抗生素诱导小鼠肠道菌群失调对免疫功能和Toll样受体2、4基因表达的影响

目的:探讨抗生素诱导小鼠肠道菌群失调后对机体免疫功能和Toll样受体2、4的影响。方法:60只BALB/c小鼠分为2组:抗生素组和对照组,抗生素组连续7天口服头孢哌酮,7天后经口给予白色念珠菌。结果:抗生素组小鼠肠道内肠杆菌、肠球菌、双歧杆菌、乳酸杆菌较对照组减少,白色念珠菌增加;脾指数、PHA诱导的淋巴细胞转化率、迟发型变态反应、抗体生成细胞数和脾脏的TLR2和TLR4基因表达水平均低于对照组。结论:抗生素诱导肠道菌群失调后小鼠免疫功能和TLR2、TLR4 mRNA表达均降低。

屋尘螨诱导肠道菌群失调小鼠变应性气道反应模型的建立

目的:在肠道菌群失调小鼠模型上采用屋尘螨变应原诱导气道变应性,建立一种新的变应性气道反应模型。方法:60只BALB/c小鼠分6组,2组用于肠道菌群检测;其余4组用于气道变应性检测。结果:抗生素组小鼠出现肠道菌群失调伴体重减少,粪便含水量增加。肠道菌群失调后进行屋尘螨变应原激发的小鼠BALF中细胞总数、淋巴细胞、中性粒细胞和嗜酸粒细胞增加,IL-4水平增高,肺部GATA-3转录因子mRNA表达增加。结论:用屋尘螨变应原在肠道菌群失调小鼠模型上气道激发,诱导小鼠产生Th2细胞优势的变应性气道反应。

LDLr表达失衡在阿霉素肾病大鼠肾小球硬化中的作用

目的:观察阿霉素肾病大鼠肾小球硬化过程中低密度脂蛋白受体(LDLr)的表达情况,及辛伐他汀对LDLr表达的影响,探讨LDLr在脂质导致肾病大鼠肾脏损害过程中的作用及他汀类药物肾脏保护的机制。方法:雄性SD大鼠随机分为正常对照组、阿霉素肾病组(模型组)和阿霉素肾病辛伐他汀治疗组(治疗组),12周后收集标本,光镜观察肾小球硬化情况,酶比色法和油红染色法检测肾组织内胆固醇含量,RT-PCR和Western-blot技术分别检测肾组织LDLr、胆固醇调节元件结合蛋白-2(SREBP-2)mRNA和蛋白质表达。结果:模型组出现明显肾小球硬化(P<0.01),LDLr、SREBP-2 mRNA和蛋白表达明显增强(P均<0.01),肾组织内胆固醇含量明显升高(P<0.01);线性回归分析显示肾组织LDLr、SREBP-2蛋白表达上调与肾组织胆固醇酯(CE)含量呈显著正相关性(P均<0.01)。治疗组肾小球硬化明显减轻(P<0.01),LDLr、SREBP-2 mRNA和蛋白表达、肾组织内胆固醇含量均较模型组低(分别P<0.05或P<0.01)。结论:肾病大鼠肾小球硬化过程中,肾组织内SREBP-2、LDLr表达明显上调,脂质可能通过过度表达的LDLr途径在肾组织内沉积,加重肾小球硬化;辛伐他汀可能通过下调LDLr途径,减少脂质在肾脏组织内沉积,发挥肾脏保护作用。

变应性气道反应与抗生素诱导的肠道菌群失调关系研究

目的建立抗生素所致肠道菌群失调小鼠模型,在此模型上用烟曲霉菌变应原滴鼻激发,探讨变应性气道反应和肠道菌群失调的关系。方法 60只雌性 BALB/c 小鼠分为6组,每组10只。①抗生素1组:口服头孢哌酮7 d,第7天给予50μl白色念珠菌1次;②对照1组:1～7 d 给予等量生理盐水代替头孢哌酮和白色念珠菌(①和②组于第8天断颈后取盲肠内容物做细菌和真菌培养计数);③抗生素加激发组:前7天处理同抗生素1组,9、16 d 经鼻给予烟曲霉菌变应原50μl;④抗生素2组:前7天处理同抗生素1组,9、16 d 经鼻给予50μl生理盐水;⑤激发组:前7天处理同对照1组,9、16 d 经鼻给予烟曲霉菌变应原50μl;⑥对照2组:前7天处理同对照1组,9、16 d 经鼻给予50μl生理盐水(③～⑥组于第19天检测肺部气道变应性)。结果①抗生素1组小鼠肠道内肠杆菌、肠球菌、双歧杆菌、乳酸杆菌减少,白色念珠菌增加,伴体重减少,粪便含水量增加,表明肠道菌群失调。②抗生素加激发组和激发组小鼠支气管肺泡灌洗液(BALF)中细胞总数、淋巴细胞、中性粒细胞和嗜酸性粒细胞增加,尤以抗生素加激发组小鼠更为明显。③抗生素加激发组的 BALF 中 IL-4(45.35±2.36)pg/ml 较对照2组(35.32±2.53)pg/ml 增加,GATA-3转录因子 mRNA 表达水平(0.569±0.023)比对照2组(0.410±0.020)高,T-bet/GATA-3比值(0.578±0.021)较对照2组(0.804±0.035)降低。结论抗生素致肠道菌群失调小鼠经过烟曲霉菌变应原气道激发,可致 Th2优势反应的气道变应性,提示抗生素致肠道菌群失调是诱发哮喘等变应性疾病发生的危险因素。

白血病细胞多药耐药细胞系的建立及白细胞介素4对其多药耐药的逆转研究

目的 研究重组人白细胞介素 4(IL 4)对人白血病细胞 (HL 6 0 )多药耐药 (MDR)的逆转作用及可能机制。方法 采用长期、间隔、单一、小剂量用药的方法诱导HL 6 0细胞系成为MDR细胞长春新碱 (VCR)系HL 6 0 /VCR ,建立MDR细胞模型 ;以流式细胞仪间接免疫荧光染色检测HL 6 0、HL 6 0 /VCR及IL 4处理的HL 6 0 /VCR细胞中p 糖蛋白 (p gp)表达 ;四氮甲基唑蓝 (MTT)生物活性法及荧光分光光度法检测上述各种细胞对VCR、阿霉素 (14 羟柔红霉素 ,ADM)、柔红霉素 (DNR)、足叶乙甙 (VP 16 )等化疗药物的敏感性及ADM在肿瘤细胞中的聚集量。结果 HL 6 0 /VCR细胞中p gp呈高强度表达 ,阳性率为 (95 .4± 1.5 ) % ,较HL 6 0细胞 [p gp表达阳性率仅 (1.5± 0 .5 ) % ]差异有显著性(n =10 ,t=6 2 .5 ,P <0 .0 1) ;IL 4处理的HL 6 0 /VCR细胞株中的MDR瘤细胞p gp表达降低 [处理48hp gp表达降至 (11.3± 2 .9) % ],增加化疗药物的细胞内聚集量 ,恢复MDR细胞的药物敏感性 ,(耐药逆转倍数可达 3.0 ) ,此作用可被蛋白激酶C(PKC)激活剂———佛波酯 10 0ng/ml完全阻断。结论 长期、间断、单一、不足量的化疗可导致MDR ;IL 4可通过抑制肿瘤细胞的p gp表达 ,增加化疗药物在肿瘤细胞内的聚集而逆转白血病细胞的MDR ,此作用可能与?