检验科在医院中心制模式下的科研教学实践探讨

传统的医院教学和科研模式存在学科独立、知识结构单一、学科间交叉不足的缺点。这直接导致研究型医院处理疑难重症疾病的能力和科研创新动力不足。重庆医科大学附属教学医院引入中心制模式后,学科间相互交融,同时在探讨中引入先进的非医学学科理念,如认知上提倡发展"团队医疗";技术上沟通合作如AI、纳米机器人和太赫兹等前沿技术。结合本科室的科研教学实践,在以检验医师为出发点探讨重庆医科大学附属教学医院在当前中心制模式下教学、科研与学科建设状况,为进一步改善检验医师融入医院中心制模式,推动科研教学发展提供决策依据。

检验门诊的未来发展之路

临床检验诊断学是临床医学一级学科下重要的二级学科,检验医学也是连接临床医学与基础医学的重要桥梁[1]。随着医疗技术的发展和患者服务需求的增长,检验医学工作者的职业导向逐步由过去的以标本为中心、以获取检测结果为目的转向以患者为中心、以提升疾病诊疗获益为目的。鉴于此,国内各大型综合性医院相继开设检验门诊以提升为患者服务的品质与范围,检验医师也在其中发挥着越来越重要的作用[2]。

过表达INPP4B对人急性髓系白血病THP-1细胞增殖和凋亡的影响及其潜在机制

目的:探讨二型磷脂酰肌醇4磷酸酶(inositol polyphosphate 4-phosphatase typeⅡ,INPP4B)对人急性髓系白血病THP-1细胞体外增殖和凋亡的影响及潜在机制。方法:将携带INPP4B的重组质粒载体p EAK-Flag/INPP4B转染人THP-1细胞系(Flag-INPP4B组),同时设立未处理组为对照(Mock组)。采用qRT-PCR和Western blot分别检测实验组和对照组细胞INPP4B mRNA和蛋白的表达水平;CCK-8实验检测细胞体外增殖能力;流式细胞术检测细胞凋亡情况;Western blot检测凋亡相关蛋白Bax/Bcl-2(Bcl-2-associated X/B-cell lymphoma-2,Bax/Bcl-2)以及磷脂酰肌醇-3激酶(phosphoinositide-3 kinase,PI3K)下游信号分子蛋白激酶B(protein kinase B,PKB/AKT)和血清糖皮质激素调节激酶-3(serum and glucocorticoid regulated kinase-3,SGK3)蛋白的磷酸化水平;酶联免疫吸附试验(ELISA)检测细胞内PI(3,4)P2和PI(3)P的水平。结果:INPP4B重组质粒载体转染THP-1细胞后,INPP4B的mRNA和蛋白水平均明显上升(mRNA:t=9.724,P=0.000;蛋白:t=19.520,P=0.000),提示在THP-1细胞中成功过表达INPP4B。与Mock组相比,Flag-INPP4B组细胞体外增殖能力明显增强(F=31.870,P=0.000)。同时,过表达INPP4B可明显降低细胞凋亡率(t=6.999,P=0.002);使促凋亡蛋白Bax的表达水平下降(t=24.710,P=0.000)、抗凋亡蛋白Bcl-2的蛋白表达水平增加(t=6.398,P=0.003)。此外,过表达INPP4B可增强THP-1细胞SGK3蛋白的磷酸化水平(t=10.470,P=0.000),而对AKT蛋白的磷酸化水平无明显影响(t=0.285,P=0.790)。最后,过表达INPP4B还可明显降低THP-1细胞中PI(3,4)P2的水平(t=4.515,P=0.011),同时明显升高PI(3)P的水平(t=5.681,P=0.005)。结论:本研究结果表明过表达INPP4B可促进人急性髓系白血病THP-1细胞的体外增殖并抵抗凋亡,其机制可能与INPP4B介导激活PI3K/SGK3信号通路有关,这提示INPP4B可作为急性髓系白血病治疗的一个潜在靶点。

尿毒清联合常规西药对老年慢性肾脏病患者临床疗效、钙磷代谢及相关因子水平的影响

目的观察尿毒清联合常规西药治疗对老年慢性肾脏病患者临床疗效、钙磷代谢及相关因子水平的影响。方法将80例慢性肾脏病患者随机分为试验组与对照组,每组40例。对照组给予苯磺酸左旋氨氯地平和常规治疗,试验组在对照组治疗措施基础上加用尿毒清颗粒。两组均治疗3个月,观察临床疗效、钙磷代谢指标〔血清钙(Ca)、磷(P)、全段甲状旁腺激素(iPTH)〕、肾功能指标〔血肌酐(SCr)、内生肌酐清除率(Ccr)、尿素氮(BUN)、肾小球滤过率(GFR)〕及中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白(NGAL)、白细胞介素-6(IL-6)的水平变化。结果(1)两组治疗后,血清Ca、CCr、GFR均显著升高,且试验组上述指标水平较对照组明显增高(P均<0.05)。(2)两组治疗后,患者血清P、BUN、SCr、iPTH、NGAL及IL-6水平明显降低,且试验组以上指标水平较对照组明显降低(P均<0.05)。(3)试验组、对照组临床总有效率分别为72.5%和50.0%,组间临床疗效比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论尿毒清联合常规西药治疗老年慢性肾脏病可显著改善患者钙磷代谢和肾功能指标,优于单一的常规西药治疗,疗效显著。

实验室确诊1例少见肺诺卡菌病的案例分析及文献回顾

诺卡菌为临床少见病原菌,其可导致免疫功能低下者感染,引起化脓性肺部感染、溃疡和多发性瘘管,也可扩散到其他器官,引起脑脓肿、腹膜炎等[1]。从环境中吸入诺卡菌考虑是感染该菌的主要方式。有研究表明,诺卡菌也可导致免疫功能正常患者感染,在免疫低下或非免疫低下的情况下,肺部均是感染诺卡菌的主要靶器官[2]。诺卡菌病临床表现不典型,这也加大了临床对诺卡菌病的诊断难度[3]。

基于质谱技术的外泌体蛋白质组学在肿瘤诊断中的研究进展

外泌体是一类参与多种生理病理过程的细胞间信息交流载体,其脂质双分子层结构能有效维护所携带的生物信息分子的稳定性。因此,外泌体相对于血清、血浆等更加适合于组学研究,如蛋白质组学、转录组学及代谢组学等。随着质谱技术的不断发展,蛋白质作为诸多生物功能的直接执行者受到越来越多的关注,尤其是外泌体内的蛋白质及其生物功能。外泌体用于蛋白质组学的研究有助于阐明肿瘤的发生和发展机制,进而寻找特异性的肿瘤标志物和可用于精准治疗的靶点。

MDR1、SOX4、WT1在急性髓系白血病中的作用及表达水平

目的探讨多药耐药基因(MDR1)、SOX4、Wilms瘤基因1(WT1)与急性髓系白血病(AML)临床特征及预后的关系。方法选取2020年1月至2021年8月该院收治的149例AML患者作为AML组,72例轻度贫血患者作为对照组,采用实时荧光定量聚合酶链反应检测骨髓组织中MDR1 mRNA、SOX4 mRNA、WT1 mRNA表达水平。分析MDR1 mRNA、SOX4 mRNA、WT1 mRNA表达水平与AML临床特征及预后的关系。结果AML组骨髓组织中MDR1 mRNA、SOX4 mRNA、WT1 mRNA表达水平均高于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05)。白细胞计数≥40×109/L、有器官浸润、治疗后非完全缓解AML患者骨髓组织中MDR1 mRNA、SOX4 mRNA、WT1 mRNA表达水平均高于白细胞计数<40×109/L、无器官浸润及治疗后完全缓解AML患者,差异均有统计学意义(P<0.05)。MDR1 mRNA、SOX4 mRNA及WT1 mRNA高表达AML患者总生存率均低于MDR1 mRNA、SOX4 mRNA及WT1 mRNA低表达AML患者,差异均有统计学意义(P<0.05)。治疗后非完全缓解、MDR1 mRNA高表达、SOX4 mRNA高表达、WT1 mRNA高表达为AML预后不良的危险因素(P<0.05)。结论AML患者骨髓组织中MDR1 mRNA、SOX4 mRNA、WT1 mRNA表达水平增加,并且与白细胞计数增加、有器官浸润、治疗后非完全缓解及预后不良有关,MDR1 mRNA、SOX4 mRNA、WT1 mRNA表达水平及治疗后非完全缓解对临床预后不良有一定的警示作用。

流式细胞术在小细胞外囊泡检测中的研究进展

小细胞外囊泡(small extracellular vesicles,sEV)是由细胞主动分泌、尺寸小于200 nm、具有脂质双分子膜结构的球状膜性微小囊泡的总称,sEV参与细胞间信号通讯,在生理状态维持及疾病进程中发挥重要作用,是近年来学界研究的热点。流式细胞术具有能直接对大量细胞等进行多参数、快速度、高分辨率分析的优势,但应用在检测比细胞小很多的sEV研究中还较少。本文综述了多个研究团队报道的将流式细胞术应用于检测sEV的方法,主要包括纳米流式细胞术直接检测sEV;通过sEV聚类、DNA扩增、微球等辅助常规流式细胞仪实现检测sEV;质谱流式细胞术辅助检测sEV等。以上方法显示出了流式细胞术应用于sEV检测的可能与优势,同时也面临着如荧光光谱重叠干扰、无法准确定量、依然不能突破尺寸限制等问题,限制了其大规模的研究应用。希望本综述能帮助学界更好地了解sEV流式细胞术的研究进展,进一步推动sEV的研究。

TEG联合Plt、凝血四项检测在免疫性血小板减少患者血小板输注中的应用研究

目的探讨血栓弹力图(TEG)联合血小板计数(Plt)、凝血四项检测在免疫性血小板减少(ITP)患者输注血小板中的应用价值。方法选取2018年7月至2020年12月该院收治的诊断为ITP的住院患者65例作为研究对象,根据患者临床有无出血症状分为出血组(47例)和未出血组(18例)。同步采集2组患者标本进行血细胞分析、凝血四项[包括凝血酶原时间、活化部分凝血活酶时间、凝血酶时间、纤维蛋白原(Fg)]、TEG检测,观察2组患者Plt、凝血四项、TEG检测结果,并记录2组患者输注血小板情况、随访结果等,分析2组患者检验结果、血小板输注情况及预后的差异,评价Plt与TEG相关指标的相关性。结果出血组患者Plt、MA、Fg、K、α角、好转率、病死率与未出血组比较,差异均有统计学意义(P<0.05);Plt与MA呈正相关(r=0.558),Fg与K呈负相关(r=-0.356),Fg与α角呈正相关(r=0.487),差异均有统计学意义(P<0.05);2组患者人均输注血小板量比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论Plt、MA、Fg、K、α角联合分析患者凝血功能可预测出血风险,指导ITP患者合理输注血小板。

重度胆汁淤积症产妇早产儿脐血CC16及SP-A水平与肺损伤的关系探讨

目的:探讨妊娠期重度胆汁淤积症(ICP)产妇早产儿脐血血清中Clara细胞分泌蛋白(CC16)及肺表面活性物质蛋白A(SP-A)水平与肺损伤的关系。方法:选取2019年9月—2021年5月重庆医科大学附属第三医院妇产科剖宫产娩出的102例34~37周早产儿脐血标本。其中,产妇孕期合并重度ICP的标本设为ICP组(n=56),产妇孕期无合并症的标本设为对照组(n=46)。采用酶联免疫吸附试验(ELISA)方法检测脐血血清中C C16及SP-A水平。比较两组患儿肺损伤发生情况与脐血血清中C C16和SP-A的浓度关系。结果:ICP组肺损伤发生率(62.5%)高于对照组(39.1%),差异有统计学意义(P<0.05);ICP组脐血血清C C16水平(46.86±2.19)n g/m L及SP-A水平(95.35±3.26)pg/mL均低于对照组CC16水平(70.38±2.30)ng/mL及SP-A水平(153.9±8.10)pg/mL,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:脐血CC16及SP-A水平可作为早期预测及诊断重度ICP产妇早产儿肺损伤的指标。

ECLIA与TP-ELISA在梅毒检测中的一致性比较

目的探讨电化学发光免疫(ECLIA)分析法与梅毒螺旋体抗体酶联免疫吸附试验(TP-ELISA)在梅毒检测中的差异性及其各自的特点。方法收集重庆医科大学附属第三医院临床确诊的梅毒患者血清标本112例以及非梅毒患者血清标本1 000例。分别采用ECLIA法和TP-ELISA法对标本进行检测,计算两种方法的符合率并分析其差异。结果 ECLIA与TP-ELISA两种方法的阳性符合率为96.43%,阴性符合率为100%,两种方法具有一致性(κ=0.980,P<0.01)。结论 ECLIA法是一种敏感性、特异性和准确性都较高的检测梅毒抗体的方法,TP-ELISA法在S/CO<2.68时重复性低于ECLIA法,需要注意复检工作,以防止漏检造成的不必要的医疗纠纷。