MAP4K4沉默表达对结肠癌细胞生物学特性的影响

目的分析沉默丝裂原活化蛋白激酶-激酶激酶4(MAP4K4)对结肠癌细胞生物学行为的影响。方法脂质体siRNA干扰技术转染人结肠癌细胞SW620细胞株,按转染情况分为MAP4K4干扰组(转染MAP4K4-siRNA 1.5 mL)、空载体组(转染无关siRNA 1.5 mL)、空白对照组(不予细胞转染处理)。分别采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)和蛋白印迹法(WB)测定各组MAP4K4 mRNA及蛋白表达,并检测各组SW620细胞增殖、侵袭及细胞凋亡情况。结果①空载体组与MAP4K4干扰组MAP4K4 mRNA、蛋白浓度低于空白对照组(P<0.05),MAP4K4干扰组MAP4K4 mRNA、蛋白浓度低于空载体组(P<0.05);②MAP4K4干扰组不同时间增殖活性均低于空载体组和空白对照组(P<0.05);③MAP4K4干扰组穿膜细胞比率低于空载组和空白对照组(P<0.05),空载体组穿膜细胞比率低于空白对照组(P<0.05);④MAP4K4干扰组细胞凋亡率高于空载组和空白对照组(P<0.05),空载体组细胞凋亡率高于空白对照组(P<0.05)。结论siRNA干扰技术沉默结肠癌细胞MAP4K4表达可降低结肠癌细胞增殖及侵袭能力,促进癌细胞凋亡,或可能为结肠癌防治的新靶点。

TIN2基因突变与胃癌手术患者预后生存的关系分析

目的分析(TIN2)基因突变与胃癌手术患者预后生存的关系。方法回顾性分析2016年6月至2017年12月重庆市第四人民医院收治的96例胃癌患者临床资料。提取其术后胃癌组织标本、癌旁正常胃黏膜组织标本(96份)中DNA,行PCR扩增后对TIN2基因的6号外显子进行测序,经序列分析找出TIN2基因突变位点,对突变者进行生物学信息分析,并比较TIN2基因突变与未突变患者临床病理资料、2年内生存预后。结果24例(25.00%)胃癌标本发现TIN2基因2个突变点,其中6例TIN2基因6号外显子第90位碱基C/C突变为C/T,18例胃癌TIN2基因6号外显子第241位碱基G/G突变为A/A,胃癌组织TIN2基因突变率高于癌旁正常组织2.08%(2/96)(P<0.05);2个突变点均为错义突变,SNP突变位点预测显示,TIN2基因6号外显子第90位碱基C/C突变为C/T较第241位碱基G/G突变为A/A对TIN2蛋白功能的影响更大;肿瘤直径≥5 cm、分化程度低、TNM分期Ⅲ期的胃癌患者TIN2基因突变率高于肿瘤直径<5 cm、分化程度中高、TNM分期Ⅰ~Ⅱ期者(P<0.05);TIN2基因突变患者1年、2年生存率96.51%、52.77%低于TIN2未突变者100.00%、60.23%,但差异无统计学意义(P>0.05)。结论胃癌患者易发生TIN2基因错义突变,其中6号外显子第90位碱基C/C突变为C/T对蛋白功能影响更大,TIN2基因突变也与胃癌患者病理特征、术后预后生存有一定关系,可能在胃癌发生发展中起着一定作用。