皮质酮对原代培养海马神经元中IDO和5-HTT的调控作用

目的探讨皮质酮对原代培养海马神经元的吲哚胺2,3-双加氧酶(IDO)和5-HT转运体(5-HTT)的调控作用。方法取怀孕18 d的SD大鼠分离的胎鼠海马神经元进行原代培养。采用MTT比色法检测海马神经元存活率;采用实时荧光定量PCR(qPCR)和Western blot分别检测IDO、5-HTT和脑源性神经营养因子(BDNF)mRNA及蛋白的表达水平。结果皮质酮呈时间和浓度依赖性地降低海马神经元存活率,5μmol/L作用24 h引起海马神经元明显损伤(P<0.05)。同时,IDO mRNA和蛋白表达水平显著升高(P<0.05),BDNF mRNA和蛋白的表达水平则显著降低(P<0.05)。皮质酮的作用可以被其受体拮抗剂米非司酮(Ru-486)逆转(P<0.05),而对5-HTT mRNA和蛋白的表达均没有明显作用(P>0.05)。结论皮质酮通过激动皮质酮受体,上调IDO,降低BDNF表达水平,从而损伤海马神经元;皮质酮的作用可能不是通过5-HTT介导产生的。

积雪草苷在SD大鼠体内组织分布的研究

目的:研究积雪草苷在SD大鼠体内的组织分布情况。方法:尾静脉注射SD大鼠有效治疗剂量42 mg·kg^(-1),于5,30,80 min将大鼠拉断脊椎处死,立即解剖取出心、肝、脾、肺、肾、胃、肠、脑、生殖腺、左大腿肌肉组织,采用HPLC法测定各组织中积雪草苷的含量。结果:积雪草苷在SD大鼠体内分布广泛,其中心浓度最高,其次是肝、脑、肺、脾、肾,其他组织相对较低。结论:本研究方法方便、灵敏、准确,可用于大鼠组织中积雪草苷含量的测定。

丙泊酚衍生物CQMU-039对全脑缺血再灌注模型大鼠脑损伤的保护作用

目的:研究丙泊酚衍生物CQMU-039对全脑缺血再灌注模型大鼠脑损伤的保护作用及其机制。方法:取大鼠48只,随机均分成模型组、丙泊酚组(丙泊酚注射液,100mg·kg-1)、假手术组和CQMU-039低、中、高剂量组(CQMU-039生理盐水溶液,20、50、100mg·kg-1),采用夹闭双侧颈总动脉合并低血压建立全脑缺血再灌注模型,术后30min腹腔注射相应药物,术后第8天观察各组大鼠空间学习记忆能力(以寻台潜伏期为指标)、海马组织形态变化及脑组织中超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、神经生长因子β(NGF-β)、特导性半胱氨酸蛋白酶3(Caspase-3)活性的变化情况。结果:与模型组比较,丙泊酚组和CQMU-039中、高剂量组大鼠的寻台潜伏期明显缩短,脑组织中MDA、Caspase-3活性明显下降,SOD、NGF-β活性明显升高(P均<0.01);CQMU-039组大鼠海马组织损伤与剂量呈负相关。结论:CQMU-039可能通过提高机体清除自由基的能力、抑制细胞凋亡、增强神经营养等方面减轻全脑缺血再灌注模型大鼠的脑损伤而发挥保护作用。

石榴皮提取物对大鼠幽门结扎所致胃损伤的保护作用研究

目的:研究石榴皮提取物对大鼠实验性胃损伤的保护作用及其与胃黏膜前列腺素E(2PGE2)和6-酮-前列腺素F1α(6-keto-PGF1α)的关系。方法:采取大鼠幽门结扎型胃溃疡模型,观察石榴皮提取物灌胃对实验性胃损伤黏膜的影响,对胃液量、总酸度、游离酸度、总酸排出量和胃黏液、胃蛋白酶分泌的影响;采取放射免疫方法研究对大鼠胃黏膜PGE2和6-keto-PGF1α含量的影响。结果:石榴皮提取物(150、500mg·kg-1)灌胃,可显著抑制大鼠幽门结扎型胃溃疡的形成,促进胃黏液的分泌(P<0.05),但对胃液量、总酸度、游离酸度、总排酸量和胃蛋白酶活性无显著性影响;PGE2和6-keto-PGF1α的含量均增高,其中PGE2含量显著增加(P<0.05)。结论:石榴皮提取物对大鼠幽门结扎所致胃损伤具有良好的保护作用,这种作用可能与促进胃黏液分泌和增加PG合成有关。

石榴皮鞣质对大鼠乙醇性胃黏膜损伤的保护作用研究

目的:研究石榴皮鞣质对大鼠乙醇性胃黏膜损伤的保护作用。方法:乙醇灌胃(1.5mL/只)以复制大鼠乙醇性胃黏膜损伤模型。实验分为正常(等容生理盐水)、模型(等容生理盐水)、枸橼酸铋钾(100mg·kg-1)和石榴皮鞣质高、中、低剂量(500、150、50mg·kg-1)组,观察对胃黏膜的影响;测定一氧化氮(NO)、丙二醛(MDA)含量;通过免疫组化法测定神经元型一氧化氮合酶(nNOS)、内皮型一氧化氮合酶(eNOS)的表达。结果:150、500mg·kg-1石榴皮提取物可显著修复胃黏膜损伤,且可显著抑制模型大鼠MDA含量增高和NO含量降低(P<0.01),也可抑制nNOS、eNOS的表达下降,但无显著性差异。结论:石榴皮提取物对大鼠乙醇性胃黏膜损伤具有良好的保护作用,这种作用可能与抗脂质过氧化反应,抑制nNOS、eNOS表达下降有关。

小檗碱对结肠癌的体外作用研究

目的:研究小檗碱对结肠癌lovo细胞的抑制作用。方法:培养人结肠癌lovo细胞,给予不同浓度小檗碱、美洛昔康(10-6、10-5、10-4、10-3mol·L-1),作用细胞6、12、24h后,通过MTT实验观察lovo细胞的增殖情况;采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)法检测细胞环氧化酶-2(COX-2)的表达水平;采用蛋白质免疫印迹(Westernblot)法检测细胞COX-2蛋白的表达水平。结果:小檗碱在浓度>10-5mol·L-1,美洛昔康在浓度>10-4mol·L-1时可明显抑制lovo细胞增殖,诱导其凋亡,且呈浓度和时间依赖性(P<0.01或P<0.05)。小檗碱能浓度依赖性地降低lovo细胞中COX-2mNRA表达,对COX-2蛋白表达也呈浓度依赖性抑制。结论:小檗碱能抑制人结肠癌lovo细胞增殖,诱导其凋亡,作用途径与抑制COX-2表达有关。

石榴皮鞣质的急性毒性研究

目的:研究石榴皮鞣质的急性毒性反应。方法:小鼠随机分为7个组,分别灌胃给予15963.00、12978.00、10551.12、8578.25、6974.19、5670.07、4609.81mg·kg-1石榴皮鞣质,于给药后每天8时、14时观察并记录其死亡情况,连续观察7d;同时观察肝脏病理学改变。结果:石榴皮鞣质的半数致死量(LD50)为8469.28mg·kg-1,其95%可信限范围为7252.70～9685.83mg·kg-1;病理学改变显示,随剂量增高出现剂量依赖性肝细胞损伤、坏死。结论:石榴皮鞣质高剂量应用可造成小鼠肝脏损伤并导致死亡。

积雪草苷在大鼠体内的药动学研究

目的:研究积雪草苷在大鼠体内的药动学特点。方法:用高效液相色谱法,以葫芦素B为内标,甲醇为血浆蛋白沉淀剂,水-乙腈(24∶76)为流动相,测定一次性给大鼠尾静脉注射积雪草苷(42或126mg·kg-1)后SD大鼠血浆中积雪草苷的浓度。采用3p97程序计算药动学参数。结果:积雪草苷在SD大鼠体内的药动学符合二室开放模型,2个剂量组的t1/2α分别为1.89和1.73min,t1/2β分别为27.08和26.81min,K21分别为0.24和0.20min,K10分别为0.039和0.031min,K12分别为0.11和0.13min,AUC分别为1442.11和5749.78mg·min·L-1,CL分别为0.029和0.022mL·g-1·min-1,MRT分别为39.08和38.70min。结论:积雪草苷在SD大鼠体内的分布消除较快,呈一级动力学特征。