桂枝附子汤对TNF-α诱导的人类风湿关节炎成纤维样滑膜细胞增殖及分泌的影响

目的:探讨桂枝附子汤(Guizhi Fuzi Decoction,GFD)对TNF-α(Tumor necrosis factor alfa,TNF-α)诱导的人类风湿关节炎成纤维样滑膜细胞(Human Fibroblast-Like Synoviocytes:Rheumatoid Arthritis,HFLS-RA)增殖及分泌的影响及机制。方法:分组为:空白组对照;TNF-α组;甲氨蝶呤(Methotrexate,MTX)组;桂枝附子汤高、中、低剂量组。用TNF-α(10 ng/ml)刺激HFLS-RA细胞,并加入不同浓度的桂枝附子汤(200ug/ml、400ug/ml、800ug/ml)作用后,采用CCK-8(Cell Counting Kit-8,CCK-8)检测细胞增殖能力;ELISA(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)及qPCR(Quantitative Real-time PCR,qPCR)检测MMP3(Matrix metalloproteinases 3,MMP3)、IL-1β(Interleukin-1β,IL-1β)、IL-6(Interleukin-6,IL-6)、IL-8(Interleukin-8,IL-8)及RANKL(Receptor Activator of Nuclear Factor-κB Ligand,RANKL)的分泌及表达水平。结果:与空白对照组相比,TNF-α显著增强HFLS-RA细胞的增殖及细胞因子分泌(P<0.001);与TNF-α组比较,桂枝附子汤高、中、低剂量组均显著抑制HFLS-RA细胞的增殖及细胞因子分泌(P<0.001);与甲氨蝶呤(MTX)阳性药物对照组相比,桂枝附子汤各剂量组抑制细胞增殖效率不及MTX组,但GFD中、高剂量组可显著抑制IL-1β、IL-6、IL-8及RANKL等细胞因子的分泌(P<0.001)。结论:桂枝附子汤可显著抑制TNF-α诱导的HFLS-RA细胞的增殖及其细胞因子的分泌,其机制可能与JAK/STAT信号通路相关。