视黄酸信号通路调控咽弓神经嵴影响斑马鱼牙齿发育的研究

目的研究视黄酸（RA）信号通路在斑马鱼颅神经嵴迁移至咽弓神经嵴对牙齿发育的影响。方法将野生型斑马鱼胚胎与转基因斑马鱼胚胎各分为3组,分别采用1×10-7~6×10-7 mol·L-1梯度浓度的RA（RA处理组）、1×10-7 mol·L-1的4-二乙氨基苯甲醛（DEAB）（DEAB处理组）、与RA处理组相应浓度的二甲基亚砜（DMSO对照组）处理24 hpf胚胎9 h。制备dlx2a、barx1、dlx2b基因的反义探针,运用整胚原位杂交技术检测野生型斑马鱼48~72 hpf胚胎的dlx2a、dlx2b、barx1基因表达,荧光显微镜观察转基因斑马鱼4 dpf胚胎。结果获得3个基因的反义m RNA探针。与DMSO对照组相比,1×10-7 mol·L-1RA处理组barx1、dlx2a在咽弓神经嵴的表达明显增强,并有由咽弓神经嵴向后段咽弓牙齿萌出位点迁移的趋势,绿色荧光向周边咽弓扩散;4×10-7 mol·L-1 RA处理组胚胎致畸率和死亡率极高,3×10-7 mol·L-1 RA处理组1/3胚胎发育迟缓。DEAB处理组神经嵴发育不良,barx1、dlx2a表达降低,dlx2b在牙齿位点的表达有所延迟。结论 RA能够通过调控咽弓神经嵴发育过程,进而调控牙齿发育前体细胞,最终达到调控牙齿发育的过程。

变异链球菌耐酸毒力因子质子移位膜ATP酶在龋病进展中的动态变化

目的研究变异链球菌耐酸毒力因子质子移位膜ATP酶（F-ATPase）在不同p H环境和龋病发生发展过程中的表达,评价F-ATPase在龋病进展中的动态变化。方法将变异链球菌菌悬液在不同p H（p H4.0~7.0）和不同葡萄糖浓度（含5%和不含葡萄糖）的BHI液体培养基中培养,检测F-ATPase基因的表达水平。将雄性Wistar大鼠随机分成致龋组和对照组,其中致龋组喂养致龋饲料及5%葡萄糖水,对照组喂养普通饲料。每2周采集菌斑样本,检测F-ATPase基因的表达水平。第11周时取大鼠上下颌骨标本,对磨牙进行龋损评定。结果 1）5%葡萄糖浓度下变异链球菌F-ATPase基因的表达高于不含葡萄糖（P〈0.05）,在p H5.0时F-ATPase基因的表达最高,p H4.0时表达最低（P〈0.05）。2）成功构建了龋病动物模型,在龋病发生发展过程中,致龋组和对照组F-ATPase的表达逐渐增强,致龋组表达高于对照组（P〈0.05）。结论耐酸毒力因子F-ATPase的表达变化与龋病的发生发展密切相关。