TLR4基因3’非翻译区11367位点多态性与婴幼儿喘息性疾病的研究

目的检测TLR4基因3’非翻译区(3’UTR)11367位点的多态性,探讨该多态性与喘息性疾病的易感性、气道分泌物的细胞因子水平、病原学以及临床表型的关系。方法采用单管双向等位基因特异性扩增技术检测TLR4基因3’UTR11367位点的基因多态性。通过酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测喘息组患儿气道分泌物中细胞因子的水平。采用免疫荧光法进行呼吸道合胞病毒检测。结果TLR4G11367C位点核苷酸存在G/C二态性,表现为GG纯合、GC杂合两种基因型。喘息组和对照组该位点基因型、等位基因分布频率之间均存在显著性差异(P均为0.002)。GG型患儿IL-8水平、病原菌感染阳性率均明显高于GC型。不同基因型的临床表型无显著性差异。结论TLR4基因3’UTR基因多态性与喘息性疾病易感性相关,且与气道分泌物中IL-8水平、机体对RSV易感性、气道细菌定植有关。

呼吸道合胞病毒感染中性粒细胞Toll样受体-4表达及其功能

目的:观察呼吸道合胞病毒(RSV)感染中性粒细胞Toll样受体-4(TLR4)的表达及对炎症介质产生的影响,探讨地塞米松(DEX)干预对RSV感染后中性粒细胞TLR4表达及炎症介质的作用。方法:RSV感染中性粒细胞,流式细胞术(FCM)检测中性粒细胞TLR4表达及代表中性粒细胞呼吸爆发功能的过氧化氢(H2O2),ELISA检测中性粒细胞培养上清的IL-6和IL-8水平,并观察阻断TLR4信号通路及DEX干预对RSV感染中性粒细胞功能的影响。结果:(1)RSV感染中性粒细胞TLR4表达增加;RSV感染中性粒细胞IL-6的产生增加,阻断TLR4信号传导,RSV感染组IL-6产生减少(阻断组IL-6:391.307±43.45ng/L;RSV感染组IL-6:466.03±36.478ng/L;对照组IL-6:21.205±15.059ng/L);RSV感染中性粒细胞IL-8和H2O2的产生均明显增加,阻断TLR4信号传导对IL-8和H2O2的产生没有影响。(2)DEX下调RSV感染后中性粒细胞TLR4表达,减少RSV感染的中性粒细胞产生IL-6、IL-8和H2O2的产生;阻断TLR4,与DEX协同抑制RSV感染中性粒细胞IL-6的产生,逆转DEX对RSV感染中性粒细胞H2O2产生的抑制作用。结论:TLR4信号通路在RSV感染后中性粒细胞炎症介质产生及呼吸爆发功能中起重要作用;阻断TLR4信号通路和DEX联合作用可能成为临床治疗的新靶点。