炎症对C57BL／6J小鼠肝脏胆固醇积聚及纤维化的影响

目的观察炎症对小鼠肝脏内胆固醇蓄积、内质网应激及纤维化的影响。方法将8周龄雄性C57BL／6J小鼠随机分为对照组∞=6）和炎症组∞=6），均以高脂饮食，炎症组小鼠隔天皮下注射0．5ml10％酪蛋白以建立慢性炎症模型，对照组注射等量等渗盐水，14周处死。收集血清和肝组织样本，测定血清及肝组织中炎症因子及脂质水平；油红O、天狼猩红和Masson三色染色观察肝脂质沉积、形态改变以及纤维化程度；荧光实时定量PeR检测肝组织单核细胞趋化蛋白1、肿瘤坏死因子（TNF）仅、胆固醇调节元件结合蛋白（SREBP）2、低密度脂蛋白受体、3-羟-3-甲基戊二酰辅酶A还原酶、活化转录因子6、葡萄糖调节蛋白（GRP）78、骨形成蛋白（BMP）7、转化生长因子（TGF）D、层黏连蛋白、I／Ⅳ型胶原的mRNA水平。对数据进行两样本均数t检验或近似t检验。结果血清中，炎症组白细胞介素（IL）6的水平[（32．41土7．42）pg／m1]高于对照组[（12．55±4．75）pg／nat]，f=5．522，P〈0．01；总胆固醇水平为（10．62±0．48）mmoL／L，低于对照组的（14．82土1．56）mmol／L，t=6．303，尸〈0．01。肝组织中，炎症组TNFa的mRNA相对表达水平为2．12±0．72，高于对照组的1．05±0．35，t=3．132，P〈0．01；总胆固醇水平为（23．21±8．75）μg／mg，高于对照组的（12．10±2．57）ug／mg，t=2．984，P〈0．05。油红O染色表明，炎症组肝脏脂滴沉积异常增多；天狼猩红和masson三色染色可见炎症组有更为明显的肝纤维化改变。荧光定量PCR检测表明炎症组SREBP-2、GRP78的mRNA相对表达水平分别为2．63±0．13、2．21±0．99，高于对照组的1．01±0．19、1．07土0．47，t值分别为15．641和2．031，P值均〈0．05。TGFβ、I型胶原的mRNA相对表达水平分别为1．38±0．28、1．71士0．51，高于对照组的1．01±0．14、1．02±0．27，f值分别为3．032和3．152，P值均〈0．05。BMP-7的mRNA相对表达水平为0．55±0．25，低于对照组的1．01±0．15，f=3．765，P〈0．01。结论慢性炎症可以明显促进小鼠肝脏胆固醇沉积而加重肝细胞损害，刺激内质网应激，从而增加促纤维化因子表达、抑制抗纤维化因子表达，促进肝纤维化发生。