E-test监护病房革兰阴性杆菌耐药性的7年动态研究

目的调查我院重症监护病房中革兰阴性杆菌耐药状况,了解超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)菌株的产生率,并比较近年来我院细菌耐药性的变迁,为临床合理用药提供参考。方法用E-test法测定我院重症监护病房住院患者感染灶分离的108株革兰阴性杆菌对12种抗菌药物的最低抑菌浓度(MIC)及细菌产ESBLs的情况。结果亚胺培南对所有受试菌抗菌活性最高,耐药率为16.7%;头孢哌酮/舒巴坦、阿米卡星、头孢吡肟、哌拉西林/三唑巴坦及替卡西林/克拉维酸、头孢他啶和ertapenem的耐药率为34.2%～49%;其它4种抗菌药物耐药率均在60%～69.4%之间。筛选出大肠埃希菌、克雷伯菌属的ESBLs产生菌24株,ESBLs检出率分别为44.4%和53%;亚胺培南对所有大肠埃希菌和克雷伯菌属产ESBL株均较敏感。新型青霉烯类抗菌药物ertapenem(MK-0826)对收集的108株革兰阴性杆菌的抗菌活性较前下降,总耐药率为41.7%。七年资料相比,头孢哌酮/舒巴坦耐药率由16.7%增至37%,头孢他啶的耐药率亦明显增高,由1998年的26.2%增高到2005年的49%,除哌拉西林/三唑巴坦、替卡西林/克拉维酸的耐药率变化不大外,其他抗菌药物的耐药率变化较大。结论亚胺培南对所分离的细菌均表现较高的敏感性,对ESBLs产生菌亦有较强的抗菌活性。7年来细菌对所检测药物的耐药率均有不同程度增加。

盐酸安妥沙星片剂与盐酸左氧氟沙星片剂随机、双盲、双模拟治疗急性呼吸道感染的Ⅲ期临床研究

目的评价盐酸安妥沙星片剂治疗急性呼吸道感染的安全性和有效性。方法采用随机对照、双盲双模拟、平行对照的试验设计。选用40例急性呼吸道感染病人,随机分为2组,每组20例,试验组予盐酸安妥沙星片剂和安慰剂,对照组予左氧氟沙星片剂和安慰剂,每日服药2次,每次间隔12h,疗程均为7～14d。结果盐酸安妥沙星片剂与盐酸左氧氟沙星片剂相比,具有相似的临床疗效、细菌学疗效和不良反应发生率,经统计学比较两组间无显著差别。结论盐酸安妥沙星片剂治疗呼吸道感染疗效确切,安全性好。

金黄色葡萄球菌耐消毒剂基因qacA的研究

目的检测我院近年来临床分离的金葡菌耐消毒剂的qacA基因水平,为动态监测细菌耐药性的变化趋势、有效控制细菌耐药性的传播提供对策。方法收集我科临床分离的金葡菌共252株,并经本实验室重新鉴定确认。参照美国CLSI/NCCLS标准,用6μg/ml苯唑西林和4%NaCl平板,筛选出耐苯唑西林金葡菌和对苯唑西林敏感的金葡菌。应用PCR基因扩增试验检测金葡菌中耐消毒剂的qacA基因水平。随机抽取一株MRSA阳性株进行基因测序,作qacA基因验证。作qacA基因阳性株的MIC检测,了解阳性株是否有耐药性的表达。结果共检测金葡菌252株,其中MRSA84株(带有qacA基因4株),MSSA168株(带有qacA基因1株)。MRSA阳性菌株对消毒剂的MIC值明显高于MSSA菌株。结论携带含有耐消毒剂基因qacA的金葡菌未在我院流行。

注射用盐酸多西环素治疗急性细菌性感染随机、双盲、平行对照多中心临床研究

目的评价国产注射用盐酸多西环素治疗急性呼吸道及泌尿道感染的有效性与安全性。方法采用多中心随机双盲对照试验设计,试验药盐酸多西环素注射液静脉滴注,每次200m g,每日1次,疗程5～12d;对照药阿奇霉素每次500m g,每日1次,静脉滴注,疗程5～12d。结果试验组、对照组的总体临床有效率与痊愈率分别为97.64%、79.53%与94.35%、67.74%;两组的细菌清除率分别为96.74%和96.05%;对革兰阴性菌的清除率试验组为96.08%,对照组为95.56%;对革兰阳性菌的清除率试验组为97.56%,对照组为100%,经统计学分析无显著差异(P>0.05);对支原体的清除率试验组为93.33%,对照组为77.78%,统计学分析有显著性差异(P<0.05)。纸片药敏结果表明临床分离菌对多西环素敏感率与米诺环素、阿奇霉素、阿米卡星、头孢噻肟、左氧氟沙星比较,均无统计学差异。MIC结果提示多西环素对多种需氧革兰阳性、阴性菌有较强的抗菌活性,对支原体也有良好的抗菌活性。试验组与对照组不良事件发生率分别为17.83%与13.49%,两组比较无显著性差异(P>0.05),两组不良事件均以静脉刺激及消化道反应为多见,无严重不良事件发生。结论盐酸多西环素注射液抗菌谱广、抗菌活性强,治疗各种敏感菌所致的急性轻、中度呼吸道、泌尿道细菌及支原体感染均有很好临床疗效和细菌学疗效,不良反应发生率低。

国产注射用比阿培南人体药动学研究

目的建立人血浆比阿培南（biapenem）浓度的反相高效液相色谱测定法（HPLC）。研究健康受试者单剂量和多剂量注射国产比阿培南后的人体药动学。方法11名健康志愿者分别接受比阿培南注射液静脉滴注300mg单次和多次，应用反相高效液相色谱法测定血药浓度，计算药动学参数。结果血浆中比阿培南浓度分别在0．5～10μg／ml浓度范围内呈良好的线性关系，日内、日间变异系数及回收率均达到临床药动学研究的要求。受试者静注比阿培南单剂和多剂后体内过程均符合二房室模型，主要药动学参数cmax分别为（16．64±3．32）和（17．01±3．92）mg／L；平均AUC（n-∞）（27．28±8．94）和（26．85±7．46）[mg／（L·h），平均血浆消除半衰期t1／2β分别为（1．17±0．69）和（0．85±0．14）h。结论国产注射用比阿培南在健康人体内的药动学符合二房室模型特征；多次给药体内无蓄积作用。

安络化纤丸治疗慢性乙型肝炎肝纤维化临床疗效观察

目的观察安络化纤丸对慢性乙型肝炎血清肝纤维化指标的影响。方法随机将60例慢性肝炎患者分为安络化纤丸治疗组(治疗组)和一般保肝治疗组(对照组),对比分析治疗前和治疗3个月后血清透明质酸(HA)、层粘连蛋白(LN)、Ⅲ型前胶原(PCⅢ)、Ⅳ型胶原(Ⅳ-C)水平的变化。结果治疗组在降低血清肝纤维化指标方面均优于对照组。结论安络化纤丸具有较好的抗肝纤维化作用,治疗期间未发现明显不良反应。

注射用法罗培南钠对金葡菌的体内外抗菌活性研究

目的研究注射用法罗培南钠对临床分离的金葡菌的体内外抗菌活性。方法用头孢西丁纸片法在近年来本室保存的临床分离金葡菌中筛选耐甲氧西林的金葡菌(methicillin resistant staphylococcus aureus,MRSA),用琼脂平板稀释法测定法罗培南和万古霉素对甲氧西林敏感的金葡菌(methicillin sensitive staphylococcus aureus,MSSA)和MRSA菌株的最低抑菌浓度(minimal inhibitory concentration,MIC)。根据MIC选择对法罗培南敏感、中度和高度耐药的MRSA菌株及1株MSSA建立小鼠腹膜炎模型,以注射用法罗培南钠及万古霉素通过静脉注射进行感染动物的治疗,评价对感染小鼠的保护作用。结果151株金葡菌中共分离出65株MRSA,阳性率为43%;体外试验法罗培南和万古霉素对86株MSSA均敏感。65株MRSA对法罗培南敏感者10株,其余均耐药;对万古霉素均敏感。注射用法罗培南钠对4株菌的ED_(50)分别为38.3、38.6、71.9和7.07mg/kg;万古霉素则为2.25、10.18、20.85和1.77mg/kg。结论注射用法罗培南钠对MSSA有良好的体内和体外抗菌活性;注射用法罗培南钠对MRSA无效,即使体外敏感。

疱疹病毒感染促进C57BL小鼠体内胆固醇重新分布

目的:探讨疱疹病毒感染是否通过与胆固醇代谢负反馈途径中的固醇调节元件结合蛋白(SREBP)、SREBP切割激活蛋白(SCAP)及其靶基因LDL受体的相互作用而改变胆固醇代谢的平衡。方法:以高脂饮食喂养C57BL小鼠联合腹腔注射小鼠疱疹病毒(MHV-68)14周后,检测血清脂质的变化,对小鼠主动脉行冷冻切片油红O染色,并检测胆固醇负反馈途径各基因的mRNA转录和表达情况。结果:与单纯高脂饮食喂养的小鼠比较,在MHV-68感染联合高脂饮食喂养的C57BL小鼠中,血清脂质水平显著下降,而肝脏组织胆固醇水平显著升高,油红O染色发现脂质条纹的形成,荧光定量RT-PCR结果提示胆固醇负反馈途径的关键基因SCAP,SREBP和LDL受体基因转录水平显著升高,免疫组织化学提示上述基因表达增强。结论:疱疹病毒感染造成的炎症在高脂的基础上有可能进一步促进脂质代谢紊乱,这可能与胆固醇负反馈途径SCAP基因在炎症状态下失抑制,导致胆固醇摄入失控有关,同时炎症状态下血脂水平并不能真实反映体内脂负荷。

临床分离肺炎链球菌的毒力基因及血清型分析

目的了解肺炎链球菌的5种常见毒力基因（psaA、pspA、nanA、ply、lytA）在临床分离株中的分布情况。方法以2006-2008年从临床分离133株肺炎链球菌为研究对象，采用PCR法对5种常见的毒力基因进行检测。结果lytA、psaA、nard、pspA、ply这5种基因在133株菌中的检测阳性率分别为94．7％、85．0％、84．2％、60．2％、82．7％；5种毒力基因在87株常见血清型菌中的阳性率分别为100％、87．4％、89．7％、67．8％、86．2％。结论5种毒力基因在本地区肺炎链球菌中的阳性检测率均较高，在常见血清型菌株中的阳性检测率较其他血清型高。这5种基因是肺炎链球菌致病的主要毒力基因，可能作为新型肺炎蛋白疫苗的候选基因。

间充质干细胞对急性肝衰竭的治疗及移植途径的优化

目的探讨脐带间充质干细胞(human umbilical cord mesenchymal stem cells,hUCMSCs)对急性肝衰竭大鼠的治疗作用及移植途径的优化。方法将48只SD大鼠随机分为4组:空白对照组、模型对照组以及移植治疗A、B组,每组12只,模型对照组和移植治疗组大鼠均经腹腔注射50%CCl4橄榄油溶液,造模后24 h,模型对照组经尾静脉注射1 ml生理盐水,空白对照组和移植治疗A组均经尾静脉注射1 ml hUCMSCs悬液,移植治疗B组经肝叶注射0.3 ml hUCMSCs悬液。移植治疗后多时间点收集血清,采用全自动生物化学分析仪检测白蛋白(albumin,ALB)、总胆红素(total bilirubin,TBil)和丙氨酸氨基转移酶(alanine aminotransferase,ALT)含量;移植治疗后1和2周,采用Real-time PCR法检测各组大鼠肝组织中人CK8、CK18和AFP基因水平;移植治疗后3 d、1和2周,采用免疫组化SP法检测各组大鼠肝组织中人CK18蛋白的表达。结果移植治疗后24、48 h,移植治疗组与模型对照组相比,ALB、TBil和ALT含量差异有统计学意义(P均<0.05);移植治疗后1和2周,与模型对照组相比,移植治疗A和B组CK8、CK18和AFP基因水平均明显升高(P均<0.01),随造模时间的延长,基因水平也逐渐升高;移植治疗后3 d,大鼠肝脏组织中可检测到人CK18蛋白的表达,hUCMSCs在大鼠肝组织中诱导分化后,从汇管区向肝小叶中央迁移扩散;移植治疗A和B组的肝功能指标、移植细胞分化程度比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论hUCMSCs能促进急性肝衰竭大鼠肝脏的修复,同时自身能分化为具有肝细胞功能的类肝样细胞,经尾静脉注射移植与经肝叶注射移植疗效相似,前者更易于应用和推广。