噬菌体抗体库技术——基因工程抗体的重大进展

噬菌体抗体库技术以其独特的构建和筛选系统现已成为我们生产基因工程抗体的一项重要工具 ,本文综述了其产生、原理、构建、如何在体外提高筛选出的抗体的亲和力 ,以及其应用前景。

乳本脱氢酶遗传变异的筛选方法

目的 :建立人乳酸脱氢酶亚单位遗传变异的筛选方法。方法 :在Paragon电泳仪上用涤纶膜作载体测定血清、红细胞中的乳酸脱氢酶同工酶 ,并计算亚单位比值H/M。结果 :血清H/M比值受各种疾病影响 ,而红细胞H/M比值主要与遗传有关。结论

乳酸脱氢酶B基因变异的多态性

本文总结了LDH－B基因变异的种类，分析了这些变异对酶蛋白结构和功能的影响，指出LDH－B基因变异的多态性是表型多样性的原因。

临床分子诊断室的三生培训和管理措施

临床分子诊断室已成为大中型医院检验科的一个重要组成部分，临床分子诊断也成为临床实验诊断学的一个重要分支和发展方向。如何在教学实践中建立和完善临床分子诊断室的培训和管理措施，帮助研究生、进修生和实习生等三生了解和掌握临床分子诊断方面的生物安全问题均有助于提高三生教学质量。本文根据我们自身的三生教学实践和经验，从三生人员、仪器设备、实验记录、生物安全和创新性培养等五个方面提出了一些临床分子诊断室三生教学方面的培训和管理措施，以期在整体上使三生教学质量跨上一个新台阶。

超广谱β-内酰胺酶代表株的临床分布和药敏

大肠埃希氏菌是临床感染最广泛的细菌,这些菌对很多药物的敏感性很高,容易治疗.近来由于抗菌药物的不断开发及临床大量应用,出现了一些产超广谱β-内酰胺酶(ESBL)的菌株,而大肠埃希氏菌是这类细菌的代表株,因而有必要对它做出一些调查研究.

肽核酸压电基因传感器新型生物信号放大系统的研究

目的在构建好的肽核酸压电基因传感器检测系统上引入“RecA蛋白互补单链DNA探针”复合体作为新型生物信号放大系统,提高传感器的检测灵敏度。方法压电基因传感器阵列表面先固定上乙肝病毒(HBV)的bisPNA探针,加入HBV基因组DNA与之反应完全后,加入“RecA蛋白互补单链DNA探针”与bisPNA/dsDNA复合物反应。首先分别优化RecA蛋白及ATPγS的浓度,再观察最佳条件下传感器检测系统的频率下降值和反应时间。结果当RecA蛋白浓度为3mg/ml,ATPγS浓度为12.5μmol/L时,所引起的频率下降值最明显。最佳条件下所引起的频率改变为(112.2±12.7)Hz。结论在检测系统中加入“RecA蛋白互补单链DNA探针”复合体,可有效地提高压电基因传感器的检测灵敏度。

实验性慢性肾功能衰竭早期脂质代谢的研究主动脉脂质沉积动态变化

目的从分子水平阐明了慢性肾衰（ＣＲＦ）早期脂质变化与动脉粥样硬化（ＡＳ）发生发展的关系及它们之间的相互作用。方法Ｗｉｓｔａｒ鼠５／６肾切除ＣＲＦ条件形成后，分别在１０，２０，４０天各时相点同时测定主动脉弓组织中甘油三脂（ＴＧ）、总胆固醇（Ｔ－Ｃｈ）、总磷脂（Ｔ－ＰＬ）的动态水平，并在１０、２０、３０、４０天时相点动态观察了血浆中ＴＧ、Ｔ－Ｃｈ、Ｔ－ＰＬ及红细胞膜Ｔ－Ｃｈ、Ｔ－ＰＬ的水平。结果主动脉弓组织中的三种脂质水平从１０天时相点开始稍高于同时相点对照组，在２０天ＴＧ首先明显增高（Ｐ＜０．０５），在４０天Ｔ－Ｃｈ和ＴＧ增高非常显著（Ｐ＜０．００１），Ｔ－ＰＬ明显增高（Ｐ＜０．０５）。血浆中的ＴＧ、Ｔ－Ｃｈ水平与主动脉组织不同程度的升高，两者显著相关。红细胞膜Ｔ－Ｃｈ升高，Ｔ－ＰＬ下降导致红细胞刚性增强，变形能力下降。结论揭示ＣＲＦ早期就存在脂质代谢异常的同时伴随着主动脉脂质沉积和红细胞膜脂质成分的改变。提示ＣＲＦ早期已经具备了合并心血管病发病的危险因素。

血清脯氨酸酞酶、Ⅲ型前胶原及透明质酸测定对肝纤维化的诊断价值

目的 探讨肝纤维化的血清学诊断指标。 方法 测定正常人30例和各种慢性肝病患者73例的血清脯氢酸肽酶(PLD)、Ⅲ型前胶原(PC Ⅲ)和透明质酸(HA)水平。 结果 PLD活性变化与ALT显著相关(r=0.4495,P<0.05),与肝纤维化无相关;PCⅢ和HA随肝纤维化程度而增高,在慢活肝、肝硬化及肝癌伴肝硬化组显著高于慢迁肝和正常对照组(P<0.01),肝硬化组PCⅢ和HA水平亦显著高于慢活肝组(P<0.05)。 结论 测定血清PCⅢ和HA水平对肝纤维化的诊断有重要意义。

抑癌基因ASPP家族在肿瘤细胞株中的表达研究

目的:观察抑癌基因ASPP家族在不同肿瘤细胞株中的表达水平,探讨其在肿瘤的发生、发展及预后中的作用。方法:应用单核细胞分离液分离正常人血液单核细胞,用DMEM培养液培养细胞株jurkat、k-562、HL-60、成纤维细胞、HT-29、所得细胞用Tripure分离试剂提取总RNA。最后用RT-PCR检测ASPPmRNA的表达水平。结果:ASPP1与ASPP2mRNA在正常人细胞中的表达水平比肿瘤细胞株的表达水平高(P<0.05)。iASPP的表达量除在HT-29细胞株中与正常细胞差异无统计学意义(P>0.05),其他肿瘤细胞株的表达量均高于正常细胞的表达量(P<0.01)。结论:抑癌基因ASPP家族的促p53细胞凋亡功能在正常细胞转变为恶性的过程中有重要的作用。