重庆市大足区中药资源现状调查研究

采用第四次全国中药资源普查调查方法,对重庆市大足区中药资源进行实地调查,结果发现药用植物369种,隶属113科;市级重点物种75种,其中野生药材53种,栽培药材15种,野生栽培皆有的药材7种。此次调查摸清了大足区中药资源分布、种类、数量等家底,为这些中药资源的合理开发与产业发展提供了研究基础。

重庆市城口县药用植物资源调查研究

采用第四次全国中药资源普查中野生重点中药资源调查方法——样方调查法,记录品种种类、数量,采集标本及药材,重点品种测量单株重,统计不同代表区域、植被类型、海拔的样方数,普查共记录药用植物品种703种,重点品种143种,占重庆市重点品种的74.5%,隶属于71科,132属,野生重点品种128种,栽培重点品种30种(包括15种既有野生也有栽培),其中14种中药材得到大规模栽培。通过此次普查有助于了解城口县重点药用植物分布情况、生长环境和资源蕴藏量,为中药资源持续发展提供参考。

重庆市秀山县药用植物调查

秀山土家族苗族自治县,位于重庆市东南部,武陵山脉中段。此次药用植物调查,可摸清秀山县药用植物资源分布情况,为中药资源可持续发展提供参考。采用样方调查法,开展野外实地调查,记录品种种类、数量等信息,采集标本及药材,重点物种测量单株重以计算样方内蕴藏量。结果表明,秀山县普查共记录药用植物物种410种,分属133科312属,其中菊科最多为30种,最大的属为蓼属,有9种;调查记录重点品种93种,分属55科90属,以唇形科最多,为7种;千里光、杠板归等重点物种的蕴藏量相对较高;调查还发现南方红豆杉、水杉等10种国家重点保护野生植物,5种国家重点保护野生中药。本次调查结果与武陵山地区药用植物资源调查结果基本一致;秀山县中药资源丰富,但生态环境的变化导致野生药用植物物种数量大为减少,应加强中药资源保护,促进生态恢复,同时充分利用当地药用植物资源特色优势,开发新的现代药物制剂,促进中药产业可持续发展。

濒危藏药材甘青青兰野生资源的调查研究

目的:全面调查西藏中南部野生甘青青兰资源的分布及生存现状,为甘青青兰野生资源的保护及后续人工栽培甘青青兰提出指导性建议。方法:依据全国第四次中药资源普查技术方案,对西藏中南部17个区县开展甘青青兰资源调查。结果:在调查涉及的17个区县中,有13个区县均发现有野生分布。所采样品均为甘青青兰(原变种),没有矮生变种分布。甘青青兰居群分布的植被类型主要分为灌丛型、草地型、流石滩型三类,主要伴生植物共鉴定出39科94种;灌丛型和草地型居群的共有伴生物种较多;草地型居群的物种多样性及出现频率最高。甘青青兰生境主要为农田周边荒地或田埂、河谷坡地、村庄周边坡地,其野生分布点多位于坡度较为陡峭的下坡位置,坡向以东西向的半阳坡为主。结论:甘青青兰在西藏中南部的分布范围虽较广但资源量较少,建议加强野生甘青青兰资源的保护,深入开展甘青青兰人工栽培关键技术的研究。

藏药鼠麴草的质量评价研究

目的:评价鼠麴草(Gnaphalium affine D.Don)的质量。方法:采用TLC法进行定性鉴别,按2020年版《中华人民共和国药典》四部通则方法测定水分、总灰分、酸不溶性灰分和浸出物含有量,通过HPLC法测定木犀草素和芹菜素的含有量。采用SPSS 20.0软件对23批鼠麴草进行聚类分析和主成分分析。结果:TLC斑点清晰,分离度好。23批样品水分、总灰分、酸不溶性灰分和浸出物含有量分别为7.83%~10.70%、5.95%~17.11%、0.83%~9.40%和8.87%~27.43%。木犀草素和芹菜素分别在0.7~374.5μg/mL(r=0.9999)和0.4~195.5μg/mL(r=0.9994)范围内线性关系良好,平均加样回收率分别为98.95%(RSD=1.94%)和97.18%(RSD=3.46%)。西藏地区的样品被聚为一类,其他地区样品分布离散,分类结果与地域有关。结论:该方法稳定可靠,可用于鼠麴草的质量评价。

基于地方文献的重庆石斛考

以不同时期的地方志、文史资料等地方文献为主,古代本草为辅,结合实地调查,对重庆石斛资源分布及应用历史进行考证。结果表明,重庆系石斛道地产区,有16部地方文献对石斛有相关记载,并以民国《巴县志》和《石柱县医药志》记载最为详细;原植物主要有石斛Dendrobium nobile Lindl.,分布在巴南、大足、江津、合川等渝中和渝西地区;也有少数的细茎石斛Dendrobium moniliforme(L.)Sw.、广东石斛Dendrobium wilsonii Rolfe和曲茎石斛Dendrobium flexicaule Z.H.Tsi,S.C.Cum et L.G.Xu等,主要分布在石柱、万州、云阳、黔江等渝东一带,在解放前曾大量采集、加工和应用。由于过度采集,重庆石斛资源已处于濒危状态,亟待保护,应积极探索野生资源的引种驯化和仿生栽培,以实现资源的可持续利用。

武陵山山脉(渝黔地区)药用植物资源调查研究

采取文献调查、野外调查、标本鉴定等方法,对武陵山山脉(渝黔地区)药用植物的资源现状进行了调查研究,结果表明武陵山山脉共有药用植物261科、1211属、3607种(含变种,亚种,变型)。本文对其种类组成、分布等进行了统计分析,对其中的珍稀药用植物和民间习用药物作了简要介绍,并对其开发利用提出了建议。

重庆黄连种植土壤中酚酸类物质累积与消减规律的研究

目的:建立黄连种植土壤中酚酸类物质的分析方法,探索其累积与消减规律。方法:采用Fe Cl3-K3[Fe(CN)6]比色法测定黄连种植土壤中总酚酸的含量,采用HPLC法测定黄连种植基地土壤中阿魏酸的含量。结果:测得黄连种植基地土壤中总酚酸含量约0.545-2.026 mg·100g-1在范围内,阿魏酸含量在0.139-0.652μg·100g-1范围内。结论:黄连种植土壤中酚酸含量变化规律明显,栽培过程中随黄连生长年限的增加,连地土壤中总酚酸与阿魏酸的含量均表现为增加,采收黄连后的休地过程中,土壤中总酚酸与阿魏酸的含量均呈现递减趋势,该变化趋势可为黄连连作障碍研究机制与解决方法研究提供了参考。

西藏类乌齐县野生藏药植物资源多样性及其保护利用

为摸清类乌齐县野生藏药植物资源,为野生藏药植物资源的保护、开发利用和系统研究提供科学依据。本研究根据类乌齐县植被情况,结合藏医院藏药专家野外采集经验,采用样线调查法,记录出现的野生植物信息,并采集当地常用藏药植物标本。结果表明:类乌齐县共有野生植物56科170属332种,单种及寡种科属比例较高,总体分化趋势较弱;生活型主要为草本类型,占比高达87.65%,而草本类型中又以多年生草本为主;北温带分布及其变型为其属的主要分布区类型,占比48.82%;主要保护名录共收录保护及受威胁物种17种,收录于《红色名录》的中国特有种116种,占其总收录品种比例高达42.49%;省级新分布(西藏新分布),共有8科10种。在采集的221种野生藏药基源植物中,入药部位为全草的数量最多,占比35.83%;药用功效为清热类的占比56.11%,远大于其余类别。

四川野生铁皮石斛株丛时空格局的动态演化

目的:阐释自然环境下野生铁皮石斛株丛时空格局及生活史特征,为铁皮石斛原地保护、回归保育和仿野生栽培提供参考。方法:以四川省石棉县收集的114丛野生株丛为研究材料,比较不同等级株丛生长情况差异,并对可明确辨别丛龄的74个实生小株丛合轴生长及花序柄(或花序柄痕)残留情况进行观察,探讨野生铁皮石斛株丛时空格局及生活史特征。结果:野生铁皮石斛假鳞茎茎节数、茎长、株丛根数、根长和根粗随假鳞茎数量增加而增加,但茎粗无明显变化规律;实生小株丛的第一年茎(种子萌发茎)和第二年茎(分蘖茎)生长缓慢、短小,完成由种子到种子的生活史周期约需4年或更长;高位腋芽较少,高芽繁殖并非该野生铁皮石斛居群的主要繁殖方式,其通过合轴生长的分蘖繁殖扩大株丛并实施有性繁殖,株丛生长到一定阶段开始衰退。结论:四川省石棉县有野生铁皮石斛分布。株丛调查表明,野生铁皮石斛主要通过种子萌发的实生苗及分蘖繁殖实现种群更新。建议利用铁皮石斛果实里种子数量大的优势积极开展原生境播种和回归保育,对川产石斛资源发掘(含文化挖掘)、保护及可持续利用进行了探讨。

渝产不同品系药用菊花品质的研究

为比较不同单株菊花的质量,高效、科学地评价菊花品质,便于后续开展菊花品种选育工作,本研究以绿原酸、木犀草苷为内标物,建立了一测多评方法。随后,测定了渝产药用菊花6个品系61个不同单株菊花的有机酸类和黄酮类成分含量,并依据药典方法测定了水分和总灰分。采用主成分分析和聚类分析确定了高有机酸和黄酮含量的3个优良单株,即阳菊品系(yj-2-4、yj-3-7、yj-6-15)。本研究为菊花单株质量评价提供了高效、便捷、准确和可行的方法,为菊花选育研究提供了数据、理论支持。

蟾蜍TNFRSF11b、TNFRSF9基因克隆及生物信息学分析

目的:克隆中华蟾蜍肿瘤坏死因子受体超家族(TNFRSF)BbgTNFRSF11b、BbgTNFRSF9基因的全长序列,并分析其序列特征。方法:根据转录组测序所得的TNFRSF11b、TNFRSF9基因片段设计特异性引物,以中华蟾蜍蟾皮为材料,利用逆转录聚合酶链式反应(PCR)技术获得BbgTNFRSF11b、BbgTNFRSF9基因全长互补脱氧核糖核酸(cDNA)序列,并采用生物信息学手段分析其序列特征,通过实时荧光定量PCR方法检测BbgTNFRSF11b、BbgTNFRSF9基因在中华蟾蜍7种组织/器官中的表达情况。结果:克隆获得蟾蜍BbgTNFRSF11b基因的全长cDNA序列为1233bp,编码410个氨基酸,理论相对分子质量为46.97kDa,等电点为8.64,不存在跨膜区及信号肽,为亲水性蛋白,具有多个磷酸化位点。BbgTNFRSF9基因的全长cDNA序列为829bp,编码247个氨基酸,理论相对分子质量为67.874kDa,理论等电点为5.12,存在信号肽,为疏水性蛋白,具有多个磷酸化位点,进化树分析发现BbgTNFRSF11b、BbgTNFRSF9基因与其他动物TNFRSF11b、TNFRSF9基因相似度不高,表明该基因虽有特殊结构域但不同物种间差异较大。组织表达分析显示,BbgTNFRSF11b、BbgTNFRSF9基因在耳后腺中表达显著高于其他部位。结论:成功获得蟾蜍BbgTNFRSF11b、BbgTNFRSF9基因序列,掌握其序列特征,为后续深入研究该蛋白的功能提供参考。

不同产地15个品种淫羊藿的质量评价

目的评价不同产地15个品种淫羊藿Epimedii Folium的质量。方法采用UPLC-MS/MS法,测定淫羊藿苷、淫羊藿次苷Ⅰ、淫羊藿次苷Ⅱ、朝藿定A、朝藿定B、朝藿定C、箭藿苷A、箭藿苷B、鼠李糖基淫羊藿次苷Ⅱ、宝藿苷Ⅱ的含有量。淫羊藿40%乙醇提取液的分析采用Phenomenex C18色谱柱(50 mm×2.1 mm,3μm);以0.1%甲酸-乙腈为流动相,梯度洗脱;体积流量0.2 m L/min;柱温40℃。再进行主成分分析。结果 10种成分在各自范围内线性关系良好(r>0.999 0),平均加样回收率97.6%~104.5%,RSD 1.37%~2.93%。46批样品中朝藿定C含有量最高,朝藿定A次之,淫羊藿次苷Ⅰ最低。小花、大花品种中各成分含有量有明显差异。结论该方法灵敏快速,可为淫羊藿开发利用提供依据。

连作对玄参产量和根际土壤肥力及酶活性的影响

目的:研究连作对玄参产量、根际土壤肥力及土壤酶活性的影响。方法:采用单因素随机区组试验设计方法。结果:连作对玄参病情指数、烂根率、药材及子芽产量有显著影响,连作年限越长影响越严重;连作可降低玄参根际土多酚氧化酶和酸性磷酸酶活性,对过氧化氢酶、蔗糖酶、脲酶、酸性蛋白酶和纤维素酶的活性没有显著影响;连作也没有对玄参根际土的全氮、全磷、全钾、碱解氮、速效磷、速效钾、pH值和有机质有显著影响。结论:连作会严重影响玄参的生长,造成死苗、烂根等,但是没有影响到玄参根际土的营养平衡,多酚氧化酶和酸性磷酸酶可能是影响玄参产生连作障碍的关键性酶,连作对其他土壤酶活性影响不显著。

藏药菥蓂中黑芥子苷对黄嘌呤致小鼠高尿酸作用的研究

采用黄嘌呤致小鼠高尿酸模型,将昆明种小鼠随机分为模型组、空白对照组、阳性组、未灭活水提液(WMHSTY)组、灭活水提液(MHSTY)组、醇提液(CTY)组和水提醇沉浓缩液(STCCNSY)组并分别给药,以提取液对尿酸降低程度与提取液中黑芥子苷含量的关系阐明黑芥子苷与菥蓂治疗痛风作用的关系。结果,MHSTY和WMHSTY对黄嘌呤致小鼠高尿酸模型有显著的降低尿酸作用,两者间无明显差异,但黑芥子苷含量差异显著;CTY中黑芥子苷含量最高,但对本模型无明显作用;STCCNSY中无法检测出黑芥子苷,但对本模型有极显著作用。表明,藏药菥蓂中黑芥子苷的含量与菥蓂对黄嘌呤致小鼠高尿酸模型的作用无明显关系。

基于UPLC-MS/MS法研究淫羊藿属植物品种品质与生长海拔、植物类群间关系

应用UPLC-MS/MS法对10种淫羊藿属植物主成分含量差异进行比较研究,以探讨药材品种品质与生长海拔、植物类群间联系。采用Phenomenex-C18柱(50 mm×2.1 mm,3μm),以乙腈-0.1%甲酸水为流动相梯度洗脱,流速为0.2 m L/min;质谱离子源为ESI,多反应监测正离子模式进行检测。淫羊藿苷、朝藿定A、朝藿定B、朝藿定C分别在0.995~9950.000、0.992~9920.000、1.021~10210.000、1.035~10350.000 ng/m L浓度范围内显示出良好的线性关系(r≥0.9996),平均加样回收率为98.7%~101.2%,RSD为1.7%~2.4%;结果表明,不同品种淫羊藿主成分含量差异较大,且含量有随海拔升高而降低的趋势,小花类群各成分含量均明显高于大花。本研究证明了品种品质与生长海拔、植物类群间具有相关性;该方法准确、快速、灵敏度高,适用于淫羊藿药材的质量控制。

基于UPLC-Q-TOF-MS法分析江西虫草化学成分

目的:应用超高效液相色谱-四级杆串联飞行时间质谱法(UPLC-Q-TOF-MS)对江西虫草提取物的主要化学成分进行定性研究。方法:采用Agilent SB-C_(18)(50 mm×4.6 mm,1.8μm)色谱柱,以0.1%甲酸水(A)-乙腈(B)溶液为流动相,梯度洗脱,流速为0.25 mL/min,柱温为30℃;质谱分析采用信息关联模式(IDA)正、负离子分别采集。结果:应用Peak View软件的Formula Finder等功能以及各色谱峰的质谱数据与数据库匹配结合各色谱峰的二级碎片裂解规律,从江西虫草中共鉴定出29个化合物,其中12个化学成分为虫草中首次报道;其主要化学成分包括生物碱、甾醇、糖苷、核苷、氨基酸等。结论:该方法精确、可靠、高效,适用于江西虫草成分的快速鉴定,为江西虫草的开发利用以及阐明其药效物质基础提供参考。

多指标评价技术研究不同产地野马追药材质量

目的:评价不同产地野马追药材的质量,为野马追药材的选择提供依据。方法:采用高效液相色谱法、UV法测定野马追中相关化学成分,以金丝桃苷、槲皮素、山柰素含量及降血脂活性为评价指标,对野马追品质进行综合评价。结果:产地不同的野马追药材,样品中金丝桃苷、槲皮素、山柰素、总生物碱含量有较大差异,降脂活性存在显著差异。结论:评价野马追药材的品质,应考虑药材的产地、来源。采用多成分、多指标的评价技术体系,为野马追药材的选择、质量控制及种植提供了参考依据。

HPLC-DAD同时测定太白贝母中9种核苷类成分的含量

目的：建立同时测定太白贝母中尿嘧啶、胞苷、尿苷、胞腺嘧啶、腺嘌呤、肌苷、鸟苷、胸苷和腺苷9种核苷类成分的HPLC-DAD方法。方法：采用Gemini C18色谱柱（250 mm×4.6 mm,5μm）;流动相为水-甲醇,梯度洗脱;DAD检测器检测波长260 nm;流速1.0 m L/min;柱温25℃。结果：尿嘧啶、胞苷、尿苷、胸腺嘧啶、腺嘌呤、肌苷、鸟苷、胸苷、腺苷的线性范围分别为35.6～534 mg/m L、45.2～678 mg/m L、62.1～930 mg/m L、43.2～648 mg/m L、250.2～750 mg/m L、105.3～1 575 mg/m L、206.6～3 099 mg/m L、211.2～3 168 mg/m L、52.6～789 mg/m L,平均加样回收率为97.83%～103.62%,RSD为0.56%～3.22%。不同产地太白贝母样品的9种核苷类成分含量差异较大,其中尿苷、鸟苷含量较高,含量分别为1.41～2.92 mg/g和2.98～7.11 mg/g。结论：该文所建立的方法操作简便,重复性好,准确可靠,可用作太白贝母中9种核苷类成分的含量测定,为太白贝母药材的深度开发提供了研究基础。

黄连不同部位有效成分及生物量变化规律研究

以3～5年生黄连(味连)样品为实验材料,测定不同时期黄连植株各部位生物量及其药根碱、非洲防己碱、表小檗碱、黄连碱、巴马汀和小檗碱的含量,分析了黄连植株不同部位生物量和有效成分动态变化规律。结果表明,黄连根茎、须根和叶生物量的变化遵循一定的规律。随着生长年限的增加,根茎生物量不断积累,所占整个植株比重不断增大,五年生黄连根茎生物量达到总生物量的54.06%～65.28%。黄连须根与叶生物量变化规律一致,占总生物量比例均在逐年减少。黄连叶片和叶柄中6种生物碱要比根茎和须根中的生物碱含量低。叶片与叶柄中的总碱含量在1.71%～2.47%间,须根在4.18%～5.51%,根茎在10.17%～14.35%。除药根碱外,其它生物碱在根茎中的含量比在须根中高。除小檗碱外,各生物碱及总碱含量在叶柄和叶片中以三年生黄连较高。在须根和根茎中,主要是以四年生和五年生黄连中生物碱含量较高。