脓毒症早期诊断生物标志物的研究进展

脓毒症是一种因宿主对感染反应失调而导致危及生命的器官功能障碍疾病。在重症监护病房(ICU)中,脓毒症的发病率和病死率极高。脓毒症的病理生理机制主要涉及炎症反应平衡失调、免疫功能紊乱、凝血功能障碍以及线粒体损伤等多个方面,多重机制共同作用使脓毒症的发生发展难以预测,临床上对于脓毒症的早期诊断和规范治疗仍处于探索阶段。目前最新的《脓毒症与感染性休克定义的国际共识(Sepsis-3)》推荐使用序贯器官衰竭评分(SOFA)协助临床诊断脓毒症,若患者SOFA评分>2分且合并感染即可诊断为脓毒症。SOFA评分通过结合各项检验数据对全身多个组织器官的功能损伤程度进行综合评估,但其缺乏对脓毒症的特异性识别能力,因此SOFA评分对早期诊断脓毒症及指导治疗仍存在局限性。临床上除了运用SOFA评分,还会结合降钙素原(PCT)、C-反应蛋白(CRP)、白细胞介素家族等感染标志物协助诊断脓毒症,随着组学研究的深入,越来越多的早期诊断标志物被发现,这些标志物对于脓毒症的早期诊断、治疗以及预后监测同样具有重要价值。早期诊断标志物的理想特征应具备较好的敏感性、特异性和病情适用性。现对近年来报告的针对脓毒症早期诊断具有较高效能的生物标志物进行了综述,并对它们进行了分类介绍和特点比较,以期为临床诊疗提供参考。

脓毒症相关生物标志物的研究进展

脓毒症是机体对感染的免疫反应失调而引起的危及生命的器官功能障碍,是导致住院患者死亡的主要原因之一,因此脓毒症的早期诊断及治疗对降低患者死亡率及住院费用等至关重要。生物标志物与脓毒症的早期诊断、危险分层、预后评估和治疗方法密切相关,理想的生物标志物应具有良好的灵敏度、特异性、可重复性、方便易检、低成本等特点,本文就近年来临床常用的脓毒症相关生物标志物的研究进展进行综述,以期为临床诊断及治疗提供参考资料。

血必净对卵清蛋白诱导哮喘小鼠上气道氧化损伤的保护作用

目的:研究血必净在OVA诱导的小鼠哮喘模型中的抗氧化损伤作用以及它与血红素加氧酶-1(HO-1)的关系,探讨血必净氧化损伤保护作用的潜在机制。方法:建立OVA诱导的小鼠哮喘模型,用血必净(1 m L·kg-1·d-1)及地塞米松(3 mg·kg-1·d-1)进行气道雾化干预,对照组用PBS(p H 7.4)代替。ELISA检测各组小鼠肺泡灌洗液(BALF)中总Ig E、OVA特异性Ig E及炎症因子;双氢罗丹明(DHR)-123试剂盒检测BALF中活性氧(reactive oxygen species,ROS)水平;分别使用超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)、谷胱甘肽(glutathione,GSH)、过氧化氢酶(catalase,CAT)和总抗氧化能力(Total Antioxidant Capacity Assay,TAOC)试剂盒检测各组小鼠BALF中SOD、GSH、CAT和TAOC的水平;HE染色检测小鼠肺组织的炎症浸润及形态学变化;依文思蓝染色检测小鼠肺组织的干湿比重;Western Blot及Real-time PCR检测小鼠肺组织中HO-1的表达。结果:病理研究结果显示血必净明显减轻了哮喘小鼠气道上皮纤毛脱落、杯状细胞增生、肺组织中黏液产生以及炎性细胞浸润;相对于OVA诱导组,血必净处理组明显降低了小鼠BALF中总Ig E、OVA特异性Ig E及IL-4、IL-5的表达水平,降低了BALF中ROS含量;提高BALF中抗氧化酶的活性和和抗氧化能力;明显诱导肺组织HO-1表达,并呈现时间和剂量依赖性。结论:血必净可明显抑制ROS的产生、提高抗氧化酶活性、抑制上气道氧化损伤,对哮喘小鼠有治疗保护作用,其机制可能与诱导HO-1的表达有关。

大黄素对脓毒症小鼠急性脑损伤的神经保护作用

目的探讨大黄素(emodin)对脓毒症小鼠急性脑损伤的神经保护作用及其机制。方法将雄性BALB/c小鼠随机分为4组:正常对照组、脂多糖(LPS)组、大黄素组和大黄素+LPS组。大黄素组和大黄素+LPS组在建模前30min给予20mg/kg大黄素预处理,其余两组给予相同体积溶剂,LPS组和大黄素+LPS组用15mg/kgLPS刺激,其余两组在此期间给予相同体积生理盐水。LPS注射后18h处死动物,采集脑组织和血浆标本。HE染色观察脑组织病理学改变,酶联免疫标记法(ELISA)检测血浆S100β蛋白表达以评估颅脑损伤程度,比色定量法检测脑组织中乳酸(LA)以评估代谢紊乱程度,ELISA法检测血浆中白细胞介素6(IL-6)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)水平以评估全身炎性反应的程度,ELISA法检测血浆神经特异性烯醇化酶(NSE)水平表达以评估神经炎性反应程度,比色定量法测定脑组织中乙酰胆碱酯酶(Ach-E)活力以评估脑内乙酰胆碱(Ach)水平。结果与正常对照组比较,LPS组出现明显脑组织病理损伤,大黄素组未出现明显脑组织病理损伤;与LPS组相比,大黄素+LPS组脑组织损伤程度明显减轻。LPS组脑组织中Ach-E和LA水平[分别为(1.09±0.10)U/mg protein、(0.35±0.03)mmol/g protein]明显高于正常对照组[(0.84±0.09)U/mg protein、(0.16±0.03)mmol/gprotein,P<0.05];LPS组血浆中S100β、IL-6、TNF-α及NSE水平[分别为(0.52±0.06)ng/ml、(4207.23±90.76)pg/ml、(355.62±6.88)pg/ml、(9.02±0.78)ng/ml]也明显高于正常对照组[分别为(0.38±0.05)ng/ml、(501.60±74.18)pg/ml、(157.41±10.65)pg/ml、(5.41±0.89)ng/ml,P<0.05],而大黄素组与正常对照组间以上指标差异均无统计学意义(P>0.05);与LPS组比较,大黄素+LPS组血浆中S100β[(0.44±0.06)ng/ml]、IL-6[(1479.50±50.53)pg/ml]、TNF-α[(213.48±9.19)pg/ml]、NSE[(6.74±1.12)ng/ml]水平明显降低(P<0.05),脑组织中L A[(0.25±0.03)mmol/gprotein]和Ach-E[(0.87±0.07)U/mgprotein]水平也明显降低(P<0.05)。结论大黄素对LPS诱导的小鼠急性脑损伤具有保护作用,其机制可能与激活胆碱能抗炎通路和抑制炎性反应有关。

冠心病发病的危险因素分析

目的探讨冠心病发病的危险因素。方法本研究选取2015年4月-2020年3月在重庆市某医院就诊,并行冠状动脉造影的90例患者为研究对象。其中,男性67例,女性23例。根据患者冠状动脉造影结果分为观察组(n=60;冠状动脉狭窄≥50%,明确诊断为冠心病)与对照组(n=30;冠状动脉未见明显狭窄,未诊断为冠心病)。收集2组患者的相关资料,包括年龄、性别、既往史(糖尿病、高血压)、吸烟史及总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、单核细胞计数、左心室射血分数(LVEF)水平,并分析以上因素与冠心病发病的相关性。结果Logistic回归分析结果显示,合并糖尿病、有吸烟史、LDL-C水平升高是冠心病发病的独立危险因素(P<0.05)。结论合并糖尿病、有吸烟史、LDL-C水平升高是冠心病发病的高危因素。因此,积极控制血糖、有效戒烟、降低LDL-C水平,不仅可以防治冠心病,也可降低冠心病后期并发症发生率。

二甲双胍减轻脂多糖诱导的脓毒症小鼠脑损伤

目的探讨二甲双胍对脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)诱导的脓毒症小鼠脑损伤的作用。方法雄性BALB/c小鼠104只采用随机数字表法分为4组,每组26只,分别为对照组、单纯二甲双胍组、LPS组、LPS+二甲双胍组。腹腔注射脂多糖(LPS,20 mg/kg)诱发脓毒症建立模型。注射LPS前30 min予二甲双胍(400 mg/kg)腹腔注射,注射LPS后18 h时即观察终点取脑组织、血清进行检测:HE染色观察脑组织形态学改变,EB染色法测定血脑屏障通透性;相应试剂盒测定脑组织Caspase-3活性、MDA含量和IL-6、TNF-α、MPO水平以及血清NSE、S100-β水平。结果海马CA1、CA3区和大脑皮层形态学观察:LPS组大量神经细胞变性,而LPS+二甲双胍组神经元变性减轻。EB、NSE、S100-β:LPS组较对照组升高(P<0.05),LPS+二甲双胍组较LPS组降低(P<0.05)。Caspase-3:LPS组较对照组增加(P<0.01);LPS+二甲双胍组较LPS组降低(P<0.05),较余两组升高(P<0.05)。IL-6、TNF-α、MPO:LPS组较对照组增高(P<0.05),LPS+二甲双胍组较LPS组降低(P<0.05)。MDA:LPS组较对照组升高(P<0.01),LPS+二甲双胍组较LPS组降低(P<0.01)。结论二甲双胍可以减轻脂多糖诱导的脓毒症小鼠的脑损伤,其机制可能是保护血脑屏障、抑制凋亡、抗炎及减少氧化应激。二甲双胍对脓毒症诱发的脑损伤有治疗价值。

乌司他丁对支气管哮喘小鼠氧化应激及血红素加氧酶-1的影响

乌司他丁（Ulinastatin）是一种高效广谱水解酶抑制剂，临床上已广泛应用于弥漫性血管内凝血、急性肺损伤等炎性疾病的治疗，但其在过敏性哮喘中的抗氧化作用及其与血红素加氧酶-1（heme oxygenase-1，HO-1）的关系尚不明了，本研究中从氧化应激角度探讨乌司他丁在卵清白蛋白（OVA）诱导的支气管哮喘（简称哮喘）小鼠模型中的作用及其与HO-1的关系，为探寻新的高效安全的临床哮喘治疗药物提供线索。

血红素氧合酶-1在急性百草枯中毒小鼠肺组织中的表达及意义

目的：观察百草枯中毒小鼠肺组织血红素氧合酶-1（HO-1）的表达，探讨其在百草枯中毒肺损伤中的机制。方法将58只雄性ICR小鼠按随机数字表法分为对照组（8只）和染毒组（50只），采用一次性灌胃20%百草枯溶液50 mg/kg建立中毒模型，对照组灌胃等量生理盐水。对照组于实验首日，染毒组于染毒后6 h及1、3、7、14 d分别处死8只存活小鼠取肺组织，行苏木素-伊红（HE）染色后光镜下观察肺组织病理改变；免疫组化法检测肺组织HO-1阳性表达；蛋白质免疫印迹试验（Western Blot）检测肺组织HO-1蛋白表达；检测超氧化物歧化酶（SOD）活性和丙二醛（MDA）含量。结果小鼠染毒后1 h即出现呼吸急促、乏力等症状，3～5 d时表现最为严重，14 d时饮食、活动恢复正常。光镜下观察显示，对照组肺组织无明显病理改变。染毒1 d时肺泡结构紊乱，肺组织出现明显的出血、水肿和炎性细胞浸润；3 d时肺组织病理改变加重；7 d时肺泡炎症表现减轻；14 d时炎症表现基本消失，但肺泡结构仍紊乱。免疫组化显示，对照组肺组织细胞中HO-1多不表达，少许轻度表达于气道上皮细胞。染毒1 d时HO-1主要分布于气道黏膜上皮细胞、炎性细胞、血管内皮细胞的胞质中；随后表达逐渐减少，7 d时恢复至对照组水平。染毒6 h时肺组织HO-1蛋白表达（灰度值）即较对照组明显升高（2.438±0.467比0.475±0.167，P＜0.01），1 d时达高峰（9.200±0.940比0.475±0.167，P＜0.01），持续至7 d时恢复至对照组水平（0.825±0.260比0.475±0.167，P＞0.05）。染毒6 h时肺组织SOD活性（μU/L）即较对照组明显降低（649.681±13.951比1167.051±15.744，P＜0.01），随后逐渐升高，至14 d仍显著低于对照组（859.733±121.079比1167.051±14.744，P＜0.01）；染毒6 h时肺组织MDA含量（μmol/L）即较对照组明显升高（4.542±0.266比3.705±0.176，P＜0.01），1 d时达到高峰（5.956±0.281比3.705±0.176，P＜0.01），随后逐渐下降，3 d时已恢复至对照组水平（4.134±0.168比3.705±0.176，P＞0.05）。结论急性百草枯中毒小鼠肺组织HO-1表达明显增高，可能是参与百草枯中毒肺损伤的重要保护机制。

氢盐水对心肺复苏大鼠脑氧化应激的干预作用

目的：探讨氢盐水对心肺复苏（CPR）大鼠脑氧化应激的影响及机制。方法将18只清洁级雄性SD大鼠按照随机数字表法分为对照组（Con组）、常规复苏组（ROSC组）和氢盐水干预组（ROSC＋HRS组），每组6只。采用气管夹闭法建立心搏骤停（CA）大鼠模型，使用心脏按压、电除颤及肾上腺素直至自主循环恢复（ROSC）；ROSC＋HRS组在制模同时腹腔注射2%氢盐水（首次5mL/kg，以后每2h注射氢盐水3mL/kg）；Con组仅行气管插管机械通气。ROSC后12h活杀大鼠取脑组织制备匀浆，测定丙二醛（MDA）、超氧化物歧化酶（SOD）、过氧化氢酶（CAT）含量；用蛋白质免疫印迹试验（WesternBlot）检测脑组织血红素氧合酶-1（HO-1）蛋白表达；用反转录-聚合酶链反应（RT-PCR）检测脑组织HO-1mRNA表达。结果与Con组比较，ROSC组脑组织MDA含量明显增高（nmol/mg：8.15±0.11比3.68±0.16，P＜0.05），SOD、CAT活性明显下降〔SOD （U/mg）：69.30±2.39比94.65±2.75，CAT（U/mg）：74.38±1.65比95.68±1.88，均 P＜0.05〕，HO-1mRNA 表达明显上调（灰度值：1.383±0.194比1.117±0.083，P＜0.05），HO-1蛋白表达无差异（灰度值：0.350±0.049比0.175±0.026，P＞0.05）；与ROSC组比较，ROSC＋HRS组脑组织MDA含量明显下降（nmol/mg：4.72±0.28比8.15±0.11，P＜0.05），SOD、CAT活性明显增高〔SOD（U/mg）：83.02±1.10比69.30±2.39，CAT（U/mg）：85.07±1.94比74.38±1.65，均P＜0.05〕，HO-1mRNA表达进一步上调（灰度值：3.200±0.200比1.383±0.194， P＜0.05），HO-1蛋白表达明显升高（灰度值：0.788±0.059比0.350±0.049，P＜0.05）。结论氧化应激损伤是CPR脑损伤的重要机制；氢盐水可上调脑组织HO-1表达，降低氧化应激损伤，从而减轻CPR致大鼠脑损伤。

氢盐水对百草枯中毒小鼠急性肺损伤及肺组织血红素氧化酶-1表达的影响

目的 探讨氢盐水对百草枯（PQ）中毒小鼠急性肺损伤以及对肺组织血红素氧化酶-1（HO-1）表达的影响及机制.方法 108只雄性清洁级ICR小鼠随机分为对照组（8只）,PQ组（50只）和PQ＋氢盐水组（50只）,PQ组质量浓度为20％的PQ 50 mg/kg一次性灌胃.PQ＋氢盐水组20％的PQ50 mg/kg一次性灌胃后予饱和氢气生理盐水5 ml/kg腹腔注射,2次/d.观察行为学变化,不同处理后6h、1、3、7、14d测定肺组织匀浆丙二醛（MDA）含量、超氧化物歧化酶（SOD）活力,HE染色观察肺组织损伤情况,免疫印迹法和免疫组化法测定肺组织HO-1含量.结果 PQ中毒后小鼠出现活动减少,呼吸急促甚至死亡等表现,PQ＋氢盐水组比PQ组有所减轻.PQ组6h及24 h肺组织匀浆MDA含量明显高于对照组,PQ组6、24h及3、7d时的SOD活力明显低于对照组,差异有统计学意义（P＜0.05）.PQ＋氢盐水组24 h MDA含量明显低于PQ组,24 h及3、7d时PQ＋氢盐水组SOD活力明显高于PQ组,差异有统计学意义（P＜0.05）.PQ＋氢盐水组HO-1表达趋势及分布部位与PQ组相似,但各时间点HO-1表达HIS值均明显高于PQ组和对照组,差异均有统计学意义（P＜0.05）.结论 氢盐水可上调PQ中毒小鼠肺组织HO-1的表达,有减轻PQ中毒肺损伤的效应.

溶栓后PCI与直接PCI治疗急性ST段抬高型心肌梗死的疗效对比研究

目的分析溶栓后经皮冠状动脉介入(PCI)与直接PCI治疗急性ST段抬高型心肌梗死患者的疗效。方法连续选取同期来院的急性ST段抬高型心肌梗死患者67例,根据患者干预措施的不同分为直接PCI组(33例)及溶栓后PCI组(34例),比较两组患者术后梗死相关血管(IRA)血流情况、并发症发生率、PCI成功率、平均住院时间、平均住院费用等。结果行PCI前,溶栓后PCI组患者在冠状动脉造影时发现IRA血流达到TIMI3级比例明显高于直接PCI组,差异有统计学意义(P<0.05)。两组患者在行PCI治疗后IRA血流达到TIMI3级比例差异无统计学意义(P>0.05)。溶栓后PCI组患者住院时间[(9.82±5.99)d]与直接PCI患者住院时间[(10.38±3.79)d]比较,差异无统计学意义(P>0.05)。溶栓后PCI组患者住院费用[(69760.18±25444.04)元]高于直接PCI组[(50254.12±19945.03)元],差异有统计学意义(P<0.05)。结论溶栓后PCI可以更快开通梗死血管,且未增加患者病死率。