生酮饮食抑制裸鼠皮下移植人神经母细胞瘤的生长

目的探究生酮饮食(KD)抑制人神经母细胞瘤裸鼠皮下移植瘤生长的作用。方法选取雌性BALB/c-nu裸鼠建立人神经母细胞瘤细胞株SH-SY-5Y皮下移植瘤模型,当移植瘤体积约250 mm3时,随机分为标准饮食组(SD,标准饲料喂养+PBS 60 mg·kg-1·d-1)、生酮饮食组(KD,生酮饲料喂养+PBS 60 mg·kg-1·d-1),环磷酰胺联合生酮饮食组(CP+KD,生酮饲料喂养+环磷酰胺mg·kg-1·d-1),每组8只。测量瘤体长径、短径,计算移植瘤体积。检测裸鼠体质量、血糖、血酮体(β-羟基丁酸)水平和肝脏脂肪变性。Western blot检测凋亡蛋白caspase3、caspase8;免疫组化(IHC)检测增殖蛋白Ki67。透射电镜观察自噬体;IHC和Western blot检测自噬蛋白Beclin1、LC3A/B及P62。结果种瘤后第28天,KD和CP+KD组裸鼠生存期较SD组显著延长(P<0.001);接种第22天,KD组瘤积小于SD组(P<0.05);接种第16、19、22天,CP+KD组瘤积明显小于SD组(P<0.01)。接种第19天,KD组裸鼠体质量较SD组减轻(P<0.05),其余测量时间点上无显著差异(P>0.05);接种第13天,KD组血糖较SD组下降(P<0.05),其余测量时间点上的KD和CP+KD组血糖与SD组无显著差异(P>0.05);KD和CP+KD组血酮全程较高(P<0.05),而血糖/血酮值较低(P<0.05);KD和CP+KD组裸鼠肝脏脂肪变性评分高于SD组(P<0.05)。Ki67和凋亡蛋白在各组肿瘤组织中均表达。透射电镜下KD组中自噬体较多于SD组;KD组P62蛋白表达明显低于SD组(P<0.01),而Beclin1、LC3A/B蛋白表达增加(P<0.05),与IHC结果较一致。结论KD能抑制人神经母细胞瘤裸鼠移植瘤的生长,其可能的抗肿瘤机制与细胞自噬相关。