DEC-205靶向的肝素酶CD4^+CD8^+T细胞表位肽纳米颗粒疫苗的抗肿瘤免疫效应研究

目的探索肝素酶CD4^+CD8^+T细胞表位肽纳米颗粒疫苗诱导CTL抗肿瘤免疫反应的可行性,并研究其抗肿瘤免疫杀伤效应。方法根据文献报道方法制备肝素酶表位肽纳米颗粒疫苗;采用流式细胞术检测DEC-205靶向的肝素酶表位纳米颗粒疫苗与树突状细胞(DC)的结合力及入胞效率;采用标准4h^(51)Cr释放实验检测负载DEC-205靶向的肝素酶纳米颗粒疫苗诱导的效应细胞对胃癌及结肠癌细胞的杀伤效率;采用ELISA CD4^+CD8^+T细胞表位DEC-205靶向纳米颗粒疫苗,其颗粒直径为(208±15.3)nm,Zeta电位为(-28.8±2.5)mV;纳米颗粒对多肽的封包率为(22±3.6)%。纳米颗粒疫苗可与树突状细胞有效结合,并可以有效进入树突状细胞内,这种结合和内吞作用随着加入的纳米颗粒的浓度增加而增加。体外杀伤实验结果显示,在效靶比为80∶1时CD4^+CD8^+表位肽纳米颗粒疫苗诱导的效应细胞对肿瘤细胞的杀伤效率可达70%,与单用CD8^+表位肽相比具有统计学意义(P<0.01);T细胞增殖实验结果提示,CD4^+CD8^+表位肽组细胞的细胞增殖率显著高于单独使用CD8+表位肽组,细胞因子检测结果提示CD^4+CD8^+表位肽组细胞培养上清中IL-2、IL-12、IFN-γ浓度显著高于单独使用CD8^+表位肽组(P<0.01)。结论采用DEC-205靶向PLGA颗粒包裹CD4^+CD8^+表位肽能够更加有效递送抗原信息,能更加有效地诱导CTL反应杀伤肿瘤细胞,本研究为TAA为基础的肿瘤免疫治疗提供一种新的方式。