miR-126靶向EGFL7抑制乳腺癌细胞MDA-MB-231上皮-间质转化

目的:探讨表皮生长因子样结构域7(epidermal growth factor-like domain 7,EGFL7)参与肿瘤细胞侵袭的可能分子机制。方法:设计构建miR-126过表达质粒,将该质粒转染并筛选培养乳腺癌细胞MDA-MB-231,Western印迹法检测EGFL7,Wnt-1,β-catenin,E-cadherin蛋白的表达变化,免疫组织化学检测Vimentin蛋白的表达并观察细胞形态变化,RT-PCR检测Twist和Slug转录因子mRNA表达,Transwell小室体外侵袭实验观察肿瘤细胞的体外侵袭能力。结果:成功建立过表达mi R-126的转染乳腺癌细胞株MDA-MB-231/miR-126,稳定转染细胞株EGFL7蛋白表达下调(P<0.01),并下调Wnt-1/β-catenin蛋白水平(P=0.02/P<0.01),E-cadherin蛋白表达上调(P<0.01),Vimentin蛋白表达下调,且细胞形态由梭形间充质样向多边形上皮样转化;Twist和Slug转录因子表达下调(P<0.01),肿瘤细胞体外侵袭能力减弱(P<0.01)。结论:miR-126通过靶向调节EGFL7调控Wnt-1/β-catenin信号通路及Twist,Slug转录因子,抑制乳腺癌细胞MDA-MB-231上皮-间质转化(epithelialmesenchymaltransition,EMT),降低了乳腺癌细胞MDA-MB-231体外侵袭能力,EGFL7可作为一种预测乳腺癌转移的重要生物标志物,并可能成为一种潜在的治疗靶点。

乳腺癌EGFL7及β-catenin蛋白检测的临床意义

目的:检测并探讨类表皮生长因子域-7(epidermal growth factor-like domain 7,EGFL7)和β-链蛋白(β-c aten i n)在乳腺癌患者病变组织及血清中的表达水平及其与乳腺癌转移之间的关系。方法:分别采用免疫组织化学En Vision二步法检测EGFL7及β-catenin蛋白在93例乳腺癌组织(其中淋巴结转移病例62例,远处转移病例10例)与54例乳腺纤维腺瘤和腺病组织中的表达,ELISA双抗体夹心法检测患者血清中EGFL7蛋白水平。结果:EGFL7蛋白在乳腺癌组织中的表达高于乳腺纤维腺瘤和腺病组织(P<0.05),EGFL7蛋白表达水平与乳腺癌淋巴结和远处转移呈正相关(P<0.05)。与伴淋巴结转移的乳腺癌病例相比,伴远处转移的乳腺癌病例EGFL7蛋白表达水平差异无统计学意义(P>0.05)。乳腺癌组织β-catenin蛋白表达水平高于乳腺良性病变组织(P<0.05),伴有淋巴结和远处转移的乳腺癌组织β-catenin蛋白表达水平高于无淋巴结转移的乳腺癌组织(P<0.05),而伴远处转移的乳腺癌病例的β-catenin蛋白表达水平与伴淋巴结转移的乳腺癌病例比较,差异无统计学意义(P>0.05)。发生淋巴结和远处转移的乳腺癌患者血清中EGFL7蛋白水平高于无转移的乳腺癌及乳腺纤维腺瘤和腺病组织(P<0.05),其中伴远处转移的乳腺癌病例血清EGFL7蛋白水平与只伴淋巴结转移的乳腺癌病例比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论:EGFL7及β-catenin蛋白检测对评估乳腺癌转移风险具有一定的临床参考价值。