Ⅱ型呼吸衰竭急性加重期患者血清sICAM-1及IL-12变化的探讨

目的:为了探讨Ⅱ型呼吸衰竭急性加重期患者血清及的动态变化。sICAM-1IL-12方法:动态观察例Ⅱ型呼吸衰31竭急性加重期患者及例哮喘发作期患者治疗前后血清及变化情况,采用双抗体夹心法测定。20sICAM-1IL-12ELISA结果:Ⅱ型呼吸衰竭急性加重期及哮喘发作期患者治疗前血清水平明显高于健康组,差异有显著性(sICAM-1p<),治疗后均较0.01前有所下降,但均高于正常,变化无显著性。IL-12结论:血清及变化对判断Ⅱ型呼吸衰竭急性加重期患者病情sICAM-1IL-12轻重、估计预后及了解机体免疫病理过程有重要意义。

低渗液体外培养对气道上皮黏液分泌的影响及与水通道蛋白-5表达的相关性研究

目的 探讨体外气液界面培养气道上皮在低渗液条件下黏液分泌与水通道蛋白-5（AQP5）表达间的关系，以进一步阐明渗透浓度、AQP5在慢性气道黏液高分泌过程中的地位和作用。方法利用体外气液界面细胞培养模型，进行兔气道上皮细胞原代培养。培养1周后，培养液渗透浓度换为235mmol／L（实验A组）、255mmol／L（实验B组）、270mmol／L（实验C组）和282mmol／L（对照组）。培养12h后，采用逆转录-聚合酶链反应（RT—PCR）检测各组AQP5mRNA表达，采用蛋白质免疫印迹法检测上清液中黏蛋白5AC（MUC5AC）分泌量。结果 倒置显微镜下各培养组细胞成多层生长。各实验组中MUC5AC分泌量均高于对照组（P〈0．001），其中以实验A组为最高；而AQP5 mRNA均明显低于对照组（P〈0．001），以实验A组为最低；实验组AQP5mRNA表达与MUC5AC呈显著负相关（r=-0.77，P〈0.001）。结论 在气液界面细胞培养模型中，低渗液条件下MUC5AC分泌量显著增加，较好地模拟了慢性气道炎症黏液高分泌的体内环境；AQP5mRNA表达与MUC5AC呈显著负相关。低渗环境以及由此引起的AQP5mRNA表达可能参与慢性阻塞性肺疾病黏液高分泌的形成过程。

含长春瑞滨与含吉西他滨两方案治疗老年非小细胞肺癌的对比研究

目的:对比观察长春瑞滨(NVB)联合顺铂(DDP)方案及吉西他滨(Gemcitabine,GEM)联合DDP方案在晚期老年非小细胞肺癌临床疗效及毒性反应。方法:51例晚期老年肺小细胞肺癌随机分为两组,长春瑞滨组25例,吉两他滨组26例。结果:所有被研究对象的症状均有不同程度的改善。长春瑞滨组完全缓解(CR)1例,部分缓解(PR)9例,有效率为40.0％,占西他滨组CR2例,PR9例,有效率为42.3％,两组间差异无显著性(P>0.05),中位生存期(MST)长春瑞滨组为9.2个月,吉西他滨组为9.6个月,中位缓解时间两组分别为4.0个月及4.3个月。毒性反应:长春瑞滨组白细胞Ⅲ/Ⅳ度下降发生率为28％,吉西他滨组白细胞Ⅲ/Ⅳ度下降占23％,但吉西他滨组血小板Ⅲ/Ⅳ度下降有5例,占19％,明显高于长春瑞滨组(P<0.05)。长春瑞滨组发生静脉炎5例,占20％,明显高于吉西他滨组(P<0.05)。结论:吉西他滨联合顺铂与长春瑞滨联合顺铂对晚期老年非小细胞肺癌的近期临床疗效相近,中位生存期及中位缓解期均相似,毒性反应总的较轻,NP及GP方案均可作为治疗晚期老年非小细胞肺癌的一种安全、有效的化疗方案。

中性粒细胞蛋白酶抑制剂elafin在毕赤酵母中的表达及活性检测

中性粒细胞蛋白酶抑制剂elafin是中性粒细胞弹性蛋白酶特异性抑制剂。为建立中性粒细胞蛋白酶抑制剂elafin毕赤酵母表达系统,通过逆转录PCR扩增获取elafincDNA,双酶切后定向克隆至穿梭质粒pPIC9K上。SalI酶切线性化后,电穿孔法转至毕赤酵母GS115菌株中,PCR筛选出阳性克隆,接种至最小甘油缓冲培养基中,甲醇诱导表达后,取上清阳离子交换层析纯化靶标蛋白。分别以western-blot、弹力纤维蛋白-聚丙烯酰胺凝胶电泳检测重组elafin免疫原性、抗蛋白酶活性。重组elafin在毕赤酵母系统中呈分泌性表达,产量及活性高,分离纯化简便。此表达系统的建立为其后续研究及临床应用奠定了基础。

转染重组Elafin对炎症状态下巨噬细胞表面受体CD14的保护作用

目的:研究转染重组Elafin对炎症状态下巨噬细胞表面受体CD14的保护作用。方法:重组质粒pEG-FP-C1-Elafin转染入离体培养巨噬细胞株,与多形核中性粒细胞(polymorphonuclear granulocyte,PMN)、脂多糖(li-popolysaccharide,LPS)共作用4 h后,倒置荧光显微镜观察重组Elafin胞内表达,流式细胞仪检测巨噬细胞表面受体CD14表达情况。同时,转染重组质粒的巨噬细胞与凋亡PMN共孵育1 h后,观测结合凋亡PMN的巨噬细胞百分比。结果:pEGFP-C1-Elafin转染入巨噬细胞后被成功表达,其表面受体CD14数量明显升高,结合凋亡PMN的巨噬细胞的数量的增加。结论:通过转染重组人Elafin,可保护炎症状态下巨噬细胞表面凋亡相关受体CD14,促进PMN凋亡。

心脏生物标志物联合肺栓塞严重程度指数对急性肺栓塞症诊断及危险分层的研究

目的检测急性肺栓塞(APE)患者血浆中B型钠尿肽(BNP)和肌钙蛋白I(cTnI)的浓度,研究肺栓塞严重程度指数(PESI)、cTnI、BNP对APE诊断及预后的预测价值。方法选取2010年1月-2013年1月确诊的共96例APE患者,同时选取同期非APE对照者50例。对入选者进行肺栓塞严重指数(PESI)评分,据分值大小分为低危组、中危组、高危组;根据cTnI与BNP结果分组为阳性组及阴性组。分析PESI、cTnI和BNP在APE患者诊断与危险分层的预测价值。结果 APE患者中低危、中危与高危各组大面积、次大面积APE构成比随组别增高而升高(P<0.01);cTnI阳性组大面积、次大面积APE占82.9%,cTnI阴性组非大面积APE占81.9%;BNP阳性组大面积、次大面积APE占73.3%,BNP阴性组非大面积APE占86.3%。cTnI、BNP阳性组右心功能不全、心源性休克及死亡的发生率明显高于阴性组(P<0.01)。结论联合检测cTnI、BNP结合PESI评分在APE的诊断和危险分层中具有重要意义。

慢性气道炎症黏液高分泌的分子机制

近年来,在气道黏液高分泌的病理生理机制研究方面取得了明显进展。通过细胞内信号传递,在特定介质下活化转录及转录后程序,促进黏蛋白分泌增加.对气道黏蛋白基因转录及转录后调控的进一步研究,将有助于更好了解慢性气道炎症黏液高分泌信号转导通路,为慢性阻塞性肺部疾病防治提供新的方向。