“Sirt1-自噬”在低氧诱导小鼠成牙骨质细胞凋亡中的作用

目的:初步研究“Sirt1-自噬”在低氧诱导小鼠成牙骨质细胞OCCM-30凋亡中的作用。方法:体外培养小鼠成牙骨质细胞,随机分为对照组、低氧组、低氧+Sirt1激活剂白藜芦醇组、低氧+自噬抑制剂3-MA组、低氧+白藜芦醇+Sirt1抑制剂ex527组、低氧+白藜芦醇+3-MA组,MDC染色观察自噬溶酶体变化;LC3Ⅱ免疫荧光检测自噬体变化;透射电镜观察自噬体;Western blot检测Sirt1、LC3Ⅱ、p62等蛋白表达;流式细胞仪检测细胞凋亡情况;不同组间结果数据采用单因素方差分析,组间采用LSD-t分析。结果:低氧组较对照组自噬溶酶体含量(P=0.000)及自噬体数量(P=0.000)明显增加,LC3Ⅱ蛋白表达明显增加(P=0.001),p62蛋白表达明显减少(P=0.000),细胞凋亡率增加(P=0.000);低氧+白藜芦醇组较低氧组自噬溶酶体(P=0.019)及自噬体数量(P=0.000)、LC3Ⅱ蛋白表达(P=0.049)、Sirt1蛋白表达(P=0.000)明显增加,p62蛋白表达明显减少(P=0.000),细胞凋亡率减少(P=0.021);低氧+白藜芦醇+ex527组较低氧+白藜芦醇组自噬溶酶体(P=0.000)及自噬体数量(P=0.000)、LC3Ⅱ蛋白表达(P=0.000)、Sirt1蛋白表达(P=0.000)明显减少,p62蛋白表达明显增加(P=0.000),细胞凋亡率增加(P=0.000);低氧+白藜芦醇+3-MA组较低氧+白藜芦醇组自噬溶酶体(P=0.000)及自噬体数量(P=0.000)、LC3Ⅱ蛋白表达明显减少(P=0.000),p62蛋白表达明显增加(P=0.000),细胞凋亡率增加(P=0.000),Sirt1蛋白表达减少(P=0.146),差异无统计学意义。结论:自噬相关分子可能是低氧环境下Sirt1的下游作用分子,自噬在低氧诱导小鼠成牙骨质细胞(OCCM-30)凋亡中起保护作用。