幽门螺杆菌前炎症外膜蛋白oipA的基因克隆与序列分析

目的 构建能高效表达幽门螺杆菌前炎症外膜蛋白oipA的大肠杆菌菌株。方法 提取幽门螺杆菌染色体DNA ,用PCR方法扩增oipA的相应基因。经克隆、构建重组质粒 ,转化大肠杆菌Top10后 ,进行测序鉴定 ,再与GenBank中的HP0 6 38和JHP0 5 81相比较。结果 扩增得到一个含 92 4bp的基因片段 ,与HP0 6 38核苷酸序列相比有 95 32 %的同源性 ,与JHP0 5 81相比有 95 0 2 %的同源性。均比HP0 6 38和JHP0 5 81之间的同源性高。结论 获得的目的基因与文献报道的基因序列大致相同 ,但也有一定的差异。目前这种差异的来源尚不清楚 ,可能是由菌株不同引起 ,也可能是菌型差异引起。

缺血半暗带组织中水通道蛋白4表达的初步研究(英文)

背景:在组织学和细胞学上对半暗带的认识已取得了进展,而关于水通道蛋白(aquaporin-4,AQP4)与半暗带和磁共振成像相结合的报道不多。目的:探讨水通道蛋白-4(aquaporin-4,AQP4)在缺血半暗带(ischemicpenumbra,IP)中的表达规律。设计:随机对照的实验研究。地点和对象:健康Wistar大鼠35只,体质量300～400g,雌雄不拘,随机分为对照组和栓塞组;栓塞组又分为大脑中动脉栓塞(MCAO)后15,30min,1,3,6,24h组,每组各5只大鼠。干预:对照组的大脑中动脉不栓塞,其余操作同栓塞组。在对照组术后30min、各栓塞组于栓塞结束时行脑部T1WI,T2WI和DWI扫描。采用刘梅丽等方法界定影像半暗带,计算影像半暗带和中心梗死区的相对表观扩散系数(ADC1和ADC2),将缺血脑组织进行红四氮唑(TTC)染色,并与DWI图像对比。取最大层面的影像半暗带组织进行病理观察、免疫组织化学及原位杂交实验,用图像分析检测AQP4蛋白、基因的表达量,并进行统计分析。主要观察指标:①影像半暗带组织病理观察结果。②影像半暗带和中心梗死区的相对表现扩散系数。③AQP4蛋白、基因的表达量。结果:对照组的DWI和T2WI未见异常,ADCR为(98.7±0.8)%,AQP4蛋白表达平均值为(7.9±0.5)%,基因表达平均值为0.5±0.06。栓塞后15min即在DWI上出现高信号;平均于栓塞后1.4h?

DSA下ERCP诊治胆总管结石66例回顾性分析

目的总结并分析在DSA下行内镜下逆行胰胆管造影技术(ERCP)对胆总管结石的形成、疗效、并发症及经验体会。方法收集行ERCP诊治的胆总管结石患者66例,同时行内镜下乳头括约肌切开术(EST)下网篮及球囊取石,最后均行鼻胆管引流术(ENBD)。统计十二指肠乳头旁憩室、取石过程、并发症。结果 66例胆总管结石患者中,原发性胆总管结石12例占18%,胆囊切除术后及胆道探查术后并发胆总管结石54例占82%,十二指肠乳头旁憩室18例占27%。ERCP三腔切开刀插管成功率94%,针状刀乳头开窗占6%。穿孔并发症1%,胰腺炎的并发症4%,并发胆管炎1%。结论充分的术前准备、熟练的操作、合适的医疗器具是顺利完成手术的关键,规范化的术后管理是降低或减轻并发症的重要手段,十二指肠乳头旁憩室是胆总管结石形成及困难插管因素之一,ERCP下治疗胆总管结石安全而高效。

水通道蛋白-4在脑缺血半暗带组织中的表达

目的探讨水通道蛋白4(AQP4)在缺血半暗带(IP)中的表达规律。方法将健康Wistar大鼠36只,体重300～400g,雌雄不拘,数字表法随机分为对照组(6只)和栓塞组(30只);栓塞组又分为大脑中动脉栓塞(MCAO)后15min、30min、1h、3h、6h及24h组,每组各5只大鼠;对照组的大脑中动脉不栓塞,其余操作同栓塞组。对各组行脑部T1WI、T2WI和扩散加权成像(DWI)扫描。界定影像半暗带,计算影像半暗带和中心梗死区的相对表观扩散系数(rADC1和rADC2),将缺血脑组织进行红四氮唑(TTC)染色,并与扩散加权成像(DWI)对比。取最大层面的缺血半暗带组织进行病理观察、免疫组织化学及逆转录聚合酶链反应(RTPCR)实验,用图像分析检测AQP4的表达变化。结果对照组的MRI未见异常,相对表观扩散系数及AQP4表达无明显改变。栓塞组于15min即在DWI上出现高信号;栓塞后1h在T2WI出现高信号,rADC1在24h内呈下降趋势,在1h内下降最明显,从15min的(70.4±6.9)%下降到1h的(53.5±10.9)%;而rADC2呈现先降后升的变化规律,从15min的(71.4±6.6)%下降到3h的(45.7±10.5)%,然后回升到24h的(78.7±11.5)%。在24h内,AQP4基因表达逐渐上升,从15min的0.42±0.05上升到24h的1.18±0.12,与rADC1呈显著负相关(r=-0.966,P<0.001)。病理学观察,缺血半暗带组织呈细胞内水肿改变。结论细胞内水肿是脑缺血半暗带组织的病理基础之一,AQP4表达增强是缺血半暗带形成的重要原因,半暗带组织的rADC值下降可以间接反映AQP4表达上升的水平。