食管癌术后并发乳糜胸的原因及治疗

目的:探讨食管癌术后并发乳糜的原因及治疗方法。方法:分析13例食管癌术后发生乳糜胸者的手术过程及术后引流量等相关指标。结果:本组13例中12例行主动脉弓上吻合,1例主动脉下吻合。术后病理均为鳞状细胞癌;其中T1 2例,T2 3例,T3 8例;N0 8例,N1 5例,M0 13例。术后引流量320￣1530ml/天,平均560ml/天,白蛋白总用量30￣210g,血浆总用量1000￣8000ml;9例行二次开胸胸导管结扎术治疗,两次手术间隔时间9￣21天。4例保守治疗,胸腔注射重组人血白介素II等。全部病例均治愈。结论:肿瘤外侵处,主动脉弓后和弓上部位胸导管易受损伤,此为产生乳糜胸的主要原因,手术部位的良好显露在一定程度上可避免胸导管损伤。胸腔引流量平均在500ml/d以上,保守治疗1w无好转者,应考虑手术治疗。

嗜肿瘤Ⅰ型单纯疱疹病毒介导GALV fus基因治疗肺腺癌的体外试验研究

目的:探讨特异性启动子UL38及无肿瘤特异性巨细胞病毒启动子(CMVP)调控的嗜肿瘤Ⅰ型单纯疱疹病毒(HSV-Ⅰ)介导的长臂猿白血病病毒致融性外膜糖蛋白(GALV.fus)基因系统体外对人肺腺癌的选择性杀伤效应。方法:选择非洲绿猴肾细胞(Vero),肺腺癌细胞(A549)和正常人胚胎成纤维细胞(HFL-Ⅰ GNHu 5),将构建成功的重组HSV-Ⅰ载体通过脂质体转染、导入包装细胞Vero中制备重组HSV-Ⅰ病毒,用来转染A549和HFL-Ⅰ GNHu 5,观察其转染、表达状况及体外抗肿瘤作用,增强型绿色荧光蛋白(EGFP)基因片段取代GALV.fus作对照质粒。提取受染A549和HFL-Ⅰ GNHu 5细胞的总蛋白,以Western Blot法鉴定GALV.fus基因的表达。结果:成功包装重组HSV-Ⅰ载体,致融性病毒感染A549后引起强烈的细胞膜融合,且杀伤作用随着感染剂量的增加而增强。而非致融病毒仅引起病毒细胞毒性效应,细胞呈圆形,镜下未见细胞融合斑。CMVP调控的重组HSV-Ⅰ在HFL-ⅠGNHu 5生长静止抑制状态均引起细胞膜融合,UL38P调控的重组HSV-Ⅰ仅在生长状态导致细胞膜融合;而细胞处于静止和抑制状态时,不引起细胞膜融合以及任何细胞病理改变。以Western Blot法检测受染A549和HFL-Ⅰ GNHu 5细胞,均可检到GALV.fus基因蛋白表达。结论:UL38p调控的GALV.fus基因在有效的载体内对体外肺癌细胞有强效的选择性杀伤效果和应用安全性,为临床肺癌治疗探索出一种新型基因治疗方法。

多项生物指标检测与食管癌预后的关系

目的 探讨肿瘤相关基因及细胞增殖活性检测对食管癌预后判断的价值。方法 用免疫组化ABC法检测118例食管癌组织中P5 3,C erbB 2 ,PCNA ,Ki 6 7产物的表达 ,用COX比例风险模型分析 4项指标与食管癌患者预后的关系。结果 经COX模型分析发现 4项指标与食管癌患者预后均有显著关系。将 118例患者分为淋巴结阳性及阴性两组 ,经COX模型分析显示P5 3,C erbB 2表达仅与淋巴结阳性食管癌患者的预后有关。PCNA ,Ki 6 7增殖指数与淋巴结阴性食管癌患者预后有关。结论 食管癌组织中PCNA ,Ki 6 7增殖指数检测对食管癌预后判断有很重要价值。

壳寡糖通过p38MAPK糖基化修饰抑制TNF-α诱导的EA.hy926细胞IL-6、IL-8的表达

目的探讨壳寡糖对血管内皮细胞损伤的保护机制。方法以EA.hy926血管内皮细胞为研究对象,通过TNF-α刺激,建立高表达IL-6、IL-8的内皮细胞损伤模型。以RT-PCR和ELISA方法分别从mRNA和蛋白水平检测壳寡糖对IL-6、IL-8表达的影响。采用Western blot方法检测壳寡糖对p38MAPK信号通路及糖基转移酶(OGT)表达的影响。分析验证p38MAPK信号通路抑制剂和葡萄糖氨对TNF-α诱导的IL-6、IL-8表达的影响。结果成功建立了TNF-α诱导的高表达IL-6、IL-8的血管内皮细胞损伤模型。壳寡糖可从mRNA转录和蛋白翻译水平抑制IL-6、IL-8的表达。初步揭示壳寡糖对TNF-α诱导血管内皮细胞表达IL-6、IL-8的抑制作用可能是通过p38的磷酸化和O-连接糖基化相互作用来完成的。结论壳寡糖可通过OGT调控TNF-α诱导的EA.hy926细胞IL-6、IL-8的表达,保护血管内皮细胞,减少炎症损伤。

非小细胞肺癌组织中血管内皮生长因子和变异型细胞间黏附分子的表达

目的 了解血管内皮生长因子 (VEGF)、变异型细胞间黏附分子 (CD4 4v6 )在非小细胞肺癌 (NSCLC)组织中的表达。方法 采用链霉素抗生物素蛋白 过氧化物酶 (SP)免疫组织化学方法 ,分析VEGF、CD4 4v6在 35例Ⅰ～Ⅱ期、2 7例Ⅲ～Ⅳ期NSCLC患者的癌组织中的表达 ,其中 5 0例患者有淋巴结转移、12例患者无淋巴结转移 ,中、高分化 39例、低分化 2 3例 ;随访 1997年 1月至 1999年 7月期间治疗的 4 2例患者 ,计算 3年生存率 ,用Cox比例风险模型分析生存时间的影响因素。结果 VEGF、CD4 4v6在NSCLC组织中表达阳性率分别为 73% (45 /6 2 )、6 9% (43/6 2 ) ,均明显高于癌旁正常组织 (χ2 值分别为 2 4 2 0 7、2 5 186 ,P均 <0 0 1)。VEGF、CD4 4v6的表达与临床分期及有无淋巴结转移有明显相关 ,有淋巴结转移者的阳性率明显高于无淋巴结转移者 (χ2 值分别为 7 14 6、5 376 ,P均 <0 0 5 ) ;Ⅲ～Ⅳ期患者的VEGF、CD4 4v6阳性率均明显高于Ⅰ～Ⅱ期患者 (χ2 值分别为6 392、12 15 2 ,P均 <0 0 5 )。VEGF、CD4 4v6阳性患者的 3年生存率 ,均明显低于阴性患者 (χ2 值分别为 4 36、7 2 1,P均 <0 0 5 )。除TNM临床分期、有无淋巴结转移外 ,VEGF及CD4 4v6也为影响患者 3年生存率的独立因素。结论 VEGF、CD4

携带GALV. fus基因的重组单纯疱疹病毒-Ⅰ的构建及抗肺腺癌裸鼠荷瘤实验研究

目的探讨重组单纯疱疹病毒-Ⅰ(HSV-Ⅰ)介导的长臂猿白血病病毒致融性外膜糖蛋白(GALV.fus)基因系统对肺腺癌的体内外杀伤效果。方法扩增已成功构建的HSV-UL38P-GALV.fus、HSV-CMVP-GALV.fus、HSV-CMVP-EGFP质粒,在Vero细胞用脂质体转染、包装成重组嗜肿瘤HSV-Ⅰ,分别命名为Synco-2、Synco-1、Baco-1。重组HSV-Ⅰ的纯化采用氯化铯纯化法,病毒滴度测定采用半数组织培养感染剂量法(TCID50)。将构建成功的重组HSV-Ⅰ体外转染肺腺癌细胞(A549)及裸鼠转移瘤模型,模型分A(Control)组、B(Baco-1)组、C(Synco-1)组、D(Synco-2)组、E(Synco-2)组,观察其转染、表达状况及体内外抗肿瘤作用。结果成功包装了3种重组HSV-Ⅰ,TCID50法测得病毒滴度分别为3×1010pfu/mL、1×1011pfu/mL和4×1010pfu/mL。重组病毒对A549细胞有明显的杀灭作用,Synco-1、Synco-2组各时点细胞存活率均低于Baco-1组(P<0.01)。C、D组裸鼠肿瘤体积于第1周及以后各时点小于A、B组(P<0.01);C、D组间前3周肿瘤体积差异无统计学意义(P>0.05),4、5周D组小于C组(P<0.01)。第5周C组〔(0.544±0.07)g〕、D组〔(0.467±0.09)g〕肿瘤质量与A组〔(2.412±0.55)g〕及B组〔(1.522±0.61)g〕相比减轻(P<0.01),C、D组间差异亦有统计学意义(P<0.01)。结论成功包装、扩增及纯化3种重组HSV-Ⅰ,重组GALV.fus基因系统在有效的载体及特异性启动子调控下在体内外对肺癌细胞有强效的抗肿瘤作用,为肺癌治疗探索出一种新型基因治疗方法。

心脏刀刺伤13例抢救体会

心脏刀刺伤１３例抢救体会陈国才江跃全临床资料我科从１９７５年５月～１９８８年５月收治心脏刀刺伤１３例，均为男性；年龄１３～１８岁．伤后到达医院时间，最作者单位：６３００１０重庆医科大学第二附属医院胸心外科短１５分钟，最长２小时．左心前区刀刺伤１２例，...

IL-8对肺腺癌A549细胞迁移的影响及其机制探讨

探讨IL-8对肺腺癌A549细胞迁移的影响及其可能机制。用MTT法选择了合适的IL-8使用浓度。分别用划痕试验及Transwell试验证明了IL-8可以促进肺腺癌A549细胞的迁移。Westernblot结果表明:(1)IL-8可以促进MMP-2蛋白的表达,而对MMP-9的表达无明显影响;(2)IL-8可促进JNK/SAPK磷酸化蛋白的表达;(3)抑制剂(SP600125)可以阻断IL-8对MMP-2蛋白表达的影响。划痕试验从反面验证了低表达的MMP-2可以抑制A549细胞的迁移。表明IL-8可通过JNK/SAPK信号通路调控MMP-2蛋白的表达,进一步促进肺腺癌A549细胞的迁移。