不同性激素诱导的SD大鼠妊娠期肝内胆汁淤积症模型的肝脏病理生理研究

目的:通过分析雌二醇、孕酮诱导的大鼠妊娠期肝内胆汁淤积症(intrahepatic cholestasis of pregnancy,ICP)模型的肝脏损伤水平、胆汁酸谱以及炎症因子、氧化应激水平,探索妊娠期肝内胆汁淤积的发病机制。方法:妊娠期Sprague-Dawley(SD)大鼠颈部皮下注射雌二醇或孕酮构建大鼠ICP模型。通过检测血清总胆汁酸(total bile acid,TBA)、丙氨酸氨基转移酶(ala-nine amiotransferase,ALT)、门冬氨酸氨基转移酶(aspartate aminotransferase,AST)、碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)水平评价模型是否成功;通过肝脏病理切片评价肝脏损伤情况;采用液相色谱-质谱联用仪分析肝脏胆汁酸谱;使用RT-qPCR检测肝脏中炎症因子肿瘤坏死因子a(tumor necrosis factor-α,TNF-α)、白细胞介素-1β(interleukin-1β,IL-1β)、白细胞介素-6(in-terleukin-6,IL-6)的转录水平;使用试剂盒检测肝脏氧化和抗氧化标志物丙二醛(malondialdehyde,MDA)、超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)和谷胱甘肽(glutathione,GSH)的水平;采用RT-qPCR和Western blotting检测肝脏抗氧化应激标志物核因子红系2相关因子2(nuclear factor erythroid 2-related factor 2,NRF2)、谷氨酸-半胱氨酸连接酶修饰亚基(glutamate-cysteine ligase modifier subunit,GCLM)、谷氨酸-半胱氨酸连接酶催化亚基(glutamate-cysteine ligase catalytic subunit,GCLC)、NAD(P)H醌氧化还原酶-1[NAD(P)H quinone oxidoreductase-1,NQO1]、血红素氧合酶-1(heme oxygenase-1,HO-1)的mRNA和蛋白质水平。结果:雌激素组、孕激素组大鼠血清TBA、ALT、AST、ALP水平均较对照组显著升高。HE染色显示雌激素组大鼠肝血窦变窄,胆汁淤积;孕激素组部分肝细胞水肿,少量脂肪变性细胞出现。胆汁酸谱在各组间有较大差异。雌激素组肝脏中TNF-α、IL-1β、IL-6、MDA水平上升,而GSH、SOD和NRF2、GCLM、GCLC、NQO1的mRNA和蛋白质水平下降,而孕激素组均无明显变化。结论:雌激素、孕激素均能诱导大鼠发生ICP,其中雌激素可抑制NRF2-GCLM、NRF2-GCLC通路并导致肝脏损伤加重,而孕激素则无以上作用。