巢蛋白过表达作为胶质母细胞瘤潜在预后标志物的研究

目的 探讨巢蛋白表达与微血管密度(microvessel density,MVD)的关系和作为胶质母细胞瘤(glioblastoma,GBM)潜在预后标志物的价值。方法 回顾性纳入2020年3月至2023年3月在重庆医科大学附属第三医院接受全麻开颅手术的GBM患者50例,根据巢蛋白H评分(巢蛋白染色强度×阳性细胞百分比)中位值将50例患者分为H评分≥80.0分组28例和H评分<80.0分组22例;随访2年,将50例患者分为死亡组23例和存活组27例。用免疫组织化学染色测定组织巢蛋白表达,用血管性血友病因子(von willebrand factor,vWF)和CD105免疫反应法量化MVD;用Spearman秩检验分析巢蛋白表达与MVD形成之间的相关性,用多变量Cox比例风险回归分析GBM患者总生存期恶化的影响因素,用Kaplan-Meier生存曲线分析GBM患者2年生存率。结果 巢蛋白H评分与vWF-MVD(Rho=0.701,P<0.01)、CD105-MVD(Rho=0.753,P<0.01)均呈显著正相关。H评分≥80.0分组和H评分<80.0分组性别、年龄、异柠檬酸脱氢酶-1突变、肿瘤部位、肿瘤位置、脑坏死、肿瘤体积、水肿体积、术前卡氏功能状态评分、肿瘤切除程度比较,差异无统计学意义(P>0.05);存活组异柠檬酸脱氢酶-1突变、肿瘤最大程度切除比例高于死亡组,巢蛋白H评分低于死亡组(P<0.05,P<0.01)。Cox比例风险回归显示,部分切除/活检(HR=4.781,95%CI:2.066~11.060,P=0.001)和巢蛋白H评分升高(HR=1.007,95%CI:1.001~1.013,P=0.032)是GBM患者总生存期恶化的独立影响因素。Kaplan-Meier生存曲线分析显示,巢蛋白H评分≥80.0分组累积生存率低于H评分<80.0分组(log rank χ^(2)=8.147,P=0.004)。结论 巢蛋白过表达与GBM患者的不良预后有关,预示着更多的微血管生成,可能是GBM患者的治疗靶点。

RNAi沉默c-Met基因对人脑胶质瘤U251细胞增殖及侵袭能力的影响

目的探讨RNAi沉默c-Met基因对人脑胶质瘤U251细胞增殖及侵袭能力的影响。方法分别构建3种靶向c-Met基因的短发卡RNA(sh RNA)序列,以脂质体转染的方式导入人脑胶质瘤U251细胞,并筛选出稳定表达的细胞株。采用PCR和Western blot检测c-Met-sh RNA转染后U251细胞c-Met的表达情况,以筛选出可有效沉默c-Met基因的sh RNA。c-Met基因沉默后,采用MTT法和流式细胞术检测U521细胞增殖情况,采用Transwell法和细胞划痕实验检测U251细胞侵袭和迁移情况,采用裸鼠荷瘤实验研究U251细胞体内成瘤性。结果成功构建可有效沉默c-Met基因的c-Met-sh RNA1。沉默c-Met后,c-Met m RNA以及蛋白的表达均显著下降,差异有统计学意义(P<0.05);而且可明显抑制U251细胞的增殖、侵袭、迁移以及体内成瘤能力,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 RNAi沉默c-Met基因可有效抑制人脑胶质瘤U251细胞的增殖、侵袭、迁移以及体内成瘤能力。