载吲哚菁绿与阿霉素靶向纳米粒用于视网膜母细胞瘤体外成像的实验研究

目的:制备一种靶向叶酸受体的载吲哚菁绿(indocyanine green,ICG)及阿霉素(adriamycin,ADM)的相变型多功能脂质纳米粒(ICG/FA/Pct-PFPNP:ADM)并研究其基本性质,检测其靶向能力、光热效应、超声及光声双模态显像能力,为视网膜母细胞瘤的诊断提供新策略。方法:采用双乳化法制备ICG/FA/Pct-PFPNP:ADM纳米粒,透射电镜观察纳米粒形态,马尔文粒径分析仪检测粒径及电位,紫外分光光度计检测纳米粒的包封率、载药量;流式细胞术量化及激光共聚焦显微镜下观察纳米粒表面叶酸表达情况和体外寻靶能力;CCK-8法检测ICG/FA/Pct-PFPNP纳米粒的生物安全性;近红外激光(808 nm)激发ICG/FA/PctPFPNP:ADM纳米粒,检测其超声/光声双模态显像能力。结果:成功制备了ICG/FA/Pct-PFPNP:ADM纳米粒,其外观呈球形,平均粒径为(374.40±23.48)nm,平均电位(-28.0±4.5)mV。测得ICG包封率为(91.85±2.98)%,载药量为(9.19±0.29)%;ADM包封率为(62.04±5.10)%,载药量为(6.20±0.51)%。流式细胞术和激光共聚焦显微镜结果均显示纳米粒表面叶酸表达情况良好,靶向组与Y79细胞连接率为(96.57±3.17)%,与非靶向组、抗体封闭组相比差异具有统计学意义(F=1537.6,P<0.05)。CCK-8结果显示ICG/FA/Pct-PFPNP纳米粒没有明显的细胞毒性。ICG/FA/Pct-PFPNP:ADM纳米粒经激光辐照后能发生液气相变,增强超声显影并能使局部温度上升至60.8℃。光声信号随纳米粒浓度升高而增强,具有良好的线性关系。结论:成功制备了载吲哚菁绿与阿霉素的靶向相变型纳米粒,其靶向能力好,光热效应佳,增强超声及光声显像效果好,可以用于视网膜母细胞瘤的诊断。

携HMME-Gd液态氟碳纳米粒造影剂的制备及体外双模态成像研究

目的制备携血卟啉单甲醚-钆(HMME-Gd)的液态氟碳纳米粒(HMME-Gd-PFPNPs),观察其体外超声/MRI的成像效果。方法以磷脂、胆固醇、HMME-Gd及全氟戊烷(PFP)为原料,采用薄膜水化法和乳化法制备HMME-Gd-PFPNPs。倒置光学显微镜和透射电子显微镜下观察其基本表征;粒径分析仪检测其粒径和表面电位;紫外分光光度计分析HMME-Gd的包封率;观察HMME-Gd-PFPNPs体外超声/MRI成像的效果。结果成功制备HMMEGd-PFPNPs,光镜和电镜下均表现为形态规则、大小均一的球形。HMME-Gd-PFPNPs平均粒径为(250.27±11.9)nm,平均电位为(-26.17±0.45)mV,HMME-Gd的包封率为(84.70±0.35)%。在低强度聚焦超声辐照下,随着激发强度增加,体外超声成像信号显著增强。同时纳米粒的体外MRI成像效果具有HMME-Gd-PFPNPs浓度依赖性。结论成功制备了HMME-Gd-PFPNPs,其可用于体外超声/MRI双模态成像。

携IR780碘化物液态氟碳纳米粒造影剂的制备及体外双模态成像

目的制备携带IR780碘化物的液态氟碳纳米粒(IFNPs),观察其体外超声/光声双模态成像效果。方法以羟基端乳酸/羟基乙酸共聚物(PLGA-COOH)、IR780碘化物和全氟戊烷(PFP)为原料,采用双乳化法制备PLGA包裹的纳米粒IFNPs。以光学显微镜、共聚焦显微镜、透射电子显微镜及扫描电子显微镜检测其一般物理特性;以马尔文粒径分析仪分析其粒径大小、分布及表面电位;以紫外分光光度计测定IFNPs中IR780的包封率;观察IFNPs体外光声成像和超声成像的能力。结果成功制备出IFNPs,其形态规则,大小均一,透射电子显微镜下表现为外壳黑色、内部灰白色的球形结构,扫描电子显微镜显示纳米粒表面光滑。IFNPs粒径为(241.87±3.47)nm,电位为(-0.766±0.096)mV,IR780包封率为(90.38±0.48)%。随IFNPs浓度增加,体外光声成像及超声成像效果均显著增强。结论携带IR780碘化物的液态氟碳纳米粒造影剂制备成功,可用于体外超声/光声双模态成像。