乳腺癌中肿瘤相关成纤维细胞原代分离、培养及相关生物学特性分析

目的 探索乳腺癌中肿瘤相关成纤维细胞（CAF）稳定可行的原代分离、培养方法,探讨CAF的生物学特性.方法 取10例未进行任何放疗、化疗及内分泌治疗的手术切除乳腺癌组织及其癌灶外缘2 cm处的配对癌旁组织,采用组织块酶消化法分离培养CAF.流式细胞术检测细胞周期,细胞免疫化学法检测CAF生物学标志波形蛋白（Vimentin）、α平滑肌肌动蛋白（α-SMA）以及细胞增殖指标Ki-67表达情况,Transwell小室侵袭、迁移实验检测CAF侵袭、迁移能力.结果 通过条件优化,成功分离培养CAF.细胞免疫化学结果提示,CAF高表达Vimentin、α-SMA以及Ki-67.流式细胞术结果显示,CAF较乳腺癌旁成纤维细胞S期细胞比例增加,提示CAF增殖能力强,分裂增殖活跃.CAF具有很强的侵袭、迁移能力[CAF组和乳腺癌旁成纤维细胞组侵袭细胞数分别为（79.7±3.5）、（66.3±1.5）个,迁移细胞数分别为（242.3±3.1）、（218.3±2.1）个,均P〈0.05].结论 优化组织块酶消化法并成功分离、培养CAF.CAF具有较强的分裂增殖能力和侵袭迁移能力.