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柑桔溃疡病菌实时荧光定量PCR检测与应用 被引量:26
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作者 殷幼平 黄冠军 +2 位作者 赵云 刘洪 王中康 《植物保护学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第6期607-613,共7页
根据地毯草黄单孢Xac306菌株(Xanthomonas axonopodis pv.citri,Xac 306)已知全基因组中独有蛋白基因序列设计的特异性引物对和探针,建立并优化SYBR Green I(SGI)荧光染料和TaqMan探针实时荧光定量PCR检测体系,用于柑桔溃疡病早... 根据地毯草黄单孢Xac306菌株(Xanthomonas axonopodis pv.citri,Xac 306)已知全基因组中独有蛋白基因序列设计的特异性引物对和探针,建立并优化SYBR Green I(SGI)荧光染料和TaqMan探针实时荧光定量PCR检测体系,用于柑桔溃疡病早期诊断鉴定。结果表明,建立的两种定量PCR体系均能特异地检出Xac的细胞和其基因组DNA,而对其它测试的植物病原菌和柑桔表面的腐生黄单孢菌都不能检出。SGI法和TaqMan探针法对Xac细菌悬浮液的检测灵敏度均可达到1~5个细菌/反应,对Xac靶标片段DNA的检测灵敏度可达1fg/μL。两种定量PCR检测方法比常规PCR灵敏度高2~3个数量级。对田间采集的328个柑桔显症、疑似症状和无症带菌材料富集培养样品进行了实际检测,结果表明,实时荧光PCR适合柑桔无症带菌样品的早期检测。 展开更多
关键词 柑桔溃疡病菌 定量PCR 荧光染料 TAQMAN探针 检测
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