牛支原体生物学特性及其膜蛋白的研究进展

牛支原体(Mycoplasma bovis,Mb)是引起牛肺炎、关节炎、乳房炎和中耳炎等众多疾病的主要病原之一,牛支原体引起的疾病在欧美地区广泛蔓延并造成巨大的经济损失。中国2008年首次报道在犊牛肺炎中分离到牛支原体,目前国内对牛支原体的认识还很欠缺,现对牛支原体生物学特性及其膜蛋白进行简要综述,以期为牛支原体病的防控与治疗提供一定的参考依据。

牛支原体不同分离株全菌蛋白免疫印迹分析

为比较牛支原体（Mycoplasma bovis,M.bovis）不同分离株间全菌蛋白组成的差异,找到其具有免疫原性的蛋白片段,试验采用裂解液法提取分离自全国不同地区6株M.bovis分离株（W70株、1738株、Q3株、Q1株、JX02株、677株）的全菌蛋白,并利用自制抗血清对所获蛋白进行SDS-PAGE和免疫印迹分析。结果显示,6株分离株全菌蛋白条带数量、清晰度存在差异,其中W70株、1738株、Q3株和Q1株的蛋白条带数量及清晰度均优于JX02株和677株,蛋白质分子质量范围在23.2~130.8ku之间;6株分离株均显现2条大小为55和43ku的免疫杂交条带。综上所述,M.bovis不同分离株全菌蛋白组成存在差异,55和43ku是其主要的免疫原性蛋白之一,该试验结果为M.bovis病血清学诊断、分子诊断技术及疫苗的研制提供理论依据。

牛支原体及其支原体病诊断技术研究进展

随着规模化养牛业的不断发展,牛支原体已经成为危害养牛业的一种重要致病性支原体,可导致牛肺炎、乳腺炎、关节炎等多种疾病,造成巨大经济损失。文章综述了牛支原体的分离培养法、免疫学方法和核酸诊断技术。

药物递呈载体对提高CpG-DNA免疫刺激活性的作用

以CpG为核心的细菌DNA和人工合成的寡聚脱氧核苷酸(ODN)都可以作为一种"危险信号"刺激机体的免疫系统,引起天然免疫和获得性免疫应答。然而,CpG-DNA的体内清除和有效递呈却在很大程度上限制了其免疫学应用。因此,如果以脂质体、壳聚糖、藻酸盐等载体递呈CpG-DNA有可能克服胞外障碍的限制,能够保护CpG-DNA不被胞外核酸酶降解,增强其稳定性,降低其毒副作用;有效提高导入部位形成"抗原贮存库",促使APCs细胞的募集和活化,延长作用时间;提高其靶向特异性,富集于靶组织、器官、细胞等,特别是树突状细胞;免疫协同CpG-DNA的刺激活性,全面提高机体的免疫应答水平。

牛支原体膜蛋白6种提取方法的比较研究

为筛选最佳牛支原体(mycoplasma bovis,Mb)膜蛋白的提取工艺,本试验以牛支原体W70株为代表,分别比较了4种浓度的TritonX-100、TritonX-114、TritonX-100和TritonX-114;3种浓度碘化钾(KI)复合提取;反复冻融和超声裂解等6种Mb膜蛋白提取工艺和参数。各方法所获膜蛋白经SDS-PAGE和Bradford定量分析表明:不同方法的提取物中蛋白多肽和蛋白浓度各异;其中以3%TritonX-114和0.4%TritonX-100结合0.6M KI两法提取的蛋白条带清晰度较好,蛋白浓度及蛋白收集率较高,蛋白多肽条数24～28条,蛋白相对分子质量分别在170 000～12 200和167 000～11 400之间;超声裂解及反复冻融法提取效果一般;而1.8 M KI法效果最差。研究发现3%TritonX-114或0.4%TritonX-100结合0.6M KI是Mb膜蛋白较优的提取方法。