瑞芬太尼复合丙泊酚与芬太尼复合丙泊酚用于短时腹腔镜手术麻醉的比较

腹腔镜胆囊切除术是目前普外科常见的手术方式,手术时间短,要求麻醉起效快,麻醉过程平稳,苏醒迅速、完全。本组通过观察瑞芬太尼与丙泊酚复合用于腹腔镜胆囊切除术患者的麻醉,并与芬太尼复合丙泊酚进行比较,现报道如下。

不同方法的椎管内麻醉用于剖宫产手术的效果比较

脊麻硬膜外复合麻醉用于剖宫产，具有麻醉效果出现快，局麻药用量少，阻滞效果完全，并发症少的优点。现将我院200例剖宫产病人的麻醉效果讨论如下：

HPV 16L1基因的原核表达及表达条件的优化

目的:构建HPV16L1基因的原核表达质粒,并优化其表达条件。方法:根据GeneBank中的HPV序列及pGEX-KG中的多克隆位点设计引物,以含有HPV全长基因片段重组质粒为模板,经PCR扩增出1 500 bp的DNA片段。将所得片段与pGEX-KG载体连接,转化JM109大肠杆菌,筛选阳性克隆。其扩增片段测序结果与原序列一致,表明原核表达载体pGEX-KG-HPV16L1已构建成功。提取pGEX-KG-HPV16L1质粒转化到BL21(DE3)表达菌株中,经IPTG诱导后收集菌体,进行SDS-PAGE,Western Blot鉴定。结果:在大肠杆菌中获得HPV16L1基因融合表达,融合蛋白的相对分子量为83kDa;表达的蛋白能与抗HPV16L1抗体发生特异性反应。结论:HPV16L1基因在大肠杆菌中获得高效表达,为HPV16L1疫苗的研制奠定了基础。

原位杂交检测HPV-16E6,-18E6在喉癌组织中的表达

目的检测HPV L1和16/18DNA在喉癌组织中的表达,探讨HPV在喉癌发生中的作用。方法用原位杂交(ISH)检测123例喉癌组织及123例"正常人"的喉粘膜上皮组织中HPV-16/18 mRNA。结果在123例喉癌标本中,ISH检出HPV-16E6的阳性率为46.34%,HPV-18E6的阳性率为35.77%。123例"正常人"的喉粘膜ISH结果表明:低危型HPV的阳性率与喉癌相近;高危型HPV的阳性率虽远远低于喉癌,但随着组织病变程度加重阳性率逐渐升高。对上述结果用SPSS 10.0软件进行case-controlχ2分析,HPV-16感染会增加喉上皮病变的风险(OR=14.58),感染HPV-18时,喉上皮病变的风险(OR=10.77)。结论HPV-16感染是重庆地区喉癌的重要发病因素;HPV-16感染后E6片段的保留并持续表达与喉组织的癌变进程密切相关;HPV-16感染会增强喉上皮病变的风险,而HPV-18有协同作用。

喉癌中HPV不同亚型的检测及测序

目的:检测人乳头瘤病毒(Human papillomavirus,HPV)各型DNA在喉癌组织中的表达,探讨HPV在喉癌发生中的作用。方法:用PCR检测123例喉癌组织及123例喉粘膜上皮组织中HPV各型DNA。同时进行DNA测序,结果:在123例喉癌标本中,HPV-L1,-16E6/E7,-18E6/E7阳性率都明显高于其他各型。123例喉粘膜PCR结果表明:低危型HPV的阳性率与喉癌相近;高危型HPV的阳性率虽远远低于喉癌,但随着组织病变程度加重阳性率逐渐升高;HPV-L1的阳性率高于HPV-16E6、E7,随着组织病变程度加重,HPV-L1的检出率逐渐增高。结论:HPV-16感染会增强喉上皮病变的风险,而HPV-18有协同作用;L1片段适合用于检测HPV感染。

HPV16E7基因的原核克隆及表达

目的:探讨从喉癌组织中HPV16E7蛋白的原核克隆及表达。方法:采用PCR方法扩增HPV16E7基因,经BamHⅠ和HindⅢ双酶切后插入相同酶切pET28a(+)载体,转化JM109感受态细胞,并进行阳性克隆筛选。经IPTG对重组质粒进行蛋白诱导表达,SDS-PAGE和Western blot检测目标蛋白表达情况。结果:成功构建了原核表达质粒pET28/E7、HPV16E7融合蛋白在BL21(DE3)菌株中高效表达。结论:HPV16E7融合蛋白的表达为进一步深入研究HPV16E7蛋白的生物学特性及其致细胞转化的作用机制奠定了基础。

HPV L1和16/18 DNA在喉癌组织中的表达

目的检测HPVL1和16/18DNA在喉癌组织中的表达,探讨HPV在喉癌发生中的作用。方法用PCR检测123例喉癌组织及123例喉粘膜上皮组织中HPVL1和16/18DNA。结果在123例喉癌标本中,HPV-L1阳性率为76.42%;HPV-16E6阳性率为54.47%;HPV-16E7阳性率为58.54%;HPV-18E6阳性率为42.28%;HPV-18E7阳性率为48.78%.123例喉粘膜PCR结果表明:低危型HPV的阳性率与喉癌相近;高危型HPV的阳性率虽远远低于喉癌,但随着组织病变程度加重阳性率逐渐升高;HPV-L1的阳性率高于HPV-16E6、E7,随着组织病变程度加重,HPV-L1的检出率逐渐增高。结论 HPV-16感染是重庆地区喉癌的重要发病因素;HPV-16感染后E6/E7片段的保留并持续表达与喉组织的癌变进程密切相关;HPV-16感染会增强喉上皮病变的风险,而HPV-18有协同作用;L1片段适合用于检测HPV感染。

HPV18E6基因的原核克隆及表达

目的:构建pET32a(+)HPV18E6原核表达质粒并优化其表达条件,探讨喉癌组织中HPV18E6蛋白的表达及意义。方法:应用基因重组技术,构建pET32a(+)与HPV18E6的原核表达重组质粒,采用PCR方法扩增HPV18E6基因,经BamHⅠ和HindⅢ双酶切后插入相同酶切pET32a(+)载体,转化JM109感受态细胞并进行阳性克隆筛选,用限制性内切酶酶切和核酸序列检测方法鉴定重组质粒DNA,将其转入宿主菌E.coli BL21(DE3),用IPTG对重组质粒进行诱导表达,SDS-PAGE及Western blot方法鉴定表达蛋白的分子质量及特异性。结果:成功构建了原核表达质粒Pet32/HPV18E6,限制性内切酶酶切和核酸序列检测证实重组质粒中插入的是目的基因,其DNA大小、方向、插入位点和阅读框架均正确;HPV18E6蛋白得到高效原核表达,表达HPV18E6的工程菌BL21(DE3)的最佳诱导温度是37℃,诱导剂IPTG的浓度为1mmol/L。结论:HPV18E6融合蛋白的表达为进一步深入研究HPV18E6蛋白的生物学特性及其致细胞转化的作用机制奠定了基础。

舒芬太尼复合丙泊酚在无痛人工流产中的应用

目的评价舒芬太尼复合丙泊酚静脉麻醉用于无痛人工流产术(简称无痛人流)的效果和安全性。方法选择美国麻醉医师协会(ASA)分级Ⅰ～Ⅱ级、妊娠70d内有痛经史需行无痛人流的孕妇100例,随机分为对照组(A组)和治疗组(B组),每组50例。A组静注丙泊酚、利多卡因和芬太尼,B组静注丙泊酚、利多卡因和舒芬太尼。观察诱导过程及术中血压、心率、脉搏血氧饱和度(SpO2)、呼吸频率、苏醒时间、丙泊酚用量,以及术后恶心、呕吐、头晕及缩宫痛情况[采用模拟视觉评分法(VAS)评分]。结果 B组患者丙泊酚用量、苏醒时间均明显少于A组(P<0.05),两组患者睫毛反射消失后平均动脉压(MAP)及心率均明显低于术前(P<0.05),两组患者呼吸抑制率比较差异无统计学意义(P>0.05),术后VAS评分B组[(1.0±0.5)分]优于A组[(4.5±1.6)分],差异有统计学意义(P<0.05),两组患者不良反应情况比较差异无统计学意义(P>0.05),患者满意度B组优于A组(P<0.05)。结论舒芬太尼复合丙泊酚用于无痛人流的麻醉镇痛效果可靠。

氯诺昔康联合喉罩在预防老年患者腹腔镜胆囊切除术苏醒期躁动中的应用

目的探讨氯诺昔康联合喉罩对老年患者腹腔镜胆囊切除术苏醒期躁动的防治作用。方法将60例择期接受腹腔镜胆囊切除术的老年患者随机分成气管插管组、喉罩组及氯诺昔康联合喉罩组,每组20例。其中,气管插管组与喉罩组患者于手术前20min静脉给予生理盐水10mL,氯诺昔康联合喉罩组在手术前20min静脉给予氯诺昔康8mg(用生理盐水稀释至10mL)。采用平均动脉压(MAP)、心率、脉搏血氧饱和度(SpO2)监测、躁动评分、镇静评分观察麻醉诱导前、拔管前、拔管时、拔管后10min患者的躁动情况。结果喉罩组及氯诺昔康联合喉罩组患者的躁动评分较气管插管组低(P<0.05);喉罩组及氯诺昔康联合喉罩组患者的镇静评分较气管插管组高(P<0.05);气管插管组和喉罩组患者在拔管前、拔管时、拔管后3个时间点的生命体征较麻醉诱导前波动大(P<0.05),而氯诺昔康联合喉罩组各时间点波动不明显(P>0.05);喉罩组及氯诺昔康联合喉罩组患者各时间点生命体征的波动较气管插管组平稳(P<0.05),而氯诺昔康联合喉罩组患者的生命体征则更为平稳(P<0.05)。结论氯诺昔康联合喉罩可有效预防老年患者腹腔镜胆囊切除术苏醒期躁动的发生。

地尔硫卓在围手术期重症高血压中的疗效观察

目的评价盐酸地尔硫卓(合贝爽)注射剂在治疗围手术期高血压中的有效性和安全性.方法开放性病例收集研究.共收集23例非心脏外科手术合并有高血压的患者.先以5～10μg·kg-1·min-1静脉滴注或泵入,每5min递增5～10μg·kg-1·min-1,平均点滴速率在30min内渐增至10～20μg·kg-1·min-1.观察血压和心率的变化.结果治疗前与治疗后不同时间段对收缩压、舒张压以及心率的作用效果分别为:从治疗前的SBP/DBP(210.8±19.6)/(128.4±10.3)mm Hg至治疗后10min的SBP/DBP(186.4±15.3)/(93.1±11.2)mm Hg,和用药前相比*P＜0.05;治疗后60min:SBP/DBP(158.3±14.7)/(84.3±8.3)mm Hg,和用药前相比**P＜0.001.给药前与给药后各时间段的心率无显著性改变[用药前心率:(88.6±18.6)次/min,用药后60min(81.4±14.9)次/min],P＞0.05.结论地尔硫卓注射剂治疗围手术期重症高血压安全有效.

合并NSTEMI的高龄心衰患者行髋部骨折闭合复位内固定术的麻醉处理1例

髋部骨折是老年患者常见的外伤性疾病。该类患者常伴发多种并存疾病和并发症,麻醉评估及管理不当会导致术后并发症和病死率显著增加。该病例因车祸致伤,合并糖尿病、脑梗死后遗症,术前发生非ST段抬高心肌梗死(non⁃ST seg⁃ment elevation myocardial infarction,NSTEMI),反复心衰,经过细致评估与前期治疗,术中采用预防心肌缺血、肺保护通气策略、深麻醉下喉罩替代拔管、多模式镇痛等措施,很好地控制了手术麻醉应激,最终较为平稳地完成了手术麻醉及术后管理,患者顺利出院。总结该病例处置经验,以期为该类型老年髋部骨折麻醉评估与管理提供参考。

HPV16E6基因原核表达载体的构建及表达

构建HPV16E6基因原核表达载体并进行表达。根据GenBank中的人乳头瘤病毒(HPV)序列及pGEX-KG中的多克隆位点设计引物,以含有HPV全长基因片段重组质粒为模板,经PCR扩增出321 bp的DNA片段。将所得片段与pGEX-KG载体连接,转化JM109大肠杆菌,筛选阳性克隆,其扩增片段测序结果与原序列一致,表明原核表达载体pGEX-KG-HPV16E6已构建成功。提取pGEX-KG-HPV16E6质粒转化到BL21(DE3)表达菌株中,经IPTG诱导后收集菌体进行SDS-PAGE、Western blot鉴定。结果在大肠杆菌中获得HPV16E6基因融合表达,主要以包涵体形式存在;融合蛋白的分子量为38 kD;以IPTG终浓度为1 mmol/L,诱导4 h后融合蛋白产量最高。表达的蛋白能与抗HPV16E6抗体发生特异性反应。HPV16E6基因在大肠杆菌中获得高效表达,为HPV16E6疫苗的研制奠定了基础。