山茶花中多酚提取的方法及其抗氧化活性测定研究

以山茶花为试材,采用有机溶剂法和大孔树脂吸附法提取茶多酚,研究比较了2种提取方法的多酚得率及纯度,测定其清除1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(DPPH)、对羟自由基(.OH)、抗超氧阴离子(O2.)和总抗氧化能力,为山茶多酚抗氧化活性物的鉴定和综合利用提供参考。结果表明:大孔树脂吸附法提取多酚(89.34%)纯度比有机溶剂提取多酚(72.28%)纯度好。以大孔树脂吸附法提取的茶多酚做抗氧化活性试验表明,茶多酚对DPPH的最大清除率达到92.86%,对.OH的最大清除率为90.77%,对O2.的最大清除率仅为47.79%,0.5mg/mL茶多酚的总抗氧化能力为17.35U/mg。

抗蛇毒IgY对尖吻蝮(Deinagkistrodon acutus)蛇毒主要活性的中和作用研究

目的评价抗尖吻蝮蛇(D.acutus)毒Ig Y对该蛇毒主要活性的中和能力。方法通过不同浓度Ig Y与该蛇毒混合孵育后,再用生化方法检测该蛇毒的多种活性。结果体外实验表明,Ig Y能明显地中和该蛇毒的PLA_2、5'-核苷酸酶、透明质酸酶、金属蛋白酶和丝氨酸蛋白酶(纤维蛋白酶)等酶活性;小鼠实验表明,Ig Y对小鼠的半有效保护剂量(ED_(50))为1 131.09μg。结论该抗尖吻蝮蛇毒Ig Y具有很好的中和活性,且Ig Y无明显的毒性。

养殖丁肝胰脏淀粉酶活性的初步研究

[目的]研究养殖丁(Tinca tinca L.)肝胰脏淀粉酶的基本性质。[方法]采用酶学分析方法研究丁肝胰脏淀粉酶的pH、温度、底物浓度、缓冲液及8种金属离子对其肝胰脏淀粉酶活性影响。[结果]淀粉酶最适pH为7.5,最适温度44℃,最适底物浓度0.4%,最适缓冲液为0.2 mol/L Tris-HCl缓冲液。在设定浓度范围内(10～50 mmol/L),K+、Na+对淀粉酶活力影响具有促进作用;Ca2+、Mg2+对淀粉酶活力也有促进作用;Fe3+在低浓度(10 mmol/L)表现为促进,高浓度(20～50 mmol/L)表现为抑制作用;Al3+、Pb2+、Ag+对酶活力具有抑制作用。[结论]结果为丁鱼岁的人工养殖和饲料优化,提供一定的理论依据。

蛇肽保健酒缓解急性疲劳活性的研究

目的研究蛇肽保健酒对小鼠急性疲劳的影响。方法将60只小鼠随机分为6组,分别给予药物灌胃,连续灌胃30天后,分别检测游泳前后小鼠体重变化、一次性力竭游泳时间、游泳后血清尿素氮(BUN)和全血乳酸(LA)的含量。结果蛇肽保健酒对小鼠体重增长无明显影响,能明显延长小鼠负重游泳时间,减少小鼠运动时的乳酸生成。结论蛇肽保健酒能促进运动后小鼠血乳酸的清除,明显降低力竭运动后小鼠血清尿素氮的含量,有一定的抗急性疲劳作用。

沼蛙皮肤分泌物镇痛及抗炎活性研究

目的研究沼蛙皮肤表面分泌物的镇痛及抗炎药理作用。方法以健康小白鼠为试验动物,采用冰醋酸扭体法及甩尾法确认其镇痛效能;采用二甲苯小鼠耳壳炎症的方法研究其抗炎作用。结果沼蛙皮肤分泌物对冰醋酸小鼠扭体反应及小鼠甩尾实验有一定的镇痛作用,并且能有效的抑制二甲苯引起的炎症反应。结论沼蛙皮肤分泌物具有一定的镇痛及抗炎活性,对其活性的深入研究,将有助于开发出新的镇痛抗炎药物。

蛇毒类凝血酶研究进展

对有关蛇毒类凝血酶(SVTLEs)的分布分类、理化性质、酶学性质、结构特征、基因克隆表达、临床应用等方面的研究资料进行了概括和综述。结果发现:SVTLEs主要分布在蝮亚科和蝰科毒蛇的毒液中;根据SVTLEs水解纤维蛋白原释放FPA和FPB的速度不同,可将其分为SVTLE-AB、SVTLE-A和SVTLE-B等3类;多数SVTLEs的分子量在30～50kD,含6个二硫键,pI较低,部分SVTLEs的pI较高;SVTLEs可水解TAME和BAEE,其活性可被DFP和PMSF所抑制,但不被胰蛋白酶trypsin及凝血活性中心His的专一抑制剂TLCK和EDTA抑制;对SVTLEs的一级结构和二级结构研究较多,对高级结构研究有待深入;很多SVTLEs基因在大肠杆菌中成功获得了表达,但表达物不能被糖基化和正确折叠,故没有活性或活性不高,而其在真核表达系统中表达活性较高;部分碳水化合物具有稳定SVTLEs结构及提高SVTLEs的酶活力的作用;SVTLEs的临床应用涉及心肌梗塞、缺血性中风、血栓性疾病等疾病的治疗。SV-TLEs未来的研究重点将集中于其在真核表达系统的表达和对其高级结构的解析。

白唇竹叶青蛇毒5′-核苷酸酶对血小板聚集的影响及其机制研究

目的研究白唇竹叶青蛇毒5′-核苷酸酶对血小板聚集的影响,探讨其作用机制。方法采用比浊法测定白唇竹叶青蛇毒5′-核甘酸酶对二磷酸腺苷(ADP)、花生四烯酸(AA)、血小板活化因子(PAF)诱导血小板聚集的影响。结果白唇竹叶青蛇毒5′-核甘酸酶能抑制ADP、AA、PAF诱导的血小板聚集,且其抑制率与剂量增加成正比;抑制血小板聚集作用与ADP的水解和腺苷的积累有关。结论白唇竹叶青蛇毒5′-核甘酸酶能抑制血小板聚集,抑制作用主要通过水解ADP和积累腺苷,可能与阻断TXA2的生成有关。

草鱼肝胰脏中两种胰蛋白酶的纯化及部分性质的研究

本试验采用硫酸铵分级沉淀和鸡卵类粘蛋白偶联的琼脂糖凝胶亲和层析的方法，从草鱼（Ctenopharyngodon ldellus）肝胰脏中提取胰蛋白酶进行纯化，得到两种酶，即胰蛋白酶A（GTA）和胰蛋白酶B（GTB），并对其性质进行了分析。结果表明，两种酶的SDS—PAGE电泳均呈现出单一条带，表明已得到高度纯化，两种酶分子量约为27Kda。以BANPA为底物．测得草鱼胰蛋白酶ACGTA）的动力学常数（Km）为0．37mM。以TAME为底物测得两种胰蛋白酶最适反应温度为60℃，最适反应pH值为8．0，当温度超过60℃，它们不稳定，这两种胰蛋白酶在pH值9．0—11．0时较稳定。

粪肠球菌EF608饲喂小鼠的安全性研究

目的研究本实验室发现的新型菌株——粪肠球菌EF608(Enterococcus faecalis EF608)的安全性,为进一步开发提供实验依据。方法经腹腔注射和口腔灌胃两种途径给小鼠粪肠球菌EF608菌株,试验其安全性。结果灌胃组与腹腔注射组,小鼠均健康存活,体重均有增加;小鼠脏器无明显变化,脏器系数与各自对照组比较均无显著差异(P>0.05)。结论粪肠球菌EF608菌株对小鼠安全无毒。

产纤溶酶菌株粪肠球菌EF608液体发酵工艺优化研究

以本实验室筛选到产纤溶酶的粪肠球菌EF608为发酵菌株,通过研究得到该菌株产纤溶酶的最佳工艺条件为:葡萄糖2%,蛋白胨0.75%,牛肉膏0.75%,酵母提取物0.5%,K2HPO4·3H2O1%,NaCl0.2%,MgSO4·7H2O0.02%,初始pH7.5,接种量为6%,装液量为15%,37℃培养10h,发酵液纤溶酶活性达到1833IU/mL。

温度和pH值对泥鳅肠道消化酶活性的影响

测定了不同温度及不同pH条件下泥鳅（Misgurnus anguillicaudatus）肠道中蛋白酶、淀粉酶和脂肪酶的活性。结果表明，随温度、pH的升高，三种酶活性的变化均表现为先增高后降低。蛋白酶、淀粉酶、脂肪酶的最适温度分别为50℃、50℃、40℃，最适pH分别为7．0、7．0、7．5。

温度、pH对泥鳅肠道消化酶活性的影响

以泥鳅(Misgurnus anguillicaudatus)为研究材料,测定不同温度及不同pH条件下肠道中蛋白酶、淀粉酶和脂肪酶的活性。结果表明,随温度、pH值的升高,三种酶活性的变化均表现为先增高后降低。蛋白酶、淀粉酶、脂肪酶的最适温度分别为50℃、50℃、40℃,最适pH值分别为7.0、7.0、7.5。

温度、pH值对团头鲂肝胰脏主要消化酶活性的影响

蛋白酶、淀粉酶和脂肪酶的活性直接影响动物对食物的消化作用。通过设置不同的pH和反应温度,来确定团头鲂蛋白酶、淀粉酶和脂肪酶的最适活性。结果表明,在不同温度条件下,测定团头鲂淀粉酶、脂肪酶和蛋白酶的最适温度为50℃、50℃和40℃。团头鲂淀粉酶、脂肪酶和蛋白酶最适pH分别为7.0,5.5和7.2。

眼镜蛇属(Naja)毒液的主要功能组分研究进展

眼镜蛇属(Naja)的毒蛇常危害人类健康,其毒是一种混合毒素,主要成分为蛋白质、活性肽、酶。本文主要对眼镜蛇属蛇毒主要功能组分及其理化性质、药理活性与临床应用前景进行综述。

胰蛋白酶改性的研究现状和展望

近年来,随着蛋白酶改性研究的不断进步,试图提高胰蛋白酶稳定性的有关研究也取得了长足发展。综述了目前国内外关于胰蛋白酶的固定技术和大分子修饰技术的研究现状,并提出了通过定点改造和体外定向进化技术提高胰蛋白酶稳定性的可能。

胰蛋白酶改性的研究现状和展望

近年来,随着蛋白酶改性研究的不断进步,试图提高胰蛋白酶稳定性的有关研究也取得了长足的发展。本文综述了目前国内外关于胰蛋白酶的固定技术和大分子修饰技术的研究现状,并提出了通过定点改造和体外定向进化技术提高胰蛋白酶稳定性的可能。

河道整治对水质及浮游生物群落特征的影响——以重庆市大足区窟窿河三驱镇段为例

【目的】调查进行综合治理后的重庆市大足区窟窿河三驱镇河段水质状况。【方法】于2015年11月对该河段中浮游生物指示种、多样性、群落结构及水质理化参数进行了调查。【结果】窟窿河三驱镇段共有浮游植物8门84属174种(含变种)、浮游动物3门25属33种。河段上、下游生物群落结构差异较大。浮游植物密度在上游两个采样点分别为1.35×107,1.58×107个·L^(-1),在下游采样点仅为4.3×106个·L^(-1);浮游动物密度在上游两个采样点分别为3.96×103,5.20×103个·L^(-1),在下游采样点则降至3.20×103个·L^(-1)。指示型为多污、中污带的3种隐藻即尖尾蓝隐藻(Chroomonas acuta)、啮蚀隐藻(Cryptomonas erosa)和卵形隐藻(Cryptomonas ovata)在河段上游为绝对优势种,而在下游仅少量发现,且优势种中的中污、寡污带指示种数量增多,暗示窟窿河水质有所好转。【结论】综合ShannonWeiner多样性指数、Margalef丰富度指数和Pielou均匀度指数的结果可知,经过治理后的河段浮游植物的丰富度与群落稳定性有所提高。综合营养状态指数的结果显示,研究河段水质由上游的中度/重度富营养状态向下游轻度富营养级转变。研究结果表明河道整治工程对研究河段水质有明显的改善作用。

微生物源纤溶酶的研究进展

溶栓疗法是目前用于治疗血栓性疾病安全可靠并且有效的方法,采用传统的溶栓药物在治疗血栓病上已经取得了显著的成绩,但还是存在着一定的缺陷,所以应用也受限制。目前,利用微生物发酵产生的纤溶酶制成新型的溶栓药物已成为研究热点。本文对从不同微生物中所提取和纯化的纤溶酶的理化性质、结构特征、生物学活性及开发现状等方面的研究资料进行了全面系统的归纳总结。结果发现,早期研究和发现的链激酶与葡激酶,已通过临床试验用于血栓性疾病,其效果稳定可靠;前期深入研究的芽孢杆菌及链霉菌来源的纤溶酶,其理化性质与酶学活性都已被研究清楚,其中多种纤溶酶已被尝试用于制备新型溶栓药;近期发现的粪链球菌、海洋假单胞菌、白色假丝酵母菌、镰孢菌、米曲霉菌、藤黄微球菌、黄绿蜜环菌等等,所产生的纤溶酶也为新型溶栓药的开发提供了更多的可用之材。随着更为广泛和深入的研究,自然界中的大量微生物会为人类制备新型溶栓药提供更多可用的资源。

白唇竹叶青蛇毒5′-核苷酸酶的分离纯化及性质

用DEAE-SephadexA-25、Sephadex-G-100和CM-SephadexC-50三步柱层析分离法,从白唇竹叶青(Trimeresurus albolabris)蛇毒中分离纯化出具有5′-核苷酸酶活性的组分。SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳测定其分子量为48.03kDa,HPLC柱层析图谱为单一峰。该组分是一个糖蛋白,以一磷酸腺苷(AMP)为底物时,其酶活力为330.33μg Pi/(min·mg);而以二磷酸腺苷(ADP)为底物时,其酶活力为123.56μg Pi/(min·mg)。金属离子Zn2+、Fe3+和Cu2+对5′-核苷酸酶活性有显著的抑制作用,EDTA可完全抑制其酶活性。该酶的最适pH为9,最适温度为50℃。该组分还具有抑制由ADP诱导的血小板聚集的生物功能。

小叶三点金醇提物对尖吻蝮蛇毒的抑制作用

研究小叶三点金Desmodium microphyllum醇提物对尖吻蝮蛇Deinagkistrodon acutus蛇毒的抑制作用。将尖吻蝮蛇毒与不同比例小叶三点金醇提物在37℃下孵育30 min,检测对蛇毒中主要酶活力以及体内毒性的抑制作用。小叶三点金醇提物对尖吻蝮蛇毒中蛋白水解酶、磷脂酶A2、透明质酸酶以及纤维蛋白原水解酶均具有明显的抑制作用,对尖吻蝮蛇毒引起的小鼠出血、水肿、组织坏死以及致死毒性具有显著的中和作用,且呈剂量效应关系。首次证实了小叶三点金具有抑制尖吻蝮蛇毒的功效,为小叶三点金在蛇伤治疗中的应用提供了理论依据。