注射用核糖核酸Ⅱ通过活性氧介导的PI3K/Akt信号通路诱导人白血病细胞KG1a凋亡

目的 研究注射用核糖核酸Ⅱ诱导人急性骨髓白血病细胞系KG1a细胞凋亡与PI3K/Akt信号通路和活性氧(ROS)的关系。方法 流式细胞术(FCM)检测细胞周期和细胞内的ROS水平;免疫印迹法(Western blot)检测PI3K/Akt信号通路相关蛋白p-PI3K、p-Akt、p-MDM2、p21和周期相关蛋白cyclin D1、CDK4的表达;加入抗氧化剂N-乙酰半胱氨酸(NAC)后,检测p-PI3K、p-Akt和p53蛋白表达变化。结果 FCM结果显示,注射用核糖核酸Ⅱ可将KG1a细胞阻滞在G 0/G 1期,且ROS介导了细胞周期的阻滞;FCM检测ROS结果显示,KG1a细胞内ROS水平均随药物浓度增加而升高;Western blot结果显示,注射用核糖核酸Ⅱ下调p-PI3K、p-Akt、p-MDM2和cyclin D1、CDK4的表达,上调p21的表达;与仅用注射用核糖核酸Ⅱ相比,经NAC预处理后再使用注射用核糖核酸Ⅱ,明显上调了磷酸化PI3K和Akt的表达,下调了p53的表达。结论 注射用核糖核酸Ⅱ通过ROS介导的PI3K/Akt信号通路,诱导人急性骨髓白血病细胞系KG1a细胞凋亡。

阿奇霉素联合利福霉素钠小剂量地塞米松对大叶肺炎患者血浆凝血酶调节蛋白和D-二聚体及降钙素原影响研究

目的:探讨阿奇霉素联合利福霉素钠、小剂量地塞米松对大叶肺炎患者血浆凝血酶调节蛋白和D-二聚体及降钙素原的影响。方法:选取我院收治的大叶肺炎患者137例,根据治疗方法的不同,分为两组,实验组予阿奇霉素、利福霉素钠、小剂量地塞米松治疗。对照组予阿奇霉素治疗,7d为1个疗程,治疗1个疗程。治疗后,观察并比较两组患者的临床疗效,咳嗽、呼吸不畅、啰音等症状,以及血浆凝血酶调节蛋白、D-二聚体、降钙素原的变化。结果:与对照组相比较,实验组的临床疗效明显改善(P<0.05),临床症状缓解显著(P<0.05),血浆凝血酶调节蛋白、D-二聚体、降钙素原显著降低(P<0.05),差异均有统计学意义。结论:阿奇霉素联合利福霉素钠、小剂量地塞米松能够降低大叶肺炎患者血浆凝血酶调节蛋白、D-二聚体及降钙素原的水平,改善临床症状,疗效可靠,值得临床推广使用。

IP化疗联合参芪注射液对小细胞肺癌患者血清VEGF及内皮抑素的影响

目的观察IP化疗联合参芪注射液对小细胞肺癌患者血清血管内皮生长因子（VEGF）及内皮抑素的影响。方法将88例小细胞肺癌患者随机分为对照组和观察组各44例,对照组给予单纯IP化疗,观察组同时加用参芪注射液,观察2组化疗前后血清VEGF及内皮抑素的变化情况。结果治疗后观察组的治疗有效率及肿瘤控制率明显高于对照组（P均〈0.05）;治疗后2组血清VEGF及内皮抑素水平均较治疗前明显改善（P均〈0.05）,且观察组改善程度明显优于对照组（P均〈0.05）;且观察组Ⅳ期患者的血清VEGF及内皮抑素水平较Ⅲ期患者改善幅度明显增大（P〈0.05）。观察组WBC计数与恶心呕吐Ⅲ~Ⅳ级发生率明显低于对照组（P〈0.05）。结论 IP化疗联合参芪注射液治疗小细胞肺癌能明显改善患者血清VEGF及内皮抑素水平,对提高临床疗效及预后有积极意义。

长效抗胆碱药联合β_2-受体激动剂治疗慢性阻塞性肺疾病急性加重期患者的临床观察

目的观察长效抗胆碱药(噻托溴铵)联合β2-受体激动剂(沙美特罗替卡松吸入剂)治疗慢性阻塞性肺疾病急性加重期患者的临床疗效。方法将85例急性加重期COPD患者随机分为对照组A、对照组B和治疗组,在常规治疗的基础上分别给予噻托溴铵、沙美特罗替卡松吸入剂以及联合用药,对比3组患者在肺功能指标第1秒用力呼气容积(FEV1)、第1秒用力呼气容积占用力肺活量百分比(FEV1/FVC%)、第1秒用力呼气容积占预计值百分比(FEV1%pred)、呼吸困难评分、6min步行试验(6MWT)以及血清中炎性因子之间的差异。结果 3组患者治疗前呼吸困难评分均高于治疗后,差异有统计学意义(P<0.05)。治疗组患者呼吸困难评分较对照组A和对照组B显著降低(t=6.29、6.42;P<0.05)。3组患者治疗后FEV1、FEV1/FVC%和FEV1%pred与治疗前比较差异有统计学意义(P<0.05);治疗组FEV1、FEV1/FVC%和FEV1%pred与对照组A和对照组B比较显著升高(P<0.05);对照组B治疗后FEV1/FVC%指标较对照组A显著升高(t=5.52,P<0.05)。治疗后,3组患者6MWT均显著升高,且治疗组治疗后显著高于对照组A、B,差异有统计学意义(P<0.05)。治疗后,3组患者血清中白细胞介素-6(IL-6)、IL-8、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平与治疗前比较均显著性下降,差异有统计学意义(P<0.05);治疗组IL-6、IL-8、TNF-α治疗后水平与对照组A和对照组B治疗后比较显著降低(P<0.05)。结论长效抗胆碱药噻托溴铵联合β2-受体激动剂沙美特罗替卡松吸入剂治疗慢性阻塞性肺疾病急性加重期患者疗效优于单独使用噻托溴铵和沙美特罗替卡松吸入剂,联合治疗显著改善患者肺功能和炎症水平。

红景天苷对人肺癌A549细胞裸鼠移植瘤生长的影响及对MAPK/ERK1/2信号通路的调控作用

目的:研究红景天苷对人肺癌A549细胞裸鼠移植瘤生长的作用,并研究其对丝裂原活化蛋白激酶(mitogen activated protein kinase,MAPK)/细胞外信号调节激酶(extracellular signal regulated kinase,ERK1/2)信号通路的调控作用。方法:培养人肺癌A549细胞制备浓度为3×10^7 mL^-1的细胞悬液,取200μL皮下注射于裸鼠右前肢腋窝皮下。待注射部位出现肿瘤结节时,为建模成功。挑出肿瘤结节大小均为5 mm左右裸鼠共40只,随机分为5组:阴性对照组、阳性对照组、红景天苷高剂量组、红景天苷中剂量组和红景天苷低剂量组,每组8只。阳性对照组裸鼠腹腔注射3 mg·kg^-1顺铂,每3天注射1次;红景天苷高剂量组、中剂量组、低剂量组裸鼠分别腹腔注射红景天苷50 mg·kg^-1、25 mg·kg^-1、12.5 mg·kg^-1,每天1次;阴性对照组裸鼠注射等体积的生理盐水,每天1次。连续给药2周。取肿瘤组织称取质量,计算瘤体生长抑制率;通过苏木精伊红(HE)染色观察瘤体组织病理变化;通过末端标记法观察肿瘤细胞凋亡情况并计算凋亡指数;通过RT-qPCR检测肿瘤细胞中ERK1/2、细胞周期蛋白D1(cyclinD1)、c-Myc、Bcl-2和Bcl-2相关蛋白X(Bax)mRNA相对表达量;通过蛋白免疫印迹检测肿瘤细胞中ERK1/2、cyclinD1、c-Myc、Bcl-2和Bax蛋白表达水平及p-ERK1/2水平。结果:各组瘤质量比较显示:阳性对照组和红景天苷中剂量组比较,差异无统计学意义(P>0.05),其余各组间比较,差异均有统计学意义(P<0.05);其中组间两两比较显示:阴性对照组>红景天苷低剂量组>阳性对照组和红景天苷中剂量组>红景天苷高剂量组。各组抑瘤率比较显示:阳性对照组和红景天苷中剂量组比较,差异无统计学意义(P>0.05),其余各组间比较,差异均有统计学意义(P<0.05);组间两两比较显示:红景天苷高剂量组>阳性对照组和红景天苷中剂量组>红景天苷低剂量组>阴性对照组。HE染色结果比较显示:阴性对照组肿瘤组织可见明显异型细胞,细胞核分裂象多,细胞密度大且排列无序,阳性对照组和红景天苷各剂量组表现出核分裂象减少,细胞死亡,其中红景天苷高剂量组与其他组比较,细胞核分裂象最少,细胞密度最低、坏死最严重。各组细胞凋亡数和凋亡指数比较显示:阳性对照组和红景天苷中剂量组比较,差异无统计学意义(P>0.05),其余各组间比较,差异均有统计学意义(P<0.05),其中组间两两比较显示:红景天苷高剂量组>阳性对照组和红景天苷中剂量组>红景天苷低剂量组>阴性对照组。RT-qPCR和蛋白免疫印迹结果比较显示,各组ERK1/2 mRNA和蛋白表达量比较,差异无统计学意义(P>0.05);cyclinD1、c-Myc、Bcl-2 mRNA和蛋白表达水平及p-ERK1/2水平结果显示,阳性对照组和红景天苷中剂量组比较,差异无统计学意义(P>0.05),其余各组间比较,差异均有统计学意义(P<0.05),其中组间两两比较显示:阴性对照组>红景天苷低剂量组>阳性对照组和红景天苷中剂量组>红景天苷高剂量组。Bax mRNA和蛋白表达水平结果显示,阳性对照组和红景天苷中剂量组比较,差异无统计学意义(P>0.05),其余各组间比较,差异均有统计学意义(P<0.05),两两比较:红景天苷高剂量组>阳性对照组和红景天苷中剂量组>红景天苷低剂量组>阴性对照组。结论:红景天苷可抑制人肺癌A549细胞裸鼠移植瘤的生长,破坏肿瘤细胞结构,促进肿瘤细胞凋亡,推测其机制可能与抑制MAPK/ERK1/2信号通路,上调Bax mRNA和蛋白表达水平,下调cyclinD1、c-Myc、Bcl-2 mRNA和蛋白表达水平,降低p-ERK1/2水平有关。