柑桔轮斑病研究进展

柑桔轮斑病是一种新发的柑桔毁灭性病害,陆续在我国多地暴发,已经对温州蜜柑、柠檬、脐橙等柑桔生产造成了严重损失,且仍存在进一步扩散的风险。为了掌握该病的流行动态,建立有效的防治措施,对柑桔轮斑病发生范围、症状、病原、流行因素、病害诊断、防治方法等方面已有的研究成果进行了综述。

重庆万州疑似柑桔轮斑病的病原鉴定及防治药剂筛选

为了明确2018年秋季起在重庆万州柑桔种植区新发生病害的病原菌和筛选有效防控药剂,通过组织分离法从患病样品中获得菌株,进行病原菌形态学、分子生物学和致病性鉴定,采用生长速率法测定不同药剂对目标菌株的毒力。结果表明,新发生病害的病原菌为柑桔轮斑病菌Pseudofabraea citricarpa。从尤力克柠檬病害样品上分离所得的病原菌WZ1菌株,对万州地区主栽的8个柑桔品种(尤力克柠檬、红桔、北京柠檬、塔罗科血橙、W·默科特桔橙、大雅柑、纽荷尔脐橙、北碚447锦橙)的叶、枝、果以及昭通苹果及砀山酥梨果实均具有致病性。50%甲基硫菌灵SC、30%碱式硫酸铜SC、50%啶酰菌胺WG、11.5%吡唑嘧菌脂EC、86.2%氧化亚铜WP、50%醚菌酯WP、3%噻霉酮ME、40%腈菌唑WP、99%噁霉灵DP、450g/L咪鲜胺EC、37%苯醚甲环唑WP、60%唑醚·代森联WP、25%嘧菌酯SC、250g/L戊唑醇EW、75%肟菌·戊唑醇WG、12.5%烯唑醇WP等杀菌剂,以及80%代森锰锌WP与50%啶酰菌胺WG 1∶64复配、80%克菌丹WP与37%苯醚甲环唑WP 1∶1复配,对病原菌菌丝生长有较强的抑制作用,可进一步用于田间试验。

重庆垫江柑橘园土壤和叶片养分状况分析

为摸清重庆垫江柑橘园土壤和叶片营养元素状况,2019~2020年采集了重庆垫江柑橘主产区的118份土壤和130份叶片样品进行养分分析和相关性分析。结果表明:1)pH适宜的土样占94.45%,但是土壤有机质含量适宜的土样仅占33.33%;土壤大量元素碱解氮、有效磷和速效钾含量多数表现偏低,适宜的土壤分别占5.56%、16.67%和33.33%;中量元素交换性钙和交换性镁含量均表现为高量或过量;微量元素有效硼、有效铜、有效铁、有效锌和有效锰含量适宜的土壤分别占16.67%、38.89%、5.56%、27.78%和11.11%,有效锌含量缺乏和低量的样品占72.22%。2)在叶片营养中,大量元素氮、磷和钾含量适宜的样品占比分别为44.62%、53.08%和12.31%,钾表现为缺乏或偏低的样品比例达到87.70%;中量元素钙、镁和硫含量适宜的样品占比分别为68.46%、53.85%和94.61%,且缺乏和过量现象较少;微量元素铁、锰、锌、铜和硼含量适宜的样品占比分别为62.31%、46.15%、3.85%、36.92%和69.23%,锌和铜含量缺乏或低量的样品占比较高。3)土壤pH与有机质和有效养分含量之间存在一定的相关性,其中土壤pH与土壤有效铁、有效锰含量呈极显著负相关,土壤有机质与有效铜含量呈显著正相关;叶片各营养元素间存在一定的相关性,其与土壤营养元素之间也具有一定的相关性。4)不同柑橘品种影响叶片除钾和锌以外的营养元素含量,默科特叶片氮、镁、铁、锰和硼共5个元素的含量均为所有品种中最高。因此,重庆垫江柑橘园根据不同品种和养分情况施肥,注意在土壤中增施有机肥,适量补充氮肥、磷肥与钾肥以及微量元素硼、铜、铁、锌和锰,特别是锌,同时注重叶面适量补充大量元素钾和微量元素锌、锰和铜,为垫江乃至重庆柑橘高产优质和化肥减施增效提供依据。

重庆柑橘产区柑橘褪绿矮缩病毒的发生、分布和分子特性研究

【目的】明确柑橘褪绿矮缩病(Citrus chlorotic dwarf-associated virus, CCDaV)在重庆柑橘产区的发生、分布和分子特性,为制定有效防治措施提供理论基础。【方法】对采自重庆的361份疑似感染褪绿矮缩病的柚类和柠檬样品进行CCDaV检测鉴定,通过背靠背引物扩增获得CCDaV的全序列,进而分别使用RDP4和SDTv.1.2进行重组和相似性分析,并采用邻接法构建系统发育树。【结果】在3份红宝石柚(Citrus paradisi)样品中检测出了CCDaV,其全长分别为3642、3640和3641 bp。全基因组分析未发现重组事件,且上述3个CCDaV毒株与已知41个CCDaV毒株的核苷酸和氨基酸相似性分别为99.1%~99.7%和97.3%~99.7%。系统进化树分析显示,本研究中CCDaV毒株被分为了4个不同的类群,其中巫溪样品WX-4-6和WX-4-9,与广东沙田柚上的CCDaV毒株聚在一簇;而巫溪样品WX-2-5与中国柚类上获得的CCDaV毒株聚于另一个分支。【结论】在重庆首次发现了CCDaV,可能是随带病苗木进入。

塔罗科血橙新系早结丰产稳产整形修剪新技术

[目的]研究适宜三峡库区塔罗科血橙新系的高效整形修剪技术,有效解决产量低的问题。[方法]于2011—2019年对不同树龄、不同树势的塔罗科血橙新系进行不同修剪方式处理,并进行了多年观察。[结果]创新总结出一套塔罗科血橙新系早结丰产稳产整形修剪技术,有效攻克了其成花难、产量低、大小年严重的难题。[结论]这套技术适宜三峡库区晚熟柑橘塔罗科血橙新系的修剪,广泛用于生产实践中,具有显著的经济、社会和生态效益。

塔罗科血橙新系控旺长促花技术研究

[目的]研究适宜塔罗科血橙新系的控旺长促花技术,提高产量。[方法]针对4年生植株,进行不同促花处理,研究不同处理对塔罗科血橙新系产量的影响。[结果]采用拉枝+环割+多效唑处理,即7—9月,对直立的旺长枝进行拉枝(扭枝、吊枝、撑枝),9月对大枝实施环割2~3圈,配合喷施1次15%多效唑500倍,可以极大地促进塔罗科血橙新系花芽分化,确保来年丰产。[结论]拉枝+环割+多效唑处理促花效果好,经济高效,可全面推广到塔罗科血橙新系生产中。

青脆李流胶病防治技术研究

青脆李流胶病在万州区普遍发生,发生率高达90%以上,该病害严重降低了青脆李的产量、果实品质和市场竞争力,损害果农经济收益。在万州区科技局的支持下,就青脆李流胶病防治技术开展了研究。通过2年的试验,按青脆李树流胶病病情指数增减值大小及复发率大小,筛选出了2种效果较好的药剂及使用方式,结果表明,喷施细马·春雷霉素1500倍液+纳彩·辛菌胺醋酸盐1500倍液和涂松尔膜,能对青脆李流胶病的防治起到较好的效果。

柑桔轮斑病菌2个菌株对杀菌剂敏感性的差异分析

为了筛选出柑桔轮斑病菌的有效防治药剂,采用菌丝生长速率法测定了29种杀菌剂对分离自重庆的WZ1菌株及分离自陕西的DS3菌株的抑制效果,并对2个菌株的β-微管蛋白(β-tubulin)基因序列及编码的氨基酸序列进行比较。结果表明,在29种药剂中,咪鲜胺、双胍三辛烷基苯磺酸盐、氟硅唑和双胍·咪鲜胺对WZ1和DS3菌株的有效中浓度(EC_(50))<0.1 mg/L,抑制作用均强;苯醚甲环唑·氟唑菌酰胺、丙环·嘧菌酯、氟唑菌酰羟胺·苯醚甲环唑、烯肟·戊唑醇、苯甲·烯肟、吡萘·嘧菌酯、苯甲·嘧菌酯、苯醚甲环唑、氟唑菌酰羟胺·咯菌腈、唑醚·戊唑醇、氟吡菌酰胺·肟菌酯和戊唑醇对WZ1和DS3菌株的EC_(50)<1 mg/L,抑制作用较强;DS3菌株已经对甲基硫菌灵和苯菌灵产生了抗药性,相应的EC_(50)分别为3 596.628 4和115.555 2 mg/L;DS3菌株对氟啶胺、抑霉唑,WZ1菌株对代森锰锌的敏感性下降较明显,可能存在抗药性风险。DS3菌株β-tubulin基因第599位碱基由T突变为A,相应β-tubulin第200位氨基酸由苯丙氨酸变为酪氨酸,是导致该菌株对甲基硫菌灵和苯菌灵等苯并咪唑类杀菌剂产生抗药性的原因。

柑橘衰退病毒RT-RPA-LFD可视化检测方法的建立及应用

【目的】柑橘衰退病由柑橘衰退病毒(citrus tristeza virus,CTV)引起,是一种世界性的重要柑橘病害。为实现CTV的田间快速检测,建立一种准确、快速且可视化的检测方法。【方法】以CTV外壳蛋白(CP)的保守区域为靶标,设计3对特异性引物和探针,通过引物筛选,以及优化引物浓度、反应时间和反应温度等条件,建立CTV的反转录-重组酶聚合酶扩增-侧流层析试纸条(RT-RPA-LFD)快速检测方法,明确其灵敏度,并用于田间疑似样品的检测。【结果】建立了CTV的RT-RPA-LFD检测方法:最佳检测引物为RPA-1F/R,对应探针为RPA-P,最佳反应条件为40℃,25 min,且与其他5种柑橘病毒无交叉反应。该方法的灵敏度是RT-PCR的100倍,最低可检测到2.12×10^(1)拷贝·μL^(-1)的CTV核酸,与RT-qPCR相当。采用RT-RPA-LFD法在67份田间样品中检测出CTV阳性样品41份,与RT-PCR法检测结果一致。【结论】建立的CTV RT-RPA-LFD法具有操作简单、快速、结果可视等优点,适合基层植保工作者对田间样品开展快速检测。

脆红李叶斑病病原菌的鉴定及抑菌药剂的筛选

为明确脆红李叶斑病的病原菌,采用组织分离法分离纯化病原菌,通过形态学特征结合多基因联合序列分析鉴定病原菌;采用孢子喷洒法和针刺接种法测试其致病性。结果表明:从脆红李叶斑病病叶分离得到4株形态一致的真菌菌株,其代表菌株LY12的菌落呈圆形,菌丝白色至浅黄色;分生孢子器球形,黑色;分生孢子无色,单孢,多为椭圆形;采用ITS、TUB2和LSU 3段基因联合构建系统发育树,菌株LY12与荸荠茎点霉(Didymella bellidis)聚为一支;根据形态学特征和系统发育分析,确定LY12为荸荠茎点霉(Didymella bellidis);致病力测试发现,该病原菌可以侵染川渝地区青脆李、半边红、青柰、金脆李和脆红李的叶片、枝条和果实,叶片受害最严重,也可侵染尤力克柠檬、爱媛38杂柑、塔罗科血橙3个柑橘品种的叶片和果实;室内药剂筛选结果表明,24种杀菌剂中,50%啶酰菌胺水分散粒剂、38%唑醚·啶酰菌胺悬浮剂、25%嘧菌酯悬浮剂、75%肟菌·戊唑醇水分散粒剂等11种杀菌剂对病原菌菌丝生长有较强的抑制作用,病原菌对50%啶酰菌胺水分散粒剂最敏感,EC50为0.1531µg/mL。

川渝地区塔罗科血橙新系炭疽病的病原鉴定及其遗传多样性分析

【目的】调查分析重庆、四川两地引起塔罗科血橙新系炭疽病的病原及其遗传结构,以探索更精准高效的炭疽病防控方法,减少柑橘生产的经济损失。【方法】通过病菌形态学鉴定,以及PCR扩增ITS和GDPH基因序列分析,对我国四川和重庆两个主产区的塔罗科血橙新系进行炭疽病病原鉴定及其遗传多样性分析。【结果】①从四川、重庆采集的50份塔罗科血橙新系叶片、枝条和果实炭疽病菌疑似样品中总共分离到41个胶孢炭疽菌(Colletotrichum gloeosporioides)菌株。②依据培养特征、分生孢子形态和致病力差异,将病菌分为Ⅰ型、Ⅱ型、Ⅲ型和Ⅳ型共4个类型,不同类型菌株的占比分别为73.17%、17.07%、4.88%和4.88%。Ⅱ型和Ⅲ型菌株接种塔罗科血橙新系果实后的发病率达100%,而Ⅰ型和Ⅳ型菌株接种塔罗科血橙新系果实后的发病率均为88.9%。其中,Ⅱ型平均病斑直径最大,为1.7 cm,而Ⅳ型菌株平均病斑直径最小,仅为0.6 cm,4个类型菌株接种塔罗科血橙新系果实后形成的平均病斑直径差异显著(P<0.05),而不同菌株致病性的差异与菌株地理来源、分离部位无明显相关性。③遗传多样性分析显示,以ITS为靶标无法有效揭示柑橘胶孢炭疽菌的遗传变异,而以GDPH为靶标则可将柑橘胶孢炭疽菌分为4个类群,其聚类结果与形态学分类结果及致病性测定结果一致。柑橘胶孢炭疽菌的遗传进化与地理来源、分离部位均无明显相关性。【结论】明确了采集的川渝两地塔罗科血橙新系炭疽病病原菌为胶孢炭疽菌,不同类型的塔罗科血橙新系炭疽病菌菌株的形态特点和致病力存在差异,并且菌株存在遗传变异,为川渝两地塔罗科血橙新系炭疽病绿色高效防控和抗病品种选育提供一定的理论基础。

一株桑椹核盘菌的鉴定及拮抗放线菌和化学防治药剂筛选

对分离自重庆市果桑基地的桑椹菌核病病原菌的子囊盘进行菌株纯化,综合其菌落培养特征初步鉴定该菌株为核盘菌属核盘菌Sclerotinia sclerotiorum,其菌核较大且坚硬、呈黑褐色,圆形子囊盘中部向内凹陷,符合核盘菌的生物学性状特征。针对该核盘菌开展了致病性测定和rDNA-ITS序列比对以及拮抗放线菌和化学防治药剂的筛选,结果如下:观测到该病原菌在田间由菌核萌发产生子囊盘,子囊孢子接种离体桑椹显示出明显的致病力,经子囊孢子分离菌株在PDA平板边缘可产生菌核;同源性比对发现该菌株的rDNA-ITS序列与GenBank数据库中Sclerotinia sclerotiorum isolate SS61等3个已记录菌株序列具有100%一致性;采用平板对峙培养法初步筛选获得6株对桑椹核盘菌菌丝生长有较强抑制作用的放线菌,其抑制率达60.0%~80.0%,且供试的11株放线菌对桑椹核盘菌菌核的抑制率达86.4%~100.0%;在化学药剂推荐使用浓度范围,通过室内毒力测定筛选出的25%嘧菌酯、50%啶酰菌胺和10%苯醚甲环唑3种化学药剂对桑椹核盘菌的EC50分别为0.081 mg/L、2.859 mg/L、7.693 mg/L,显示出良好的抑菌作用。上述结果有益于进一步研究桑椹核盘菌菌核病的综合防治技术方案。

柑橘种质对柑橘轮斑病菌的抗性评价

柑橘轮斑病是柑橘上的一种新型真菌性病害,挖掘和培育柑橘抗病品种是防控病害最经济、有效的方法.本研究采用柑橘离体枝条室内人工接种柑橘轮斑病菌的方式建立了柑橘种质抗柑橘轮斑病菌的评价方法,对不同柑橘种质进行抗性评价,并采用病情指数、病斑平均直径和聚类分析等方法对柑橘种质进行抗性分级.3种评价方法均将83个柑橘种质划分为5类:高抗、抗病、中抗、感病和高感,未发现免疫种质;其中有野生金豆、北京柠檬等16个高抗种质,金橘、金堂绿柚等10个感病种质,新会甜橘、立花橘2个高感种质.3种评价方法结果一致性较高.

塔罗科血橙新系炭疽病发生情况调查及防治药剂筛选

塔罗科血橙新系在我国发展面积不断增大,品牌效应已初步显现。川渝地区作为塔罗科血橙新系主产区,炭疽病发生普遍,而相关研究报道鲜少。为弄清炭疽病在塔罗科血橙产区的发生情况,2019—2021年在四川资中、富顺,重庆万州、长寿等11个市、县、区,采集样品239份进行病原检测,并开展了田间药效试验。结果表明:1)在239份样品中,151份样品感染了炭疽病,检出率为63.18%,其中有89份表现为强致病性,发病较为普遍;2)炭疽病主要为害叶片,田间发病程度整体较轻;3)发病率最低为重庆开州的44.83%,最高为重庆万州的90.24%,可能与塔罗科血橙主产区县处于三峡库区的高温高湿、寡日照气候有关。4)炭疽病引起的采后贮藏病害不容小视,田间药效试验结果显示,6月中旬、6月底、7月中旬及采前20 d,使用25%咪鲜胺乳油2000~3000倍液+97%矿物油150~200倍液各防治一次,不仅可有效防治田间炭疽病害,还可明显减轻采后炭疽病的发病率,可推广使用。

五种药剂对果桑椹瘿蚊的田间防效初报

近年来,椹瘿蚊在我国不同果桑种植区普遍发生。为筛选防治椹瘿蚊的高效低毒药剂,本试验选用5种杀虫剂,采用喷雾法进行果桑椹瘿蚊的田间防治,调查不同药剂对椹瘿蚊的防效。结果表明,吡虫啉、噻虫嗪、灭蝇胺对椹瘿蚊具有较高的田间防效;果桑生产中建议使用10%吡虫啉可湿性粉剂2 000~2 500倍液、25%噻虫嗪水分散粒剂1 500~2 500倍液、80%灭蝇胺水分散粒剂1 500倍液防治椹瘿蚊。

柑桔鳞皮病研究进展

由柑桔鳞皮病毒(Citrus psorosis virus,CPsV)引起的柑桔鳞皮病是一种全球范围的毁灭性柑桔病害,国内少有报道。随着国内外柑桔繁殖材料交流的加快,柑桔鳞皮病在我国暴发的风险逐渐增加。对柑桔鳞皮病发生分布、类型、传播方式、检测技术和防治方法的研究进展进行了综述,以期为今后我国对柑桔鳞皮病的监测和防治提供参考。

苹果茎沟病毒柑橘碎叶株系的分布与序列分析

为明确苹果茎沟病毒(apple stem grooving virus,ASGV)柑橘碎叶株系(citrus tatter leaf virus,CTLV)在中国柑橘产区的发生分布及其分子特性,于2017—2021年对我国12个柑橘主产区开展系统调查,并采用多重比对以及系统发育分析法对CTLV的全序列进行分析。结果表明,从12个柑橘主产区采集的2012份疑似样品中检测出413份感CTLV阳性样品。除陕西省外,其余11个柑橘主产区样品中均检测出CTLV,并且柚类样品中CTLV的检出率最高,达到32.31%。对分离获得的22株CTLV毒株和已知的7株CTLV以及5株ASGV毒株进行全序列分析,发现所有34株毒株的核苷酸序列相似性为78.6%~99.8%,且CTLV序列的保守性较高。此外,与其他4株ASGV毒株相比,本研究中22株CTLV毒株与ASGV-MK毒株(GenBank登录号为MZ127820.1)具有更近的亲缘关系。推测CTLV中国毒株间的亲缘关系可能与其采样地和寄主品种有关。