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用包涵体复性的方法制备重组人白细胞介素-1受体拮抗剂
被引量:
1
1
作者
李树刚
邓小燕
+4 位作者
赵洪
黄秀东
于廷和
陈勇
但国平
《生物医学工程学杂志》
EI
CAS
CSCD
北大核心
2007年第5期1128-1132,共5页
通过大肠杆菌将IL-1ra表达成包涵体,将包涵体用8M尿素溶解后,稀释4倍后直接用离子交换柱层析进行复性和纯化,复性后得到的IL-1ra纯度大于95%,生物活性大于1×105IU/mg,内毒素含量也比较低。Western-Blotting印迹也表明重组蛋白具有I...
通过大肠杆菌将IL-1ra表达成包涵体,将包涵体用8M尿素溶解后,稀释4倍后直接用离子交换柱层析进行复性和纯化,复性后得到的IL-1ra纯度大于95%,生物活性大于1×105IU/mg,内毒素含量也比较低。Western-Blotting印迹也表明重组蛋白具有IL-1ra的抗原活性。
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关键词
白细胞介素-1受体拮抗剂
复性
包涵体
层析
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职称材料
重组羧肽酶G2的原核表达、纯化及活性分析
被引量:
1
2
作者
李树刚
王勇
+5 位作者
张伟
辛渝
但国平
柴新娟
龚会英
于廷和
《生物技术通报》
CAS
CSCD
北大核心
2016年第3期184-189,共6页
在原核表达系统中实现羧肽酶G2(Carboxypeptidase G2,CPG2)的表达,并对CPG2进行了纯化和活性测定。通过PCR扩增得到编码CPG2的基因片段,利用基因重组技术构建原核表达质粒p ET-30a-CPG2,在Escherichia coli中进行诱导表达,菌体经超声破...
在原核表达系统中实现羧肽酶G2(Carboxypeptidase G2,CPG2)的表达,并对CPG2进行了纯化和活性测定。通过PCR扩增得到编码CPG2的基因片段,利用基因重组技术构建原核表达质粒p ET-30a-CPG2,在Escherichia coli中进行诱导表达,菌体经超声破碎后利用金属螯合亲和柱和阴离子交换层析柱对目标蛋白进行纯化。目的蛋白能够以可溶形式表达,SDS-PAGE和Western blotting检测有特异的蛋白表达条带。纯化的CPG2有降解氨甲喋吟(MTX)活性,酶活力达到400 U/mg。
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关键词
羧肽酶G2
原核表达
纯化
氨甲喋吟
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职称材料
题名
用包涵体复性的方法制备重组人白细胞介素-1受体拮抗剂
被引量:
1
1
作者
李树刚
邓小燕
赵洪
黄秀东
于廷和
陈勇
但国平
机构
重庆
大学
生物
工程学院
重庆科润生物医药研发有限公司
重庆
医
科
大学
出处
《生物医学工程学杂志》
EI
CAS
CSCD
北大核心
2007年第5期1128-1132,共5页
文摘
通过大肠杆菌将IL-1ra表达成包涵体,将包涵体用8M尿素溶解后,稀释4倍后直接用离子交换柱层析进行复性和纯化,复性后得到的IL-1ra纯度大于95%,生物活性大于1×105IU/mg,内毒素含量也比较低。Western-Blotting印迹也表明重组蛋白具有IL-1ra的抗原活性。
关键词
白细胞介素-1受体拮抗剂
复性
包涵体
层析
Keywords
IL-1ra Refolding Inclusion body Chromatography
分类号
R392 [医药卫生—免疫学]
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职称材料
题名
重组羧肽酶G2的原核表达、纯化及活性分析
被引量:
1
2
作者
李树刚
王勇
张伟
辛渝
但国平
柴新娟
龚会英
于廷和
机构
重庆科润生物医药研发有限公司
重庆
医
科
大学附属第二医院
出处
《生物技术通报》
CAS
CSCD
北大核心
2016年第3期184-189,共6页
文摘
在原核表达系统中实现羧肽酶G2(Carboxypeptidase G2,CPG2)的表达,并对CPG2进行了纯化和活性测定。通过PCR扩增得到编码CPG2的基因片段,利用基因重组技术构建原核表达质粒p ET-30a-CPG2,在Escherichia coli中进行诱导表达,菌体经超声破碎后利用金属螯合亲和柱和阴离子交换层析柱对目标蛋白进行纯化。目的蛋白能够以可溶形式表达,SDS-PAGE和Western blotting检测有特异的蛋白表达条带。纯化的CPG2有降解氨甲喋吟(MTX)活性,酶活力达到400 U/mg。
关键词
羧肽酶G2
原核表达
纯化
氨甲喋吟
Keywords
CPG2
prokaryotic expression
purification
MTX
分类号
Q78 [生物学—分子生物学]
Q55 [生物学—生物化学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
用包涵体复性的方法制备重组人白细胞介素-1受体拮抗剂
李树刚
邓小燕
赵洪
黄秀东
于廷和
陈勇
但国平
《生物医学工程学杂志》
EI
CAS
CSCD
北大核心
2007
1
下载PDF
职称材料
2
重组羧肽酶G2的原核表达、纯化及活性分析
李树刚
王勇
张伟
辛渝
但国平
柴新娟
龚会英
于廷和
《生物技术通报》
CAS
CSCD
北大核心
2016
1
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职称材料
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