失血性休克大鼠肠上皮细胞mtTFA、COXⅠ、COXⅣ基因表达的改变

目的探讨失血性休克(简称休克)大鼠肠上皮细胞核转录因子mtTFA基因以及核编码线粒体蛋白基因COX Ⅳ和线粒体编码COXⅠ基因表达的改变。以探讨在缺血缺氧性损害中核转录因子mtTFA对线粒体基因组表达的影响。方法采用RT-PCR方法观察休克大鼠肠上皮细胞mtTFA、COXⅠ和COXⅣ基因mRNA量的改变。结果休克早期mtTFA mRNA表达变化不明显,至休克4 h有所增强,到休克5 h下降到休克前水平;休克1 h大鼠肠上皮细胞COXI mRNA表达开始增加,3 h达高峰,后又降低,到休克5 h显著低于休克前水平。休克大鼠肠上皮细胞核基因编码COXⅣmRNA休克3 h略有增高,休克4 h后开始下降,至休克晚期低于休克前水平。结论 mtTFA mRNA表达变化在休克时发生较晚,且升高幅度较小,说明休克时该基因对细胞缺血缺氧性损害的敏感性较低。休克时COX Ⅰ mRNA比COX Ⅳ mRNA上调速度快,维持时间长,说明休克早期线粒体基因表达的改变在细胞缺血缺氧性损伤的保护中起着更重要的作用。

Rg_1对失血性休克大鼠肠上皮细胞PGC-1基因表达的影响

目的探讨Rg1对失血性休克大鼠肠上皮细胞PGC-1基因表达的影响,以从基因调控水平探讨Rg1对失血性休克时肠上皮细胞线粒体缺血缺氧性损伤的保护作用。方法用RT-PCR方法观察失血性休克大鼠肠上皮细胞PGC-1基因mRNA量的改变,用Western-blot法检测肠上皮细胞PGC-1蛋白的表达变化。结果失血性休克5 hPGC-1 mRNA表达明显降低(P<0.05),复苏后3 h组其表达量仍低于休克前水平,但较失血性休克组表达有所增强。复苏加Rg1治疗3 h后PGC-1 mRNA明显呈较高水平表达。复苏加SB202190及复苏加茴香霉素对PGC-1mRNA几乎无调节作用;Rg1在SB202190存在时,仍微弱上调PGC-1 mRNA表达,Rg1能增强茴香霉素上调PGC-1mRNA的作用。失血性休克5 h大鼠肠上皮细胞PGC-1蛋白表达量明显降低,复苏加Rg1能上调PGC-1蛋白表达,复苏加SB202190或茴香霉素对PGC-1蛋白表达调节作用较弱。Rg1在SB202190存在时,微弱上调PGC-1蛋白表达,但Rg1和茴香霉素同时作用时蛋白表达量明显增加。结论复苏加Rg1可明显上调PGC-1 mRNA及其蛋白表达。提示PGC-1 mRNA上调可以促进PGC-1蛋白表达,PGC-1蛋白合成在转录后水平的调节非常重要。