循环外泌体抑制弥漫大B细胞淋巴瘤细胞增殖及其可能机制研究

目的探讨循环外泌体对弥漫大B细胞淋巴瘤(DLBCL)细胞增殖的影响及其可能机制。方法选择2016年6月至2017年6月遂宁市中心医院血液科13例经病理诊断明确的DLBCL患者,其中男性8例,女性5例;年龄37~68岁,平均年龄55.6岁。同期14例体检中心的健康体检者,其中男性7例,女性7例;年龄44~69岁,平均年龄58.9岁。获得血浆外泌体。通过电子显微镜和qNano分析仪对体检者、DLBCL患者外泌体进行鉴定。设空白对照组(U2932细胞)、对照组(健康体检者外泌体+U2932细胞)、研究组(DLBCL患者外泌体+U2932细胞),用四甲基偶氮唑盐(MTT)法、流式细胞法和Western blot检测增殖相关蛋白增殖细胞核抗原(PCNA)、Ki-67,综合评估各组细胞的增殖情况;采用高通量技术检测4例DLBCL患者血浆和4例健康体检者血浆外泌体中miRNA表达谱;用实时荧光定量聚合酶链式反应(PCR)检测DLBCL患者和健康体检者血浆外泌体中miR-92b表达水平。结果电子显微镜观察到,健康体检者、DLBCL患者外泌体呈现典型的茶托样结构,qNano分析结果显示所提取的外泌体主要集中在20~100 nm;Western blot结果显示,相比于血浆,外泌体中CD63、CD9这两个外泌体标志蛋白均有明显的表达。流式细胞结果显示,相比于空白对照组,对照组细胞G0/G1期受到抑制(P <0.05);MTT结果显示,相比于空白对照组,对照组细胞增殖能力降低(t=17.3,P <0.05);Western blot结果显示,相比于空白对照组,对照组细胞中PCNA和Ki-67表达减少(t=33.5,P <0.05)。相比于对照组,miRNA芯片分析结果显示,研究组血浆外泌体中miR-92b表达减少,RT-PCR结果显示miR-92b表达减少(t=12.9,P <0.05)。结论循环外泌体通过介导miR-92b抑制DLBCL细胞增殖。

骨髓增生异常综合征伴继发性骨髓纤维化JAK2、ASXL1基因突变1例

患者,男,67岁,因“咳嗽2个月,加重伴发热咯血3d”入院。入院查体:T 36.3℃,BP 120/70 mmHg,贫血貌,全身浅表淋巴结未扪及,双肺呼吸增粗,右肺下可闻及湿哕音,心律齐,未闻及杂音,腹软,无压痛及反跳痛,肝脾肋下均未及,双下肢无水肿。入院后查血常规:白细胞计数(WBC)2.7×10^9/L.