U6和H1双启动子载体用于RNAi的实验研究

为建立一条简便、有效的构建哺乳动物细胞随机RNAi文库技术路线 ,首先通过PCR将 1 9～ 2 1ntsiRNA编码序列及终止信号等元件引入U6启动子下游 ,再将该扩增产物定向克隆至H1启动子的下游。构建的双启动子载体中 ,U6和H1相对排列 ,均以其间插入的靶序列为模板 ,分别转录出其正义和反义链 ,形成功能性siRNA。以EGFP和bcl 2为靶基因的实验表明 ,该方法构建的载体可有效地干扰相应基因的表达。

一对检测肺炎衣原体的新引物

为建立一种更敏感的肺炎衣原体PCR检测方法 ,根据肺炎衣原体种特异性 5 3kDa蛋白基因序列设计一对引物5 3A、5 3B ,用PCR进行肺炎衣原体的检测研究。结果该引物仅能扩增肺炎衣原体DNA ,而与沙眼衣原体 ,鹦鹉热衣原体不反应 ,且对呼吸道常见病原菌之DNA的扩增亦为阴性 ,它能扩增出少至 10fg的肺炎衣原体DNA ,比我们以前合成的一对肺炎衣原体 16srRNA基因检测引物Cpnl、Cpn2更敏感 ,分别用这两对引物检测 30例有呼吸道疾患病人的鼻咽拭子标本 ,PCR的阳性符合率为 86 7%。表明 5 3A、5 3B是一对有效、实用。

幽门螺杆菌疫苗口服免疫小鼠后胃肠免疫应答研究

目的观测 Hp 全菌抗原和粘膜佐剂 LT 口服免疫 Balb/c 小鼠后的胃肠免疫反应。方法采用 ELISPOT 和 ELISA 法检测了胃粘膜、PP 结抗原特异性形成细胞(AFC)和小肠粘液 sIgA。结果抗原免疫组、抗原+佐剂组胃肠粘膜抗原特异性 sIgA-AFC、IgG-AFC 数量明显增加,尤以sIgA-AFC 为甚,并且抗原+佐剂组明显高于单纯抗原组和对照组;小肠牯液特异 sIgA 两免疫组明显高于对照组。结论口服免疫可有效诱导胃肠道粘膜免疫,局部 sIgA 可能在抗 Hp 感染中具有重要作用。

末端酶介导的双链DNA病毒核酸组装

病毒是一类非细胞结构的微生物,专性宿主细胞内寄生,以复制方式进行增殖。在病毒复制的过程中,组装是其特有的过程。不同类型病毒之组装的机制有很大差异,目前对双链DNA(dsDNA)病毒的组装机制研究较多,包括位点特异性组装和满头组装两种方式,采用何种方式进行组装与其基因组编码的末端酶有关。该文介绍末端酶介导的dsDNA病毒组装的有关进展。

硫酸鱼精蛋白在制备几株虫媒病毒血凝素抗原中的应用

本文报道应用硫酸鱼精蛋白处理几株虫媒病毒感染的鼠脑组织制备的血凝素抗原。