重庆医科大学病毒性肝炎研究所招聘启事

重庆医科大学病毒性肝炎研究所设在重庆医科大学附属第二医院,同时也是重庆市肝病治疗中心。研究所始建于1979年,正式成立于1985年,1979年成为硕士点,1988年成为博士点,是全国首批博士学位授予点。现在有博士导师7名,培养硕士生40名,博士10余名,并已建立博士后流动站。1985年被卫生部指定为全国肝炎药物临床药理基地之一,从事新药的研究与评价,上市药物再评价。近年来共开展新药临床前研究15项。

重庆麻鸭乙肝动物模型的建立及应用——21种中药抗鸭乙型肝炎病毒初筛研究

采用斑点杂交法检测了重庆地区263份2～3月龄麻鸭血清中的DHBV DNA,用筛选出的阳性病毒血清经腹腔感染1～2日龄的血清DHBV DNA阴性雏鸭,并用该模型进行了21种中药抗乙肝病毒初(?)。结果表明:(1)重庆地区2～3日龄麻鸭DHBV自然感染率为25.48％.(2)经腹腔感染的1～2日龄雏鸭的血清DHBV DNA阳性率1周后为82.90％,并可持续至少2个月。(3)抗乙肝病毒中药初(?)发现用广西叶下珠、苦参治疗2周可使DHBV DNA滴度下降,其余的经体外实验认为有效的抗乙肝病毒中药,动物实验并未获证实。

IL-21与慢性乙型病毒性肝炎的关系研究

白细胞介素21是一类具有潜在的免疫调节作用、含有4个α螺旋结构的Ⅰ型细胞因子,主要由CD4+T和NKT细胞分泌产生。其受体分布极其广泛,通过与IL-21R结合后,IL-21参与子机体的多重免疫调节。如:促进Tfh、Th17等淋巴细胞增殖,增强CD8+T和NK细胞的细胞毒性,诱导B分化为浆细胞;同时又可抑制DC细胞的效应,促进B细胞和NK细胞调亡,以及负性调节Teg细胞的免疫抑制作用。免疫耐受是HBV病毒持续感染的根本原因,而IL-21在慢性乙肝病毒感染的清除及病毒抗原的血清学转换中可能发挥一定的调控作用。

不同产地叶下珠及其联合用药抗鸭乙型肝炎病毒的实验研究

本文应用重庆麻鸭乙型肝炎动物模型进行了不同产地中草药叶下珠及其联合中药苦参及抗菌药环丙沙星的抗鸭乙型肝炎病毒（ｄｕｃｋｈｅｐａｔｉｔｉｓＢＶｉｒｕｓ，ＤＨＢＶ）疗效初探，连续用药１个月后，结果表明：广西叶下珠、云南叶下珠能使鸭血清中鸭乙型肝炎病毒脱氧核糖核酸（ＤＨＢＶＤＮＡ）滴度下降（Ｐ＜０．０５），而重庆叶下珠无此作用（ｐ＞０．０５）；云南叶下珠停药后有血清ＤＨＢＶＤＮＡ回升现象；广西叶下珠与苦参合用，无明显协同作用，但与环丙沙星合用，似有增强抗病毒的作用（Ｐ＜０．０５）。

广西叶下珠抗鸭乙型肝炎病毒的实验研究

用重庆麻鸭乙型肝炎动物模型，观察广西叶下珠体内抗鸭乙型肝炎病毒（ＤＨＢＶ）的作用。用广西叶下珠治疗１月，检测用药前后血清中的ＤＨＢＶ ＤＮＡ及转氨酶、肝组织病理等。广西叶下珠用药２周、１月能使血清ＤＨＢＶ ＤＮＡ总体水平显著降低（Ｐ＜０．０５或Ｐ＜０．０１），且停药后ＤＮＡ滴度回升不明显。血清转氨酶检查及肝脏常规ＨＥ染色病理检查未发现叶下珠对肝脏有明显的毒性损害。广西叶下珠在体内有抗鸭乙型肝炎病毒的作用。

肝苏颗粒浸膏粉抗鸭乙型肝炎病毒的实验研究

目的:观察肝苏颗粒浸膏粉(以下简称肝苏)体内抗鸭乙型肝炎病毒(DHBV)的作用,为临床治疗乙肝病毒感染提供实验依据。方法:采用重庆鸭乙型肝炎动物模型,用肝苏口服治疗4W,停药观察1W,检测用药前后血清的DHBV DNA、DHBsAg、转氨酶(ALT、AST)及肝组织病理变化。结果:肝苏各剂量组用药后血清DHBV DNA滴度显著降低或极显著降低(P<0.05或P<0.01),停药1W后中、小剂量组血清DHBV DNA有明显回升现象,而大剂量组DHBV DNA回升现象不明显。其抗病毒效果与剂量大小有一定的关系。用药前后血清DHBsAg O.D值(490nm)的变化与DNA滴度改变相似;此外,肝脏病理学检查及治疗4W、停药1W后血清ALT、AST检查未发现该药对鸭肝组织有明显的毒性损害。结论:连续用肝苏1个月在鸭体内有抗鸭乙型肝炎病毒的作用。

核苷(酸)类似物经治的慢性乙型肝炎患者低病毒血症的研究现状

临床上广泛使用的一线抗HBV药物核苷(酸)类似物(NAs)可有效地抑制HBV DNA复制,显著减缓慢性乙型肝炎(CHB)患者的疾病进展,减少包括肝衰竭和肝癌在内的终末期肝病的发生。然而,临床上有一部分CHB患者在接受一线NAs治疗48周或更长时间后,其血清HBV DNA仍持续或间歇性地高于灵敏核酸试剂的检测下限。本文作者经讨论对低病毒血症(LLV)形成如下定义:持续性LLV,指对接受恩替卡韦、富马酸替诺福韦酯或富马酸丙酚替诺福韦治疗48周及以上的CHB患者,用灵敏的定量PCR方法至少连续检测2次,每次间隔3~6个月,HBV DNA均阳性,但<2000 IU/ml;间歇性LLV是指用灵敏的qPCR法至少连续检测3次,每次间隔3~6个月,HBV DNA为间歇性阳性,但<2000 IU/ml。诊断LLV应注意排除患者存在用药依从性和耐药突变的问题。LLV可能与NAs治疗下肝纤维化进展及肝硬化患者肝细胞癌风险增加有关,但目前对LLV发生后原治疗方案是否需要调整仍存在争议。综述了NAs治疗下LLV的发生率及其对临床预后的影响,并分析了LLV发生的可能机制,以期为今后NAs经治LLV患者的管理提供参考。

鸭γ干扰素体外抑制鸭乙型肝炎病毒复制的实验研究

目的 在体外模型中系统研究DuIFN γ对鸭乙型肝炎病毒 (DHBV)复制的影响 ,探讨其抑制病毒复制的可能机制。方法 用重组DuIFN γ及DHBV特异抗原刺激的PBMC上清液 ,分别作用于DHBV慢性感染的原代鸭肝细胞 (PDH) ,检测PDH上清液中DHBVDNA、DHBsAg浓度和胞内病毒复制水平。结果 1U mL、1 0U mL重组DuIFN γ可以抑制培养细胞上清液中DHBVDNA和DHBsAg的分泌 ,与慢性感染对照组比较 ,P <0 .0 5。病毒复制的抑制水平 (包括细胞内DHBV总DNA、闭合环状DNA以及上清液中病毒颗粒和DHBsAg)与DuIFN γ作用呈时间、剂量依赖性 ,但DHBV特异抗原刺激的PBMC上清液无明显抑制病毒复制的作用。结论 DuIFN

小柴胡汤胶囊抗鸭乙型肝炎病毒的实验研究

目的:观察小柴胡汤胶囊体内抗鸭乙型肝炎病毒(DHBV)的作用。方法:采用重庆麻鸭乙型肝炎动物模型,用小柴胡汤胶囊口腔灌服治疗1个月,检测用药前后血清中的DHBV DNA及血清转氨酶(ALT、AST)、肝组织HE染色病理检查。结果:小柴胡汤胶囊大剂量组用药2周、1个月及中、小剂量组用药1个月能使血清中DHBV DNA滴度总体水平显著降低(P<0.05)或极显著降低(P>0.01),但停药1周后有DNA滴度回升现象;其抗病毒效果与剂量大小有关,中、小剂量组用药2周后无明显的抑制病毒DNA的效果,而大剂量组用药2周后有明显的降低病毒DNA的效果。此外,肝脏病理检查及治疗1个月、停药1同后血清转氨酶检查未发现该药对鸭肝组织学和转氨酶有明显的影响。结论:小柴胡汤胶囊在鸭体内有一定的抗鸭乙型肝炎病毒的作用。

阿的福韦在鸭乙型肝炎模型及2.2.15细胞中抗乙型肝炎病毒的药效研究

目的 :观察阿的福韦体内抗鸭乙型肝炎病毒 (DHBV)的作用及体外抗乙型肝炎病毒 (HBV)效果。方法 :采用鸭乙型肝炎动物模型 ,用阿的福韦口服治疗 10天 ,检测用药前后血清中的DHBVDNA、DHBsAg ,并取肝脏样本提取总DNA ,作SouthernBlot分析。此外 ,以 2 .2 .15细胞为靶细胞 ,给药后通过检测细胞培养液中HBsAg、HBeAg和HBVDNA观察阿的福韦抗HBV效果。结果 :阿的福韦各剂量组用药后均能使血清中的DHBVDNA显著降低或极显著降低 (P <0 .0 5或P <0 .0 1) ,但停药后有DHBVDNA回升现象 ;用药前后DHBsAg无明显改变。肝组织SouthernBlot分析亦显示用药后肝脏中DHBVDNA有明显降低 ,停药后DHBVDNA反跳明显。大剂量阿的福韦加入细胞培养 12天 ,对HBsAg抑制率为 17.0 1% ,对HBeAg抑制率为 2 6 .80 % ,对HBVDNA抑制率为 2 6 .92 %。结论 :阿的福韦在鸭体内有抗鸭乙型肝炎病毒的作用 ,但停药后DHBVDNA有“反跳”现象 ;

叶下珠有效部位抗鸭乙型肝炎病毒及体外抗HBV活性的研究

本文观察了叶下珠有效部位总提取物对鸭乙型肝炎病毒感染模型的影响,结果150 、300 、600 mg/kgig 2 周和1 个月均可使血清DHBVDNA 滴度总体水平明显降低,停药后回升不明显。用药1 个月还可使ALT 明显降低,肝组织病理改变减轻。体外试验70 、100μg/ml 能抑制2-2-15 细胞培养上清液中的HBeAg 。

病毒性肝炎肝衰竭死亡患者的临床特征分析

目的:分析病毒性肝炎所致肝衰竭死亡患者的原因,以期对临床治疗有一定的指导作用。方法:采用回顾性分析方法,收集我科5年的病毒性肝炎肝衰竭住院死亡病例115例,摘录每例病例的临床和实验室检查数据,临床和实验室检查数据的采集选用明确诊断时的检查和死亡前的最后1次检查作为研究资料。结果:年龄平均45.7岁,男性103例;慢性重型肝炎89例;肝硬化20例;114例乙肝标志物阳性,其中12例重叠其它嗜肝病毒感染;110例病例中,HBeAg阳性有24例(24/110,21.8%),HBeAb阳性有61例(61/110,55.5%);85例病例中,HBVDNA定量>1×105copies/ml者有68例(68/85,80%),HBVDNA定量<1×105copies/ml者有17例(17/85,20%);入院时TBil、PTA、ALT分别为403.17±219.43、38.33±19.14、496.78±801.56;死亡时TBil、PTA、ALT分别为478.03±234.89、32.39±16.54、218.04±426.58。出现严重的并发症。结论:病毒性肝炎肝衰竭病人主要以慢性重型肝炎和肝硬化为主,HBVDNA的活跃复制及病毒的变异对病情的发展有一定的影响,应积极寻求早期的抗病毒治疗;并发症发生率高,应积极控制并发症的发生,有利于病情的转归。

急性鸭乙型肝炎病毒感染病毒清除机理研究

目的 :进一步阐明嗜肝病毒自然感染过程中病毒清除机理。方法 :7只 2～ 3月龄成年重庆麻鸭静脉接种 10～ 2 0mlDHBV阳性血清 (5× 10 8～ 1× 10 9genome) ,接种后每周采血检测外周血中DHBVDNA、DHBsAg和特异抗体的产生 ;感染后第10、35天分离外周血单个核细胞用于抗原特异细胞增殖实验 ;第 5、30、6 0天取肝组织标本进行DHBVDNASouthern杂交、DHB sAg免疫组化及肝组织病理检测。结果 :DHBV感染成年鸭在 1～ 2w潜伏期后出现急性、一过性感染 ,感染高峰期肝内存在多拷贝的DHBV所有复制中间体形式 ,包括cccDNA。进一步分析显示病毒血症的消失是在快速抗原特异细胞增殖反应和高滴度特异抗体产生之后 ;与此同时 ,整个急性感染期间 ,肝细胞并无明显的损害。结论 :非细胞直接损伤机制在嗜肝病毒清除过程中发挥了重要作用。

慢性重型肝炎患者乙肝病毒C基因变异的初步研究

目的 探讨乙肝病毒C基因变异与乙型肝炎患者病情的关系。方法 用聚合酶链反应 (PCR)对 2份慢性重型乙型肝炎患者血清及 1份乙肝病毒无症状携带者血清进行C基因扩增和克隆 ,经核苷酸序列分析 ,与我国HBV克隆株pADR 1比较。结果 乙肝病毒无症状携带者的C基因与pADR 1的基因相似 ;而慢重肝患者C基因变异率较高 ,各有 1 9和 1 4个核苷酸变异。

万乃洛韦抗鸭乙型肝炎病毒的实验研究

目的 观察万乃洛韦在体内抗鸭乙型肝炎病毒 (DHBV)的作用 ,为临床治疗乙型肝炎病人提供实验依据。方法 采用重庆麻鸭乙型肝炎动物模型 ,用万乃洛韦治疗 1个月 ,检测用药前后血清中的DHBVDNA及转氨酶、肝组织病理、肝组织中的DHBVDNA等。结果 万乃洛韦用药 1月能使血清DHBVDNA总体水平显著降低 (P <0 .0 5或P <0 .0 1) ,各剂量组血清DHBVDNA有阴转现象。肝脏病理检查及血清转氨酶检查发现 ,万乃洛韦对肝组织无明显影响 ,大剂量用药组ALT虽有轻度升高 ,但停药后即恢复正常。SouthernBlot检测肝组织内DHBVDNA ,提示该药能抑制病毒在肝内的复制 ,但不能彻底清除超螺旋DNA。

慢性丙型肝炎病毒感染者外周血滤泡辅助T淋巴细胞的变化研究

目的研究滤泡辅助T淋巴细胞(TFH细胞)在慢性丙型肝炎病毒(HCV)感染者外周血的变化特点及其与疾病特征的相关性。方法共纳入20名健康对照者和23例HCV感染者,其中4例接受聚乙二醇干扰素α联合利巴韦林治疗。流式细胞术检测外周血CD4^+CXCR5^+TFH细胞比例变化。结果慢性HCV感染者外周血CD4^+CXCR5^+TFH细胞占单个核细胞的比例为5.845%(2.680%~14.200%),健康对照组为3.765%(1.200%~8.520%)(u=124.5,P=0.010 6);占CD4^+T淋巴细胞的比例,感染组和对照组分别为14.800%(8.440%~36.600%)和9.550%(2.700%~21.800%)(u=132.0,P=0.017 6)。CD4^+CXCR5^+TFH细胞比例与HCV RNA载量呈负相关(r=-0.432 8,P=0.039 1),与GPT和GOT无相关性。抗病毒治疗后HCV感染者TFH细胞比例降低。结论 CD4^+CXCR5^+TFH细胞可能参与了慢性HCV感染机体抗病毒免疫应答。

人MxA基因重组真核载体抗乙型肝炎病毒作用的实验室研究

目的:研究重组真核载体PcDNA3.1-MxA体外抗HBV的作用,为研究MxA基因(myxovirus-resistant A)治疗慢性HBV感染奠定基础。方法:将构建成功的重组真核载体PcDNA3.1-MxA转染入HepG2.2.15。将HepG2.2.15分为实验组(转染PcDNA3.1-MxA的HepG2.2.15)和对照组(转染PcDNA3.1的HepG2.2.15),应用RT-PCR方法检测两组HepG2.2.15内MxA mRNA(P<0.01),并应用ELISA法检测两组HepG2.2.15内HBsAg、HBeAg的水平。结果:RT-PCR扩增结果显示实验组的MxA mRNA水平均较对照组明显升高,实验组HBsAg、HBeAg水平明显低于对照组(均P<0.01)。结论:转染重组真核载体PcDNA3.1-Mx AHepG2.2.15内MxA蛋白明显抑制了HBV DNA的复制及表达,为进一步研究MxA蛋白体内抗病毒作用提供理论。

叶下珠制剂抑制乙型肝炎病毒作用的实验研究

目的：观察四川叶下珠的抗乙型肝炎病毒（ＨＢＶ）作用。方法：ＨｅｐＧ２．２．１５细胞培养３６小时后，再用含不同浓度叶下珠的培养液培养４８小时，测定培养上清液中的 ＨＢｅＡｇ含量。结果：四川叶下珠可有效地抑制 ＨｅｐＧ２．２．１５细胞ＨＢｅＡｇ的表达，其中１００、１５０μｇ／ｍｌ两个浓度组的作用最强。结论：四川叶下珠具有一定的抗ＨＢＶ作用。

丙型肝炎抗病毒新药研究进展

全球约1／3人群感染丙型肝炎病毒（HCV）。HCV感染是慢性肝炎、肝硬化和肝衰竭的主要病因之一，慢性丙型肝炎的有效治疗方法在全球均是紧迫的医疗难题之一。相当多的慢性丙型肝炎患者，特别是基因1、4型HCV感染者、原发无应答者、

乙型肝炎病毒耐药变异及其检测研究进展

目前慢性乙型肝炎病毒（HBV）感染的抗病毒治疗主要依靠核苷（酸）类似物（NA）。虽然NA能有效地抑制HBV复制,但短期抗病毒治疗并不能完全清除HBV,通常需要延长疗程。先期进入临床应用的NA,如拉米夫定、替比夫定、克拉夫定、阿德福韦酯等的耐药发生率越来越高;虽然恩替卡韦和替诺福韦在初治患者中发生耐药的风险很低,但一旦出现与先前耐药患者的交叉耐药则很难处理。而且,随着低耐药屏障NA的序贯应用,多药耐药已成为严峻的挑战。为防治慢性乙型肝炎（CHB）抗病毒治疗中耐药的发生。弄清楚其耐药机制及诊断十分必要。