IRE1α促进人牙周膜成纤维细胞增殖

目的研究内质网跨膜蛋白IRE1α对人牙周膜成纤维细胞(human periodontal ligament fibroblasts,hPDLFs)增殖的影响。方法将成功构建的人IRE1α基因重组质粒染入hPDLFs细胞,采用免疫印迹法检测IRE1α重组基因在真核细胞内的表达情况,XTT法和流式细胞仪(FCM)检测转染后hPDLFs细胞增殖和细胞周期变化。结果酶切及测序结果证实IRE1α重组质粒构建成功;免疫印迹分析结果证实,IRE1α重组质粒能在hPDLFs细胞内正确表达;在内质网应激(ERS)状态下,与衣霉素(tunicamycin,TM)对照组相比,XTT检测结果显示:IRE1α实验组hPDLFs细胞增殖率明显增高(P<0.01);FCM结果分析显示:IRE1α实验组hPDLFs细胞S期比例增加而G1期减少(P<0.05)。结论在ERS状态下,IRE1α促进hPDLFs细胞增殖,促进hPDLFs细胞从G1期进入S期。

基于micro-CT的2型糖尿病大鼠骨骼特点的研究

目的运用micro-CT及组织形态学方法研究糖尿病大鼠骨骼的特点。方法实验对象选择8周龄雄性SD大鼠20只,分为两组:正常组10只,实验组10只。实验组通过饲喂高脂饲料同时辅以注射小剂量链脲佐菌素(STZ)(30mg/kg)的方法建立2型糖尿病大鼠模型。通过血糖、血清胰岛素、胰腺组织切片染色评价建模效果,通过股骨micro-CT扫描及组织学方法比较实验组和正常组大鼠骨骼的特点。结果正常组(n=10)体质量及血糖低于实验组(n=9)(P<0.05),两组胰岛素水平基本相当(P>0.05)。胰腺组织切片染色结果显示:正常组胰岛形态规则,边缘界清,胰岛细胞排列紧密。糖尿病组大鼠胰岛形态不规则,边缘模糊不清,胰岛细胞稀疏,纤维结缔组织增多。Micro-CT扫描结果显示:实验组和正常组相比,其股骨的骨体积(单位:%,正常组:0.194 2±2.332,实验组:0.080 7±1.952)、骨小梁厚度(单位:mm,正常组:0.052 9±0.004 5,实验组:0.043 6±0.002 4)以及骨小梁数量(单位:mm-1,正常组:3.668 8±0.134 5,实验组:1.851 7±0.288 8)均减少(P<0.05)。骨小梁间隙(单位:mm,正常组:0.219 6±0.072 1,实验组:0.496 5±0.076 4)增加(P<0.05)。股骨组织形态计量学检测结果与micro-CT结果一致。结论本实验建立的大鼠模型可以在一定程度上模拟临床2型糖尿病的骨骼特点,micro-CT下表现为骨体积、骨小梁密度以及骨小梁数量下降。