以肠道菌群为靶向的粪菌移植法及其在畜牧业的应用潜能

肠道微生物与宿主机体健康息息相关。粪便微生物移植(又称为粪菌移植,fecal microbiota transplantation,FMT)通过将健康供体粪便中的完整肠道菌群移入肠道微生态失衡的患者胃肠道内,经肠道菌群重构、恢复至正常状态。用FMT治疗某些肠道疾病如复发性艰难梭菌感染、溃疡性结肠炎、肠易激综合症、克罗恩病效果显著,且可能对因肠道菌群紊乱引起的肠道外疾病的治疗有潜在价值。本文主要对FMT技术的发展进程、在疾病上的研究以及在畜牧业上的应用潜能进行综述,并分析其应用的制约因素。

重庆某猪场大肠杆菌血清型鉴定及耐药性监测

为指导重庆某猪场治疗大肠杆菌病,本试验采集猪只粪便样品开展生化特性分析、耐药性监测、血清型鉴定及细菌16S rRNA区的PCR扩增,鉴定所分离菌株的特性。结果表明,所分离21株细菌均为大肠杆菌,其中有3株经硫化氢检测呈阳性;细菌对13种抗生素均有耐药性;存在O_(126)∶K_(71)(B_(16))、O_(112)∶K_(66)两种致病性血清。建议该猪场使用头孢曲松、头孢哌酮、恩诺沙星、环丙沙星来治疗。

猪CRYBB2基因启动子的克隆、活性及转录调控元件分析

旨在初步分析猪CRYBB2的启动子活性以及转录调控元件。利用生物信息学分析、PCR扩增、基因克隆、细胞转染、双荧光素酶活性分析等方法,获得了CRYBB2启动子区域的序列特征,构建了不同片段长度的CRYBB2启动子区的双荧光素酶报告基因载体并分析了其荧光素酶活性,进而确定了CRYBB2的核心启动子区域以及关键的调控区域,最后还预测了关键调控区域的转录因子及其结合位点。结果表明,CRYBB2候选启动子区可能包含4个核心启动子以及1个CpG岛,-52~-3 bp可能为CRYBB2基因的核心启动子区域,-505~-19 bp为CRYBB2基因启动子的关键调控区域,且发挥正向调节作用,而-2060~-505 bp不存在任何对CRYBB2基因启动子活性有影响的调控元件;CRYBB2启动子的关键调控区域包含多个潜在的转录因子结合位点,如TBP、NFIA、FOXP1、NKX2-8、KLF4、Tcf3、Crx、SNAI3、Rfx1和CREB1等。为进一步研究猪CRYBB2的表达机制奠定了基础。

发酵玉米-豆粕型全价饲料对生长猪生长性能、粪便臭味物质和菌群区系的影响

旨在研究发酵全价饲料对生长猪生长性能、粪便臭味物质和肠道菌群的影响,评价发酵全价饲料在生长猪上的应用效果。试验以乳酸菌和地衣芽孢杆菌为发酵菌剂,对全价饲料进行3d厌氧发酵,制备发酵全价饲料。选取体重22kg左右的生长猪90头,随机分成3组,每组30头猪,分别饲喂无抗饲料、含抗生素饲料和发酵饲料,体重达到40kg左右时,测定各试验组动物的生长性能;采集新鲜粪便样品,采用气相色谱法测定粪便中挥发性臭味物质的含量;利用16S高通量测序技术,分析粪便菌群区系变化。结果显示:1)全价饲料经发酵后,粗脂肪含量显著升高(P<0.01),钙(P<0.01)和总磷(P<0.05)含量显著降低,pH显著降低(P<0.01),乳酸菌数量达到9.67lg cfu·g^(-1),乳酸含量达到421.67mmol·kg^(-1)。2)动物试验结果表明,与对照组相比,饲喂发酵饲料显著提高了生长猪的ADFI和ADG(P<0.05),降低了F/G和死淘率(P<0.05);与抗生素组相比,发酵饲料显著提高了生长猪的ADFI(P<0.05)。3)饲喂发酵饲料组的猪粪便中吲哚含量显著降低(P<0.05),粪臭素和挥发性脂肪酸(VFA)含量降低,甲酚含量升高。4)发酵饲料还提高了生长猪粪便菌群的丰度和和多样性,其中门Tenericutes、Saccharibacteria,属Clostridium、Turicibacter、Mollicutes、Anaerostipes、Acetitomaculum的相对丰度升高;属Lactobacillus、Streptococcus、Rikenellaceae、Megasphaera、Oscillospira、Mitsuokella、Prevotella的相对丰度降低。综上,发酵全价饲料提高了生长猪的生长性能,降低了粪便中吲哚、粪臭素以及挥发性脂肪酸的含量,提高了粪便中对甲酚的含量,改变了粪便微生物区系。

连梅提取液对湿热泻痢仔猪的血清抗氧化指标、胃肠调节酶及十二指肠凋亡基因表达的影响

为了探索连梅提取液对湿热泻痢仔猪的抗氧化功能、胃肠调节酶及十二指肠凋亡基因表达的影响,试验采用了人工模拟高湿高热的环境,给仔猪灌服大肠杆菌辅助致使泻痢,选择泻痢仔猪分为模型组、阳性药物组和连梅提取液高、中、低剂量组,以正常环境下正常饲喂的仔猪作为对照,通过检测仔猪血清抗氧化酶、胃肠调节酶、肝ATP酶以及十二指肠凋亡基因Caspase-3、-8、-9 mRNA转录变化以分析连梅提取液治疗泻痢仔猪的作用机制。结果显示,湿热泻痢仔猪经连梅提取液进行治疗后,血清T-SOD、GSH-Px活力升高,LDH、MDA含量减少,与模型组相比较差异极显著(P<0.01);乙酰胆碱酯酶、淀粉酶、肝Na+-K+-ATPase和Ca2+-Mg2+-ATPase活力较模型组显著增强(P<0.05);T3、T4和GH分泌量显著升高(P<0.05),GC分泌量显著降低(P<0.05);同时各药物组仔猪十二指肠凋亡基因得到了不同程度的恢复,Caspase-8 mRNA表达量只有中剂量组较模型组极显著降低至2.62倍(P<0.01);Caspase-3mRNA表达中,高、中剂量组分别降至正常组的5.82、3.29倍,较模型组差异显著(P<0.05)或极显著(P<0.01);Caspase-9mRNA表达量均显著降低(P<0.05),且降低量与药物浓度成正比。由此可知,连梅提取液可以通过增强湿热泻痢仔猪抗氧化损伤能力,改善胃肠道的消化吸收,促进生长激素的分泌和降低凋亡基因的表达而达到治疗仔猪湿热泻痢。

脂肪酸转运蛋白家族及其介导的脂肪酸跨膜转运

脂肪酸是动物必需的能源和结构物质,脂肪酸的吸收、转运和代谢对动物的健康具有重要影响。近年来的研究表明,一些蛋白介导了不同细胞对脂肪酸的吸收和排出。脂肪酸转运蛋白家族(FATPs)是一个膜蛋白家族,拥有6个家族成员,它们能够特异性调控脂肪酸在不同细胞的跨膜转运。本文对FATPs的家族成员、表达特点、功能调控及其参与的脂肪酸转运进行概述。

胶原蛋白对香肠品质的影响研究

胶原蛋白独特的三螺旋结构,使得其在许多领域具有较重要的应用前景。在食品添加剂方面,胶原蛋白可以作为肉制品改良剂,改善肉制品的嫩度。本实验将胶原蛋白粉添加到香肠中,分析添加胶原蛋白粉后对香肠理化性质的影响。试验表明,添加胶原蛋白粉,可以使香肠的改善香肠的理化性质,使得香肠的水分含量和产率分别提高了19.90%和8.33%,同时还能改善香肠嫩度。

桑叶饲料对母猪生产性能、血液生理生化和免疫指标的影响

为研究桑叶作为饲料来源,其不同添加水平对母猪生产性能、血液生理生化和免疫指标的影响。试验选择胎次、配种时间相近的长白×大约克经产母猪40头,随机分为4组(Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ组),对照组饲喂不同阶段的基础日粮;母猪妊娠期在妊娠母猪基础日粮中添加5%(Ⅰ组),10%(Ⅱ组),15%(Ⅲ组)的桑叶粉。结果表明:Ⅱ组母猪总产数和活产数较对照组分别提高了8.5%和5.5%,差异显著(P<0.05);单核细胞比率、淋巴细胞数、单核细胞都是随着饲喂桑叶粉比例的增加而降低,Ⅰ组、对照组差异显著(P<0.05);红细胞平均体积、平均血红蛋白量、平均血红蛋白浓度和血小板等4项指标大致呈现出随着饲喂桑叶粉比例的增加而增大的趋势,Ⅲ组较对照组显著升高(P<0.05)。桑叶饲料对母猪猪瘟、猪圆环病毒2型抗体水平无负面影响。为桑叶作为饲料开发及进一步利用提供了参考。

出栏前30日饲粮添加饲用桑叶粉对育肥猪生长性能和猪肉品质的影响

为研究出栏前30日饲粮中添加饲用桑叶粉对育肥猪生长性能和猪肉品质的影响,试验选择40头体重相近的育肥猪,随机分成4组(每组10头)。对照组饲喂猪场原配方饲粮,试验组分别饲喂基础饲粮+5%饲用桑叶粉(试验I组),基础饲粮+10%饲用桑叶粉(试验II组),基础饲粮+15%饲用桑叶粉(试验III组)。试验期34 d,测定平均日增重、料重比、屠宰率、平均背膘厚度、眼肌面积、肌肉pH、肌内脂肪含量和脂肪酸含量等。结果显示:试验III组的平均日增重相比对照组减少了22.47%(P<0.05);试验III组的料重比相比对照组增加了13.55%(P>0.05);各试验组肌苷酸含量比对照组增加了7.97%、3.59%和2.39%(P>0.05);试验I组、II组和III组的月桂酸含量分别较对照组增加了100%、100%和200%(P<0.05);试验I组的花生四烯酸含量较对照组高2.13%,但试验II组和III组较对照组低12.77%和25.53%(P>0.05);其他脂肪酸含量则表现为对照组低于各试验组(P>0.05)。综上,出栏前30日饲粮中添加饲用桑叶粉可以改善育肥猪肉品质,提高猪肉风味和营养价值。

MicroRNA与NF-κB调控的细胞凋亡

NF-κB是一种非常重要的核转录调控因子,激活后的NF-κB通过调节靶基因的转录表达参与细胞的各项生命活动,特别是炎症、免疫和凋亡。NF-κB在不同类型的细胞凋亡中可能发挥不同的调控作用。而microRNA这类非编码的RNA对于NF-κB的表达和功能又能够产生系统性或者特异性的调节。综述分析NF-κB对细胞凋亡的调控作用,并探讨microRNA在此过程中的作用。

猪肠道微生物区系的形成及营养调控

猪肠道微生物区系的建立是一个非常复杂的过程。微生物与宿主之间在长期的进化与演变过程中形成了一种相互依赖、相互制约的微生态平衡。肠道微生物在宿主动物的生长发育、器官功能、营养代谢、机体免疫等方面发挥了重要作用。微生物区系的形成与动态平衡受到内部和外部多种因素的影响与制约,特别是不同营养素(碳水化合物、蛋白质、脂肪等)对猪肠道微生物菌群的组成具有重要影响。本文着重探讨了猪肠道微生物区系的形成特点和主要营养素对其调控的影响。

脂肪酸转运蛋白1在荣昌猪不同组织中的表达规律及其与肌内脂肪沉积的关系

本试验旨在研究脂肪酸转运蛋白1(FATP1)在荣昌猪不同组织中的表达规律及其与肌内脂肪沉积的关系。试验选用80只1日龄健康荣昌仔猪饲养,分别在1、7、20、50、90、150日龄选取5只屠宰取样,检测FATP1基因及其编码的蛋白质在荣昌猪体内的组织表达情况并分析其与肌内脂肪沉积的相关性。结果表明:FATP1基因及其编码的蛋白质在荣昌猪的各个组织均有表达,在肌肉和心脏中的表达水平最高,在脂肪和肝脏中的表达水平其次,而在小肠和肺脏中的表达水平最低。随着新生仔猪的生长,FATP1基因在肌肉中的表达水平逐渐升高,分别在50日龄以后的背肌和90日龄以后的腿肌中维持一个较高的水平。数据分析显示FATP1基因的表达与猪肌内脂肪沉积呈现显著正相关(P<0.05)。由此可知,FATP1基因的高表达对于猪的肌内脂肪形成和沉积具有重要影响。

氨基酸缺乏诱导细胞自噬及miRNA调控机制

氨基酸是生物体内不可缺少的营养成分和生命活动最基本的物质之一,并对动物体的新陈代谢起到至关重要的作用。自噬是细胞内通过降解和回收细胞内生物大分子和受损细胞器,以完成本身代谢和某些细胞器更新的过程。研究证实氨基酸缺乏能诱导细胞自噬,而这种反应大部分是依赖于m TORC1信号通路的方式实现的,但总氨基酸或单体氨基酸调节细胞自噬的分子作用机制和自噬水平有很大差别,且相关方面的分子调节机制尚未完全清楚,需要进一步阐明。mi RNA是一类长度为18-24 nt的非编码核苷酸,参与细胞增殖、分化、自噬与凋亡等多种生命活动。研究表明mi RNA在氨基酸缺乏诱导细胞自噬过程中的也发挥重要调控机制。就不同氨基酸缺乏调控自噬相关机制加以综述,并探讨mi RNA在其中起到的关键作用。旨在为治疗自噬相关代谢提供思路。

一种新型血红蛋白色素制品稳定性的研究

实验以猪血为原料,加入烟酰胺、D-异抗坏血酸钠和壳聚糖制成一种新的不含亚硝基的血红蛋白制品,同时以亚硝基血红蛋白为对照,系统研究温度、光照、金属离子及pH对其稳定性的影响。结果表明:烟酰胺、D-异抗坏血酸钠和壳聚糖复合处理的血红蛋白对温度、光照、金属离子的稳定性均优于亚硝基血红蛋白,但光照以及Cu2+、Fe2+、Zn2+对糖基化酰基血红蛋白及亚硝基血红蛋白的稳定性均有较大影响,而在pH5～8范围内,两者均无明显影响。

荣昌哺乳母猪标准回肠可消化赖氨酸适宜需要量研究

本试验旨在通过研究哺乳期饲粮不同赖氨酸水平对荣昌母猪生产性能、血液指标和乳成分的影响,以确定荣昌哺乳母猪标准回肠可消化赖氨酸(SID Lys)的适宜需要量。选取2~3胎血缘相近的荣昌母猪50头,到妊娠110 d时按体况随机分为5组(每组10个重复,每个重复1头猪),分别饲喂SID Lys水平为0.60%(组1)、0.70%(组2)、0.80%(组3)、0.90%(组4)和1.00%(组5)的饲粮,哺乳期28 d。结果表明:1)提高饲粮SID Lys水平有减少母猪体重损失的趋势(P=0.068 9);高水平(1.00%)的SID Lys比0.60%~0.80%SID Lys显著降低了1~14日龄仔猪平均日增重(P<0.05),但饲粮SID Lys水平对仔猪哺乳全期的生长没有显著影响(P>0.05)。2)哺乳第14天的母猪血清尿素氮含量随饲粮SID Lys水平的提高均有不同程度的降低,其中组3~组5显著低于组1(P<0.05)。饲粮SID Lys水平对哺乳第28天的母猪血清胰岛素、类胰岛素样生长因子-Ⅰ、促黄体素和促卵泡素水平均无显著影响(P>0.05),但显著影响了血清雌二醇水平(P<0.05),其中组4显著高于组1、组2和组5(P<0.05)。饲粮SID Lys水平对初乳的成分指标没有显著影响(P>0.05),但常乳中的非脂固形物和乳蛋白含量及乳密度随饲粮SID Lys水平的提高均有不同程度的增加,其中组4和组5显著高于组1(P<0.05)。通过对母猪哺乳期体重变化、血清尿素氮和雌二醇含量进行二次曲线模拟,得到荣昌哺乳母猪饲粮SID Lys的适宜水平为0.83%~0.89%。

柑橘皮渣的营养组成及其在畜禽饲料中的应用研究进展

柑橘是世界第一大水果，年产量超过1亿t，其中40％用于加工。我国是柑橘生产大国，2010年柑橘产量达2645．24万t，其中约150万t用于加工柑橘罐头，约30万t用于加工橙汁翻。柑橘皮渣是柑橘加工业的副产物，包括果皮、种子、橘络和残余果肉等，其中柑橘渣主要是甜橙压榨制汁后的副产物，约占果实重量的50％，柑橘皮主要是蜜桔制罐后的副产物，约占果实重量的25％。随着柑橘产业的快速发展，越来越多的柑橘用于深加工，产生了大量的柑橘皮渣。

加系初产母猪妊娠始末背膘厚度对其当胎繁殖性能的影响

为了探讨初产母猪不同妊娠期背膘厚度对其窝产仔数、死胎数和初生窝重的影响,本实验对加系长白和大白母猪第1胎妊娠开始(配种当天,74头)和结束(妊娠110 d,217头)时的背膘厚度进行测定,记录母猪总产仔数、产活仔数、死胎数和初生窝重等繁殖指标。结果表明:配种时背膘厚为14.0~18.0 mm的后备母猪总产仔数13.62头、活产仔数12.32头,显著高于配种时背膘厚为<14.0 mm和>18.0 mm的母猪;后备母猪妊娠110 d的背膘厚度为12.6~15.5 mm时,其总产仔数(13.14头)、初生窝重(14.93 kg)及初生个体重(1.37 kg),均高于其他3个组(P>0.05);哺乳期背膘损失随妊娠110 d后备母猪背膘厚的增大而不断增加,当母猪妊娠110 d的背膘厚>18.0 mm时,其哺乳期背膘损失达4.11 mm,且9.0~12.5 mm组和12.6~15.5 mm组的背膘损失与极显著低于其他各组。

柑橘渣在动物饲料中的应用研究进展

柑橘渣是柑橘加工业的副产物。柑橘渣营养丰富,其富含的纤维、色素、抗氧化物质可以显著改善机体免疫、动物生产性能及畜产品品质。将其用作饲料,不仅可以解决传统处理方法带来的环境污染,还能够缓解畜牧业和人类争粮食的矛盾。本文就柑橘渣营养特点及其在单胃动物、反刍动物饲料中的应用等几个方面进行综述。

气相色谱法快速测定青贮饲料中乳酸的含量

在SN/T1511.1—2005《进出口果汁中乳酸含量检验方法》基础上,建立了快速测定青贮饲料中乳酸含量的气相色谱方法,以期为青贮饲料的研究提供可靠的分析技术。

猪CD127流式单克隆抗体的研制

【目的】研制出猪CD127(调节因子IL-7受体α链)流式单克隆抗体,为研究分析猪淋巴细胞亚群,尤其是猪Treg细胞亚群提供流式细胞分析抗体,也为进一步探究猪抗病性状与免疫机制间的关系打下基础。【方法】克隆猪CD127基因片段,通过原核载体诱导表达出相应的融合蛋白,以纯化后的融合蛋白免疫Balb/c小鼠,然后取其脾细胞与SP2/0骨髓瘤细胞融合,综合ELISA和流式细胞仪检测筛选出亚克隆抗体,并采用Western blotting验证所得亚克隆抗体能否与猪淋巴细胞上的CD127特异性结合。【结果】猪CD127基因c DNA全长1999 bp,第49~1428 bp为开放阅读框(ORF),编码459个氨基酸,其中前21位氨基酸为信号肽,成熟肽N端第1~219位氨基酸为胞外蛋白,第220~242位氨基酸为跨膜蛋白,第243~459位氨基酸为胞内蛋白。以p ET28a和p ET32a原核载体诱导表达CD127胞外片段可获得大小介于34~43 k D的融合蛋白,经Ni亲和层析柱纯化后用于免疫Balb/c小鼠,6只免疫小鼠血清中的多克隆抗体均能对猪淋巴细胞中的CD3阳性细胞(CD3+)进行共标记,其中以M2和M4两只免疫小鼠抗血清对CD3+的共标记效果较优,分群清晰;但流式细胞仪检测发现,仅2.3%的CD3+能与M2混合池培养基上清液中的分泌抗体共标记,而67.0%的CD3+能与M4混合池培养基上清液中的分泌抗体共标记,且分群清晰。从M4混合池中筛选出6株效价稳定的亚克隆细胞株(1E2、1D8、2F3、2F8、3C6和4E1),且以1D8、2F3、2F8和3C6亚克隆抗体标记的CD3+较多,其培养基上清液中的分泌抗体在猪胸腺和肌肉样品中均能检测出大小约50 k D的单一目的条带。【结论】制备获得的猪CD127流式单克隆抗体可与T淋巴细胞表面的IL-7受体特异性结合,同时在流式细胞仪检测过程中可用于猪Treg细胞亚群检测。