靶向Atg5的siRNAs促进肝癌细胞HCC-LM3失巢凋亡的实验研究

目的研究靶向自噬相关基因5(Atg5)的小干扰RNA(siRNAs)能否诱导肝癌细胞的失巢凋亡,探讨细胞自噬是否参与肝癌细胞的失巢凋亡抵抗。方法选择高、低转移潜能的肝癌细胞HCC-LM3、SMMC-7721及人胚肝细胞LO_2,采用流式细胞术检测细胞在失巢培养状态下的凋亡率,采用蛋白质印迹(Western blotting)检测细胞Atg5蛋白表达。针对Atg5的siRNAs,采用脂质体转染法转染至高转移潜能的HCC-LM3肝癌细胞,利用Western blotting检测Atg5蛋白表达变化。在失巢状态下培养转染Atg5 siRNAs的肝癌细胞HCC-LM3,流式细胞术检测肝癌细胞的失巢凋亡率,Western blotting检测肝癌细胞中自噬小体膜蛋白LC3Ⅰ、Ⅱ型蛋白表达转变验证细胞自噬水平的变化。结果失巢培养后,HCC-LM3、SMMC-7721细胞失巢凋亡率明显低于人胚肝细胞LO_2,差异均有统计学意义(P<0.05);而在两组肿瘤细胞中,HCC-LM3细胞的失巢凋亡率低于SMMC-7721细胞,差异有统计学意义(P<0.05)。失巢培养后,HCC-LM3及SMMC-7721细胞LC3Ⅱ型蛋白表达均较LO_2细胞明显增加,差异均有统计学意义(P<0.05)。转染Atg5 siRNA1和siRNA2的肝癌HCC-LM3细胞中,Atg5蛋白的表达均明显低于阴性对照HCC-LM3-NC,差异均有统计学意义(P<0.05)。细胞中LC3Ⅱ型蛋白表达较阴性对照HCC-LM3-NC细胞明显减少,差异有统计学意义(P<0.05)。失巢凋亡率较阴性对照HCC-LM3-NC细胞明显增加,差异有统计学意义(P<0.05)。结论靶向Atg5的siRNAs能抑制肝癌细胞Atg5蛋白表达,并通过下调自噬水平来诱导肝癌细胞的失巢凋亡。

莫沙必利联合前列地尔治疗糖尿病胃轻瘫的临床观察

目的探讨莫沙必利联合前列地尔治疗糖尿病胃轻瘫(DGP)的疗效。方法选取该院2009年1月至2012年7月消化内分泌科明确诊断为DGP的患者75例,随机分为观察组(35例)和对照组(40例),观察组患者给予莫沙必利联合前列地尔治疗,对照组患者给予多潘立酮治疗,观察两组临床症状疗效,比较随访3、6个月的复发率。结果治疗后观察组总有效率[88.57%(31/35)]高于对照组[67.50(27/40)],3、6个月复发率均低于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论莫沙必利联合前列地尔是DGP治疗的有效方法,值得临床应用。