次下降，６０ｄ恢复正常。锌保护各组主细胞形态正常，ＴＰＰａｓｅ反应产物较单纯镉组量多，至１５ｄ达正常水平。结论镉对大鼠附睾体部的损伤较轻；镉对主细胞ＴＰＰａｓｅ活性的影响比对结构的损伤敏感些；早期损伤系镉的直接毒理作用，后期则由于雄激素水平下降加重损伤。

镉对雄性大鼠颌下腺的影响及丙酸睾酮的保护作用

目的:探讨氯化镉对雄性大鼠颌下腺的影响及丙酸睾酮的保护作用。方法:35只雄性Wistar大鼠分为3组:对照(C)组、镉(Cd)组和镉加丙酸睾酮(Cd+T)组。利用原子吸收火焰法、免疫组化法、透射电镜等作颌下腺组织镉含量测定,雄激素受体(AR)表达和定量分析以及颗粒曲管(GCT)细胞的超微结构观察。结果:镉注射后24h,GCT细胞内出现不同程度的线粒体肿胀和(或)空泡化,胞质和线粒体内可见髓样结构,GCT周围毛细血管内皮细胞线粒体肿胀。7￣15天后上述改变明显加重,部分GCT细胞见胞质广泛肿胀和轻度核溶解,30天后细胞形态仍未恢复正常。Cd+T组的超微结构损伤较相应Cd组轻。Cd组和Cd+T组的镉含量均明显高于C组,Cd+T组的镉含量虽低于相应Cd组,但差异无显著性。各实验组AR表达均少于C组,但Cd+T组的AR表达高于相应Cd组,且在3、7、15天组两者比较差异有显著性。结论:镉对GCT细胞的超微结构有早期直接损伤作用,后期雄激素及其受体减少加重此损伤,补充雄激素对上述损伤有一定的保护效果。

体内冷冻的正常及镉处理小鼠睾丸内血清蛋白质的免疫组织化学研究

目的:了解正常和镉(Cd)处理小鼠睾丸内血清蛋白质渗透性的时相性变化,揭示支持细胞间紧密连接的屏障功能。方法:保持正常动力学的血循环下,运用活体内冷冻技术对曲细精管内白蛋白和IgG进行快速冷冻固定。冷冻固定的睾丸行冷冻置换后作石蜡包埋。5μm厚连续切片分别用于抗鼠血清白蛋白和IgG的免疫组化染色和H.E.染色。结果:正常曲细精管,白蛋白免疫反应产物主要定位于管周肌样细胞周围,以及间质细胞之间和毛细血管内,部分免疫反应产物呈拱型出现在曲细精管上皮基底室内,沿精原细胞表面分布。在依据生精细胞排列而区分的曲细精管上皮周期的不同发育时相,拱型免疫反应产物的数量不同。正常小鼠睾丸内IgG免疫反应的定位型式与白蛋白的免疫定位相似。Cd处理后24h,部分曲细精管上皮内空泡形成和管腔增大,白蛋白和IgG免疫反应产物不仅出现在基底室,而且也见于近腔室的支持细胞和生精细胞之间。结论:运用活体内快速冷冻技术结合血清白蛋白和IgG的免疫组化方法,能清楚地揭示正常和Cd处理小鼠曲细精管内血清蛋白质的不同免疫染色型式,反映体内支持细胞间紧密连接结构的变化。

镉对雄性大鼠脊髓下腰段运动神经元的影响

目的研究镉对成年雄性大鼠脊髓下腰段SNB和DLN运动神经元超微结构和雄激素受体(AR)表达的影响。方法成年雄性大鼠腹腔内反复小剂量注射氯化镉(0.5mg/kg体重和1.0mg/kg体重交替注射)及丙酸睾酮(TP)500μg皮下注射后,采血测定血清睾酮含量,取脊髓L5-6节段进行SNB和DLN运动神经元AR免疫组化及光密度(OD)分析,透射电镜观察SNB和DLN运动神经元超微结构,采用原子吸收石墨炉法测定脊髓镉含量。结果染镉后脊髓内镉含量升高,血清睾酮水平在染镉30d时明显下降。染镉7d、10d、15d,神经元核AR免疫染色平均OD值降低,TP皮下注射2h,AR平均OD值无明显升高;染镉30d,AR平均OD值进一步降低,TP皮下注射2h,AR平均OD值增加,但是只达到单纯染镉7d、10d、15d时水平。染镉后,神经元超微结构无明显改变。结论镉可以蓄积在成年大鼠脊髓内,导致SNB和DLN运动神经元功能损伤,可能与镉所致性功能障碍有关。

做好基础医学课程教学秘书的几点体会

结合工作实际,从热爱教学工作、加强团结协作与合理安排教学、重视教学信息收集、做好考试工作、积极参与教学改革等方面,讨论如何做好高等医学院校有关基础医学教学的教研室教学秘书一职.

多媒体在电镜实习课教学改革中的应用

结合教学的实际情况，对本科生电镜课程实习教学方法进行了改革，除取材部分仍要求学生亲自动手外，主要采用图片阅读的多媒体实习方式。实践表明，这种实习教学方式有助于缓解实习课教学过程中的具体矛盾，同时也扩大了学生的知识面，取得了较好的教学效果，并对以后的教学方法改革提出了设想。

雄性大鼠颌下腺雄激素受体表达及镉和丙酸睾酮对其的影响

目的探测雄性大鼠颌下腺内雄激素受体(AR)表达及细胞分布特征,了解氯化镉和丙酸睾酮对AR表达的影响。方法35只雄性Wistar大鼠分为3组:对照(C)组、镉(Cd)组和镉加丙酸睾酮(Cd+T)组。利用免疫组化SABC法和图像分析系统作AR表达检测及平均光密度(AOD)值定量分析。结果AR在浆液性腺泡(AC)、颗粒曲管(GCT)、纹状管(SD)和排泄管等细胞内均有不同程度的表达,定位以细胞质为主。其中GCT细胞内AR的AOD值最高,SD次之,AC细胞最低。Cd处理24h后,三种细胞内AR的AOD值均见下降,7d时达最低水平,此后有所增加,但到30d时仍低于对照组(P<0.05)。Cd+T处理后,GCT细胞内AR的AOD值明显增加。与3、7、15d时Cd组相比,差别均有显著性。AC和SD细胞内AR的AOD值虽高于相应时间点的Cd组,但两者比较仅在7d时差别有显著性。结论雄性大鼠颌下腺内广泛存在AR,镉可致颌下腺GCT、AC、SD细胞AR表达减少,补充雄激素可明显增加GCT细胞AR表达,但对AC和SD细胞AR表达的影响较小。

活体冷冻固定及冷冻置换的小鼠睾丸组织内血清白蛋白和IgG的免疫组织化学定位

目的了解小鼠睾丸组织内血清白蛋白和IgG渗透性的时相性变化,揭示支持细胞间紧密连接的屏障功能。方法运用活体内冷冻固定技术对小鼠睾丸进行快速冷冻固定和冷冻置换,并作石蜡包埋。5μm厚连续切片用于抗鼠血清白蛋白和IgG的免疫组化染色和H.E染色。结果H.E染色切片显示距冷冻组织表面300-400μm深度范围内的精曲小管结构保存完好,无明显冰晶形成所致的人工损伤。血清白蛋白和IgG免疫反应产物主要定位于精曲小管管周肌样细胞周围,以及间质细胞之间和毛细血管内,部分免疫反应产物呈拱型出现在精曲小管上皮内,并严格限定在基底室,沿精原细胞表面分布。拱型免疫反应产物的数量与精曲小管上皮周期的发育时相密切相关。结论活体内快速冷冻固定和冷冻置换结合血清白蛋白和IgG的免疫组化方法,可很好地保存精曲小管组织结构并清楚地揭示支持细胞间紧密连接结构的时相变化。

镉对雄性大鼠颌下腺超微结构的影响及丙酸睾酮的保护作用

目的探讨氯化镉对雄性大鼠颌下腺超微结构的影响及丙酸睾酮的保护作用。方法35只雄性Wistar大鼠分为3组:对照(C)组、镉(Cd)组和镉加丙酸睾酮(Cd+T)组。利用透射电镜作颌下腺组织颗粒曲管(GCT)细胞的超微结构观察。结果镉注射后24h,GCT细胞内出现不同程度的线粒体肿胀和(或)空泡化,胞质和线粒体内可见髓样结构,GCT周围毛细血管内皮细胞线粒体肿胀。7～15d后上述改变明显加重,部分GCT细胞见胞质广泛肿胀和轻度核溶解,30d后细胞形态仍未恢复正常。Cd+T组的超微结构损伤较相应Cd组轻。结论镉对GCT细胞的超微结构有早期直接损伤作用,后期雄激素减少加重此损伤,补充雄激素对上述损伤有一定的保护效果。

镉对雄性大鼠颌下腺颗粒曲管细胞线粒体的损伤及雄激素保护作用

目的探讨小剂量氯化镉对颌下腺颗粒曲管（GCT）细胞线粒体的损伤及丙酸睾酮的保护作用。方法35只雄性Wistar大鼠分为3组：对照（C）组、镉（Cd）组和镉加丙酸睾酮（CA＋T）组。利用透射电镜作颌下腺GCT细胞线粒体的超微结构观察，并利用image-plus-pro全自动图像分析系统作线粒体损伤的定量研究。结果镉注射后24h,GCT细胞内出现不同程度的线粒体肿胀和（或）空泡化，胞质和线粒体内可见髓样结构，7～15d后上述改变明显加重，30d后细胞形态仍未恢复正常。Cd＋T组的超微结构损伤较相应CA组轻。CA组在镉注射后3～15d，Gcr细胞线粒体的各项指标与对照组相比均有显著差异（P〈0．05）。CA＋T组仅在镉注射后7d和15d，GCT细胞线粒体比表面显著低于对照组（P〈．05）。结论镉对GCT细胞线粒体的超微结构有损伤作用，补充雄激素对上述损伤有保护作用。

5-羟色胺及其受体亚型在慢性前列腺炎大鼠脊髓的差异性表达

目的研究5-HT和5-HT2A、5-HT2C、5-HT5A和5-HTR7受体（5-HTR2A、5-HTR2C、5-HTR5A和5-HTR7）在慢性前列腺炎/慢性盆腔疼痛综合征（CP/CPPS）大鼠T13~S1脊髓节段的差异性表达。方法将SD大鼠随机分为对照组、45 d、60 d和90 d模型组,用自身免疫法构建CP/CPPS模型。用免疫组织化学及RT-PCR法检测脊髓T13~L2、L3~L4和L5~S1节段5-HT及各受体的表达。结果 CP/CPPS大鼠自发性疼痛行为学评分显著高于对照组（P〈0.05）。5-HT在各模型组大鼠脊髓3个节段表达均下降。在T13~L2节段,5-HTR2A、5-HTR5A的表达持续上调（P〈0.05）,5-HT2C、5-HTR7先升高后下降（P〈0.05）;在L3~L4节段各受体表达均先升高后下降（P〈0.05）;在L5~S1节段,5-HT2C、5-HTR5A的表达持续上调（P〈0.05）,5-HTR2A、5-HTR7先升高后下降（P〈0.05）。结论 5-HT及5-HTR2A、5-HTR2C、5-HTR5A和5-HTR7在不同时程CP/CPPS大鼠脊髓出现差异性表达,提示5-HT及其受体参与了CP/CPPS的中枢调控,其具体机制有待进一步的研究。

人慢性肝炎贮脂细胞超微形态的计量学变化

目的探讨人慢性肝炎贮脂细胞（又称肝星状细胞）的转化规律。方法利用肝穿刺活检材料，以半薄切片光镜计数及电镜形态计量学等研究方法，对人慢性迁延性肝炎（５例）、轻度慢性活动性肝炎（５例）、中度慢性活动性肝炎（６例）及重度慢性活动性肝炎（５例）的肝小叶非纤维化区和正常肝组织（８例）的贮脂细胞数量、形态及细胞器含量变化进行观察分析。结果慢性活动性肝炎组肝小叶非纤维化区内贮脂细胞总数（２８．８０±３．９６、２７．１１±３．９６、２７．２０±８．８５）个／２０００００μｍ２明显低于正常肝组（４４．７５±６．８７）个／２０００００μｍ２及慢性迁延性肝炎组（４２．４０±１０．７６）个／２０００００μｍ２；过渡细胞的百分率随病变程度加重而趋向升高；部分贮脂细胞转化为成纤维细胞。结论慢性病毒性肝炎致肝纤维化过程中，贮脂细胞不断向成纤维细胞转化。

性表达上调雌性大鼠乳腺组织P450arom的表达

目的:研究性表达对成年雌性大鼠乳腺组织芳香化酶(P450arom)表达的影响。方法:12只成年雌性SD大鼠随机分为禁欲组和性表达组。光镜下观察各组乳腺组织结构,采用放射免疫法检测外周血及乳腺组织中雌激素水平,采用免疫组织化学技术和Western blotting技术检测乳腺组织P450arom表达变化。结果:与性表达组比较,禁欲60d后,成年雌性大鼠乳腺组织雌激素水平下降(P<0.05),同时乳腺组织P450arom表达也下调(P<0.01)。各组乳腺组织结构光镜下未见明显异常。结论:性表达可能通过上调乳腺组织P450arom表达引起乳腺组织雌激素水平升高。