外科教学中引入循证医学教育新模式

本文分析了传统外科学教育模式的弊端,阐述了循证医学的概念、基本评价方法及其在医学教育中的作用,提出在外科教学中引入循证医学教育新模式是临床外科学教育发展的必然趋势,并探讨了将循证医学引入外科教学的方法。

血管内皮生长因子C正、反义真核表达载体的构建及鉴定

目的克隆血管内皮生长因子C(VEGF-C)基因,构建VEGF-C正、反义真核表达载体,鉴定并分析其基因序列。方法从处于对数生长期的人SGC-7901细胞中提取组织总RNA,用RT-PCR方法扩增出VEGF-C基因的正、反义全长cDNA。利用大肠杆菌转化并制备质粒pCI-neo和pcDNA3。分别用XbaI+EcoRⅠ及HindⅢ+EcoRⅠ双酶切两组质粒和VEGF-C cDNA,并将正、反义VEGF-C cDNA克隆到真核表达载体pcDNA3和pCI-neo中。酶切鉴定、质粒双向测序鉴定重组基因。结果扩增出VEGF-C基因全长cDNA,大小约1.3kb。克隆出正、反义重组质粒为pcDNA3-sense VEGF-C,pCI-neo-antisense VEGF-C,电泳结果显示条带大小约6.8kb。碱基测序证实重组质粒中导入的DNA片段碱基序列与预期的设计路线相符且两片段互补、方向相反。结论正确克隆VEGF-C基因,成功构建了VEGF-C正、反义真核表达载体,为下一步研究反义VEGF-C转染VEGF-C基因高表达的肿瘤细胞后对其体外生长的影响创造了条件,也为进一步研究VEGF-C在胃癌新生淋巴管的形成和转移中的作用奠定了基础。

反义血管内皮生长因子C转染对人胃癌细胞SGC-7901成瘤性和脉管生成的影响

目的观察反义血管内皮生长因子C(antiVEGF-C)基因转染对人胃癌细胞系SGC-7901成瘤性和脉管生成的影响,探讨VEGF-C在脉管新生和胃癌转移中的作用。方法30只BALB/c裸鼠随机分为转染antiVEGF-C组、转染空白质粒组及未转染质粒组(n=10),采用皮下注射分别转染antiVEGF-C基因、转染空白质粒及未转染质粒的SGC-7901细胞悬液0.2ml(1×107/ml),每2d注射1次,连续3次,观察裸鼠皮下肿瘤的生成速度,并对肿瘤组织中的微淋巴管及微血管密度进行检测。结果转染antiVEGF-C组裸鼠肿瘤生长速度明显减慢且瘤体较小。注射后第1、2、3周,转染antiVEGF-C组肿瘤组织中微淋巴管密度分别为4.0±2.2、6.0±3.1、9.0±2.7每高倍视野(/HF),转染空白质粒组分别为6.0±8.7、9.0±3.5、18.0±7.2/HF,未转染质粒组分别为7.0±4.9、9.0±6.4、19.0±6.5/HF,转染antiVEGF-C组肿瘤组织中微血管密度分别为3.0±2.4、5.0±2.1、8.0±1.7/HF,转染空白质粒组分别为4.0±1.8、6.0±2.7、10.0±1.3/HF,未转染质粒组分别为4.0±1.5、6.0±1.3、9.0±1.2/HF。转染antiVEGF-C组肿瘤组织中新生微淋巴管较未转染质粒组及转染空白质粒组明显减少(P<0.05),但新生微血管的数量与其他两组比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论antiVEGF-C转染对人胃癌细胞SGC-7901的成瘤性及淋巴管生成有明显抑制作用,但对肿瘤新生血管的形成影响不大。VEGF-C可能参与了胃癌新生淋巴管的形成过程。

局部物理治疗肝癌的研究进展

局部物理治疗肝癌近年快速发展并在国内广泛应用于临床，取得良好的效果，是目前肝癌治疗领域研究和应用的热点之一。本文就目前常用的局部物理治疗肝癌的方法作一综述。

原位猪肝移植无肝期和再灌注后危险因素研究

目的探讨原位猪肝移植无肝期和再灌注后影响供肝功能和受者存活的危险因素。方法共行35例原位猪肝移植,在移植前、无肝期以及再灌注后2 h检测受体血流动力学、血气、肝功能、肝脏组织病理学以及血清内毒素变化情况。结果受体平均动脉压(MAP)、中心静脉压(CVP)以及心排出量(CO)在无肝期明显下降(与移植前相比,P<0.01)。无肝期同时出现明显的代谢性酸中毒、低血糖、低体温状态。供肝再灌注后出现一过性高血钾,并伴有谷草转氨酶(AST)、总胆红素(TB)明显升高(与移植前相比,P<0.01)。再灌注后肝脏病理改变明显。在良好的体外转流状态下,无肝期及再灌注后血清内毒素、TNF-α值稍有升高,与移植前相比无显著性差异(P>0.05)。结论原位猪肝移植受者在无肝期和再灌注后经历了一系列的病理生理变化,明确以上危险因素的的发生发展,并给予正确的处理,可以极大地提高手术成功率,延长术后存活时间。

119例胃肠道间质瘤的临床诊疗分析

目的:探讨胃肠间质瘤(gastrointestinal stromal tumor,GIST)的临床特点。方法:对1995～2007年收治的119例GIST患者的临床资料进行回顾性分析。结果:免疫组织化学阳性表达率CD117为94.1%(112/119),CD34为77.3%(92/119),119例均进行外科手术,病理诊断为良性21例,恶性89例,低度恶性9例。随访114例,随访时间1～13年,良、恶性肿瘤分别为21和98例,59例转移或局部复发并死亡。结论:GIST缺乏特征性临床表现,术前确诊率低,CD117及CD34等免疫标记物配合使用可以提高胃肠道间质瘤的病理诊断准确率。预后与肿瘤大小、性质和复发转移有关(P<0.05)。

单酰甘油脂肪酶对人肝细胞癌裸鼠移植瘤的影响及其机制

目的探讨单酰甘油脂肪酶(MAGL)在人肝细胞癌(HCC)裸鼠移植瘤生长中的作用和机制。方法移植的SMMC-7721细胞株分为SMMC-7721WT组(未处理)、SMMC-7721MAGL-KD组(MAGL沉默)、SMMC-7721MAGL-OE组(MAGL过表达)和SMMC-7721Vector组(空载体转染) 4组。将27只雄性BALB/c裸鼠分为4组建立裸鼠皮下移植瘤模型,即A组(注射SMMC-7721WT组细胞株,n=12)、B组(注射SMMC-7721MAGL-KD组细胞株,n=5)、C组(注射SMMC-7721MAGL-OE组细胞株,n=5)及D组(注射SMMC-7721Vector组细胞株,n=5),其中A组又分为A1(正常饲喂,n=4)、A2[(高脂饲喂(HFD)+JZL184(MAGL的特异性抑制剂,n=4)和A3 (HFD饲喂,n=4) 3个亚组。观察并比较4组肿瘤体积变化,瘤体内增殖细胞核抗原(PCNA)、金属基质蛋白酶(MMP) 2、血浆溶血性磷脂酸(LPA)和前列腺素E2(PGE2)的表达水平。计量资料多组间比较采用单因素方差分析,进一步两两比较采用SNK-q检验。结果 MMC-7721WT组、SMMC-7721MAGL-KD组、SMMC-7721MAGL-OE组3组间MAGL蛋白相对表达水平比较差异有统计学意义(0. 377±0. 026 vs 0. 182±0. 055 vs 0. 689±0. 019,F=33. 382,P <0. 001),SMMC-7721MAGL-KD组MAGL蛋白表达水平显著低于SMMC-7721WT组(P <0. 05),SMMC-7721MAGL-OE组显著高于SMMC-7721WT组(P <0. 05);A、B、C、D 4组间裸鼠皮下移植瘤大小比较差异有统计学意义[(4236. 125±1284. 283) mm^3vs (1883. 375±552. 977) mm^3vs (10 146. 061±1842.264) mm^3vs (4307. 452±2070. 708) mm^3,F=6. 804,P=0. 023],C组的裸鼠皮下移植瘤的生长速度比A组更快(P <0. 05),而B组比A组慢(P <0. 05);A、B、C 3组间PCNA和MMP2水平比较差异均有统计学意义(PCNA:25 843. 821±4201. 310 vs 17 426. 95±5139. 202 vs 39 753. 103±5721. 444,F=21. 482,P <0. 001;MMP2:52 841. 621±4339. 253 vs 35 511. 451±8251. 423 vs 68 274. 731±6418. 594,F=11. 526,P <0. 001),B组PCNA和MMP2水平均明显低于A组(P值均<0. 05),而C组均高于A组(P值均<0.05);A1、A2、A3 3组间肿瘤体积比较差异有统计学意义[(23 476. 289±483. 872) mm^3vs (18 593. 851±1385. 805) mm^3vs (37 703.198±2925. 254) mm^3,F=47. 371,P=0. 004],与A1组相比,A3组的裸鼠皮下移植瘤体积增长速度更快(P <0. 05),A2组明显受到抑制(P <0. 05);A1、A2、A3 3组间PGE2水平比较差异有统计学意义[(0. 109±0. 023)μmol/L vs (0. 056±0. 010)μmol/L vs(0. 168±0. 024)μmol/L,F=16. 492,P <0. 001],A3组PGE2水平明显高于A1组(P <0. 05),A2组明显低于A1组(P <0. 05);B、C、D 3组间PGE2水平比较差异有统计学意义[(0. 069±0. 025)μmol/L vs (0. 175±0. 023)μmol/L vs (0. 096±0. 019)μmol/L,F=31. 550,P <0. 001],B组PGE2水平明显低于D组(P <0. 05),C组明显高于D组(P <0. 05)。结论 MAGL可能通过调控PGE2促进裸鼠HCC皮下移植瘤的生长,提示MAGL可能成为未来治疗HCC的潜在靶点。

16例腹腔镜胆囊切除术胆管损伤原因及防治

目的探讨腹腔镜胆囊切除术(LC)导致医源性胆管损伤的原因,预防及治疗的措施。方法回顾性分析1995年12月至2007年12月收治的16例LC导致医源性胆管损伤(IBDI)的临床资料。结果16例均为胆囊良性病变行LC治疗.其中右侧迷走胆管和luschka管损伤引起胆漏2例,结扎右侧副肝管,临床上无胆漏发生2例,切断右侧副肝管引起胆漏1例,手术中导致肝总管或胆总管穿孔3例,由胆总管,肝总管的横断或环状狭窄引起的梗阻性黄疸共8例,其中术中发现及时处理5例,另11例术后发现经二次手术后治愈。结论胆囊切除术是腹部外科最常见的手术之一,而医源性的胆管损伤是胆囊切除术中较严重的并发症。一旦发生,将会对患者的健康造成极大的危害。

外泌体在肝癌诊断与治疗中的研究进展

肝细胞肝癌(hepatocellular carcinoma,HCC)是一种最常见的原发性肝脏恶性肿瘤,全世界每年约有84万例新增病例和78万例死亡病例;在全球范围内,肝癌是癌症相关病死率的第四大主要原因[1-2]。尽管近些年HCC在诊断、预防、化疗等方面取得了重大进展,但由于其隐匿性较强,多数患者确诊时已处于中晚期,并且预后效果差,患者五年生存率低于20%[3-5]。因此,寻找有助于肝癌早期诊断的生物标志物一直是研究的热点。外泌体是一种小的具有磷脂双层膜的纳米级囊泡,其直径约在50~150 nm之间[6],大小均一,并且包含有多种生物活性物质,如蛋白质、DNA、miRNA、lnc RNA、mRNA、肿瘤基因和转录因子等,包含丰富的可反应原发疾病的基因信息[7-8]。

一氧化氮在动脉粥样硬化中作用的研究进展

一氧化氮的影响依赖于微环境,是由于与氧、血红蛋白和疏基相互作用所致。一氧化氮通过控制血管张力、血压、细胞间相互作用和增殖调节血管自身稳定。动脉粥样化形成会引起一氧化氮生物活性降低,这样就促进了细胞粘附、增殖、血管收缩和加速了动脉粥样硬化病变产生。动脉粥样硬化对一氧化氮通路的有害影响是由于继发性氧化物如过氧亚硝酸盐即一氧化氮与超氧化物反应的一种产物所致。通过刺激内源性一氧化氮产生,一氧化氮替代治疗和降低氧化作用等措施可有利于改善动脉粥样硬化的临床过程。

糖尿病足医院感染的危险因素及负压引流对感染的控制效果探究

目的分析某医院糖尿病足患者足部溃疡感染的影响因素,并观察负压引流(VSD)控制感染的效果。方法选择医院2015年1月-2017年5月收治的300例糖尿病足患者进行研究,统计所有患者足部溃疡面发生感染的情况,分析发生感染的危险因素,观察采用VSD治疗12周后感染患者的预后情况。结果共118例患者发生足部溃疡面感染,感染率为39.33%(118/300);既往有抗菌药物暴露史、因同一伤口住院次数>2次/年、合并骨髓炎、神经缺血性伤口是糖尿病足创面感染的独立危险因素;经过12周的治疗,118例创面感染患者,治疗总有效率为25.42%(30/118),总截肢率为22.88%(27/118),病死率为8.47%(10/118)。结论既往有抗菌药物暴露史、因同一伤口住院次数>2次/年、合并骨髓炎、神经缺血性伤口是糖尿病足创面感染的独立危险因素,VSD对感染的控制效果较为理想,适合推广使用。

外科疾病伴糖尿病误诊致死的教训分析

糖尿病是对机体有较严重影响的常见内分泌代谢疾病.由于我国生活方式,饮食习惯和平均寿命延长使糖尿病的发生率有所增长.因而,外科疾病伴糖尿病的机会亦相应增多.为此,外科医师应对糖尿病有足够的认识和警惕,避免因误诊造成严重后果.为了总结经验教训,本文对因误诊致死的有关问题加以分析和讨论.

头伤与迟发性鼻出血

本文报告头伤后发生严重迟发性鼻出血3例。出血原因:1例系海绵窦内颈内动脉创伤性动脉瘤破入蝶窦,另2例系颈内动脉海绵窦瘘与蝶窦发生沟通所致。手术治疗均获成功。文献中,前者报道已逾百例,后者仅报道两例。文中就出血途径,临床表现,急救与诊断,以及手术治疗等问题进行讨论。

N-乙酰半胱氨酸对大鼠胆道梗阻肝功能损伤的保护作用及机制研究

目的探讨N-乙酰半胱氨酸（N—acetylcysteine，NAC）对大鼠胆道梗阻所致肝功能损伤的保护作用及其机制。方法Wistar大鼠72只随机均分成3组：（1）胆道结扎＋NAC组（DBL＋NAC，n=24）：开腹结扎并切断胆总管，建模成功后经腹腔注射NAC（150mg·kg-1·d-1）连续注射7d；（2）胆道结扎组（DBL组，n=24）；（3）假手术组（SO组，n=24）：仅行开腹游离胆总管不予结扎和切断。建模成功后1、3、5、7d每组分别活杀6只大鼠，取静脉血及肝组织，检测肝功能、血浆肿瘤坏死因子a（TNF—a）在各时相点的变化并采用Griess法检测一氧化氮（NO）产生情况。结果在DBL组、DBL＋NAC组谷-草转氨酶（AST）、血清谷丙转氨酶（ALT）、总胆红素（TBIL）、直接胆红素（DBIL）均随胆道梗阻时间延长而升高，但DBL组AST、ALT在各时间点均较DBL＋NAC组明显升高（P〈0．05），而TBIL、DBIL在这两组间无明显差异（P〉0．05）。DBL组和DBL＋NAC组TNF-a、NO浓度变化也随梗阻时间延长而升高，但DBL组较DBL＋NAC组TNF—a、NO浓度升高更明显（P〈0．05）。结论N-乙酰半胱氨酸能有效改善胆道梗阻所致肝损害，并有可能是通过下调肝组织中TNF-a、NO的表达这一途径实现的。

直肠癌周围神经浸润的研究现状

直肠癌是常见的消化道恶性肿瘤，占消化道恶性肿瘤发病率的第2位，且有逐渐增高的趋势。随着医学的发展，直肠癌外科治疗有了更为丰富的内容，总体疗效也有了一定的提高。但是直肠癌术后局部复发率仍然较高，预后也不尽人意。影响直肠癌局部复发、转移和预后的因素有多种。研究发现，在某些上皮来源的恶性肿瘤如前列腺癌、乳腺癌、肺癌和胰腺癌等组织中，常见癌对神经组织的浸润，是引起癌肿局部复发和预后不良的重要因素。在直肠癌中的神经浸润亦具有重要意义。