持续大剂量地塞米松诱导兔股骨头坏死的实验研究

目的：建立能反映糖皮质激素（glucocorticoid，GC）诱导性股骨头坏死（femurheadnecrosis，FHN）病变特征的动物模型，观察用GC过程中和停药后股骨头的变化。方法：给家兔注射2.5mg·kg－1·d－1（相当于人1mg·kg－1·d－1）的大剂量地塞米松（dwxamethasone，DEX）诱导FHN，光镜、透射电镜和X线摄片观察。结果：1、实验组2周股骨头软骨下区空虚的陷窝增多，骨髓脂肪化。4周软骨下区出现典型的骨坏死灶，灶内大部分骨陷窝空虚，骨髓出现典型的坏死、溶解。病变随时间的延长而加重。8周骨坏死灶大且更典型，灶内除少数骨陷窝内残存变性固缩的细胞核或核残迹外，大部分骨陷窝均完全空虚，软骨下区平均骨陷南空虚率达51．8±11．7％；髓腔异常宽大，软骨下骨板菲薄并有中断和缺失；可见包括目内小血管的大片灶性或弥漫性骨髓坏死、溶解。停药2周，骨坏死继续存在，骨修复活动加强，骨质表面附着有增多的破骨细胞或骨细胞，有新骨形成。停药6周，骨坏死程度进一步加重，骨陷窝空虚率达72．9±11．4％；新骨形成明显增多，骨小梁因覆盖有新骨而明显增粗。但股骨头负重区新骨形成很少，髓腔宽大，软骨下骨板菲薄并仍有缺失；骨髓有包括小血管的坏死、溶解，炎症反应明显增强，纤维肉芽增多。2。

严重胫骨干开放骨折伴软组织缺损的骨外固定治疗(附25例报告)

目的：评估骨外固定治疗严重胫骨开放性骨折伴软组织缺损的疗效。方法；25例骨折均采用骨外固定治疗。骨断端相对稳定者采用骨断端直接加压固定，粉碎性或多段粉碎骨折整复后行中立位固定；不稳定大斜面或大骨块骨折复位后辅加侧方加压器顶压或加拉力螺丝钉固定。小腿中上段软组织缺损的修复选用腓肠肌内侧头或腓肠肌皮瓣转位、中下段用邻近筋膜皮瓣覆盖。结果：25例中19例伤口一期愈合。骨折愈合时间3．5－7个月，平均5个月，关节活动及功能效果满意。结论：本方法简便，骨折固定牢稳。钢针远离骨折端对血供干扰小，有益于骨愈合。同时也便于术后对肌、皮瓣的观察和伤口二期处理。

膝部恶性及潜在恶性骨肿瘤的切除并肢体延长

目的；旨在探索下肢恶性、低度恶性骨肿瘤保肢手术的新方法以提高病人的生活质量。方法：1、对9例病人中4例成骨肉瘤，手术前后均予正规化疗，3例巨细胞瘤和2例骨母细胞瘤未化疗。2、所有病例均在Enneking诊断分级的原则指导下先完整切除肿瘤，然后同期运用半环式外固定架在骨缺损处行加压融合，在胫骨的干骺端截骨处行骨痂缓慢牵伸延长术，重建下肢功能。结果：全身正规化疗的4例高分化骨肉瘤病人术后存活28－36个月，保留肢体功能满意。结论：1、凡对化疗敏感的病例，必须实行大剂量化疗，为手术和延长生命创造条件。2、创新在彻底完整切除肿瘤后用一个外固定架同期行肢体延长，保留了组织原件，矫正了肢体短缩畸形，恢复了徒步行走功能，具有改善心理、生理状态，提高生活质量的积极意义。3、选择适当病例，不失为一种有实用价值的骨肿瘤保肢治疗新方法。

实验性骨延长区TGF-β1的基因表达和细胞定位

目的：为了解骨延长过程中TGF-β1基因在延长区组织细胞的表达和定位，从分子水平探讨延长区骨修复的机理。方法：采用12只山羊胫骨上干骺端截骨延长（1．0mm／d）动物模型，分7个时相点取材．通过延长区组织冰冻切片，地高辛标记的。DNATGF－β1探针原位杂交。结果：发现延长早期延长区表达阳性细胞逐渐增加至最高峰（2周），此阶段主要定位于增生的纤维细胞和血管内皮细胞；以后细胞阳性表达率迅速下降，定位于延长区骨小梁边缘的成骨细胞。结论：表明TGF－β1在延长区骨修复过程中具有重要作用，提高和维持延长区TGF-β1基因高水平有效表达，可能对促进和加快延长区骨愈合具有重要的意义。

胎兔颅骨成骨细胞克隆筛选及鉴定

目的：筛选胎兔颅骨细胞原代培养中的细胞克隆，建立成骨细胞株。方法：从服兔颅骨组织中分离培养颅骨细胞，在此基础上，运用有限稀释法进行克隆传代筛选，建立成骨细胞株，并运用酶组化、免疫级化及染色体染色等方法予以鉴定。结果：原代培养的颅骨细胞来源复杂，形态多样；克隆传代筛选的细胞株，细胞形态单一，碱性磷酸酶组化染色呈强阳性，骨形态发生蛋白免疫级化染色呈强阳性，钙红染色显示具有成骨能力；染色体数目形态保持相对稳定。结论：利用有限稀释和克隆传代培养筛选建立的成骨细胞株，生物学性状均一，遗传学性状稳定。

缓慢牵伸肢体延长周围神经损害自然修复过程的电生理观察

目的：观察缓慢牵伸肢体延长后周围神经损伤的自然修复过程及结局。方法：10只日本大耳白兔胫骨延长至40％后再继续观察8周，测试胫后神经刺激脊髓复合感觉诱发电位（CSEP）潜伏期、峰值、面积和变化。结果：肢体延长造成了胫后神经明显的电生理损害，且随着延长幅度的增加而加剧。停止延长后2周，潜伏期恢复约50％。停止延长4周恢复约65％，峰值、面积亦恢复约50％。停止延长8周，各项指标均恢复95％以上。结论：缓慢牵伸对周围神经造成的亚临床损害是可逆的，损伤可在牵伸后8周大部恢复正常。

骨内外动脉损害在糖皮质激素诱导性股骨头坏死中作用的实验研究

目的：初步探讨股骨头内外动脉损害在糖皮质激素（Glucocorticoid，GC）诱导性股骨头坏死（Femurheadnecrosis，FHN）病理发展过程中的作用及其发生机制。方法：给家兔注射2．sing·kg－1·d－1地塞米松建立FHN动物模型，观察用药过程中和停药后血脂、股骨头内外血循环病理（脂肪组化学及HE染色光镜和透射电镜）及其血流量和肝脏病理的变化。结果：1、甘油三脂、胆固醇在用药后均明显升高，8周达最高，分别为对照组的22倍和3倍，停药后6周恢复正常。2、组织病理：股骨头4周出现典型的骨坏死灶，软骨下区小血管腔出现脂肪柱子，脂肪栓塞范围与血脂水平的高低利用药时间密切相关。6周髓内小动脉壁的细胞呈空泡样变；骨内血管的脂肪柱子后方有血栓形成。8周骨坏死灶大且更典型，骨髓内小动脉管壁部分坏死，内皮细胞变性，间隙增宽，部分脱落，管腔内有纤维蛋白网。停药后，骨坏死程度更严重，2周电镜下见髓内小动脉管腔中有脂肪柱子，内皮细胞变性、间隙明显增宽，可见脂质沿增宽的间隙进入内膜下并沉积；6周髓腔小动脉内有血栓形成，并且少数骨内血管仍有脂肪柱子。铁关节囊外的动脉损害随用药时间的延长而加重，8周动脉病变严重，管壁结构紊乱，出现类粥样硬化性改变，管腔狭窄，重者管壁呈玻璃样变性、?

髓腔内脂肪填塞在糖皮质激素诱导性股骨头坏死中作用的实验研究

目的：初步探讨髓腔内脂肪填塞（即骨髓严重脂肪化）在糖皮质激素（Glucocorticoid，GC）诱导股骨头坏死（Fe－murheadnecrosis，FHN）的病理过程中对血循环的影响及其作用机制。方法：给家兔注射2．sing／kg·d的地塞米松建立FHN动物模型，采用血脂监测、血管铸型、血管墨汁灌注、放射微球法血流量测定、组织病理等技术，观察用药过程中和停药后血脂和股骨头病理、血循环及肝脏病理的变化。结果：1、血脂：甘油三脂、胆固醇在用药后均明显升高，第8周达最高，分别约为对照组的22倍和3倍，停药6周恢复正常。2、组织病理：用药2周股骨头髓腔内明显脂肪化，窦状隙血管受压变细。4－6周骨髓脂肪化更严重，临软骨下骨板的髓内血管扩张淤血，其下窦状隙血管严重受压，随时间的延长而加重。8周最严重，骨髓基本为脂肪细胞所取代，血管稀少；停药2周髓内脂肪细胞皱缩、死亡，周围窦状腺血管增粗，临软骨下的血管仍淤血扩张；停药6周骨髓再次脂肪化，以负重区最严重。用药过程中肝细胞出现严重脂肪变性和灶性坏死，肝脏血管内可见脂滴泡。3、股骨头墨汁灌注和血管铸型的观察及血流量测定：用药4周窦状隙血管因受压而出现压迹、变形，使其变细且面积减少，并伴有其上方近关节面的血管扩张；股骨头明显血流量下降?

骨外固定方法治疗长骨缺损对肢体血循环影响的实验研究

目的：为探讨两种骨外固定基本方法（EECL和SBTL）在治疗长骨缺损中的合理选择。方法；采用10只山羊建立胫骨中段骨缺损模型，通过不同幅度的长骨缺损断端对位加压固定，观察骨缺损间隙软组织受压后对肢体远端血循环的影响。结果：发现当缺损超过20％时，可导致缺损处软组织挤压，血管扭曲闭塞，发生肢体运端血循环障碍。结论：当缺损在15％范围以内时，应首选EECL；当缺损超过20％时，原则上应采用STBL。脉冲多谱勒可作为临床监测肢体血循环的参考指标。

节段性骨延长转位修复大段骨缺损实验研究

目的：为研究通过干骺端截骨缓慢延长将骨缺损断端逐渐移位（SBTL），用骨延长区替代骨缺损间隙，达到不植骨修复长骨大段缺损（LSBDs）。方法：实验选用健康山羊左胫骨平台下3个平面分别交叉穿针，固定于特制半环槽式外固定器。于第1、2组钢针之间骨膜下截骨，第2、3组钢针间截除4．5－6cm骨干造成骨缺损，术后第五天开始将第2组钢针以1．0cm／d速度分两次向骨缺损区移位修复骨缺损，不同时相行X摄片检查及墨汁灌注透明切片和图像分析。结果：X线片示延长30天后有连续低密度骨痂影；延长结束后骨密度迅速增加；结束后1月，延长区间隙开始模糊，新生骨皮质开始形成，拆除外固定后3月皮质密度接近正常，皮质连续，髓腔沟通。墨汁灌注透明纵切片见转位骨段和延长区血循环丰富，沿牵伸方向排列，并随延长区新生骨皮质和髓腔形成而相应衍变。加压固定1月后断端皮质血管与间隙内血管相互吻合沟通。结论：在平均37．72％骨缺损条件下，采用SBTL方法一期治疗（LSBDs）重建伤肢长度，延长区和转位节段血循环十分丰富，无血管稀少或缺失区；骨缺损断端愈合良好，未出现延长区和骨缺损断瑞间愈合迟缓或不愈合，亦未出现血管迂曲受压以及神经牵拉损伤等现象。表明缓慢速度牵伸节段延长转位对骨血循环干扰小。

缓慢牵伸肢体延长周围神经损害远期自然修复机理组织学研究

目的：观察缓慢牵伸肢体延长后周围神经损伤自然修复过程及结局。方法：52只日本大耳白兔胫骨延长至40％后再分别继续观察2周、4周、8周，观察各时相延长区神经组织学改变。结果：延长40％时，可见广泛的节段性脱髓鞘，郎飞区结区增宽，但轴突无断裂。电镜下可见髓鞘双环状、空泡状改变及环形小体形成压迫轴突，并可见新形成的髓鞘。停止延长后随着时间的延长，这种改变逐渐修复，至8周时基本恢复正常。结论：缓慢牵伸下肢体延长过程中周围神经的损害是可逆的，并可在短期内修复。

锥状点式接触钢板内固定对局部皮质骨微循环影响的实验研究

目的：研究新型锥状点式接触钢板对局部皮质骨微循环的影响。方法：山羊24只，4只正常对照，20只双侧胫骨中段横行截骨后分别行锥状点式接触钢板和传统钢板固定。术后3天、2周、4周、9周、13周处死动物。用墨汁灌注血管面积图象分析法和放射性微球局部血流量测定法评价钢板下和钢板对侧皮质骨血流量。结果：传统钢板下皮质骨持续缺血，而锥状点式接触钢板下皮质骨血循环明显好于传统钢板，术后4周时最高（11．22±0．552ml．min－1．100g－1），为正常对照组（3．42±0728ml．min－1．100g－1）的3倍多，为传统钢板组（1．13±0．071ml．min－1．100g－1）的9倍多。而钢板对侧皮质骨缺血只是暂时的，术后2周就已恢复。结论：锥状点式接触钢板能保护钢板下皮质骨血循环，更有利于骨折愈合。

周围神经适应缓慢牵伸的机理研究-兔胫后神经血循环观察

目的：动物活体测试表明急性牵伸周围神经6－8％时血供明显减少，12－15％时血流停滞。但缓慢牵伸肢体延长时，延长幅度可远远超过周围神经的生理弹性限度而无神经功能受损，本课题研究缓慢牵伸肢体延长对兔胫后神经血循环的影响。方法：采用兔后肢延长模型，按胫骨延长幅度分为10％、20％、30％及40％四组，24只用于墨汁灌注胫后神经血管形态观察。22只用于氢气清除法胫后神经血流量测定。结果：随着肢体延长量的增加，胫后神经血管逐渐变直，但血管密度及面积明显增加。图像分析显示延长区及其远、近端的血管面积均明显大于健侧对照。切片观察束内毛细血管充盈良好。氢气清除法血充量测定不同延长组间及与正常对照组间差异无统计学意义。结论：周围神经的血循环逐渐适应缓慢的牵张应力，从而使之在肢体延长的过程中避免缺血性损害，为神经的再生修复提供血供保障。

周围神经适应缓慢牵伸的机理研究-形态学观察

目的：缓慢牵伸肢体延长时，延长幅度可远远超过神经的弹性限度而无神经受损，研究周围神经对缓慢牵伸的适应性机理。方法：采用兔胫骨延长模型，24只兔分成延长10％、20％、30％及40％四组行组织学及超微结构观察。结果：非等张纵切片显示正常神经纤维在束膜内呈波浪状走行。延长103％时神经纤维变直，郎飞氏结增宽，轻度脱髓鞘。电镜下髓鞘肿胀、疏松，且主要发生于大的有髓神经纤维。随着延长幅度增加，神经损害逐渐广泛且加剧，同时也存在着神经的再生。结论：超过10％的肢体延长即已超过神经的生理弹性限度，并造成神经损害。随着延长幅度的增加，神经损害逐渐加剧。由于周围神经同步的再生修复，使这种损害仅以亚临床的形式出现。

实验性胫骨延长时关节接触压力分析

目的：为阐明肢体延长诱发关节软骨退变的力学机制提供参考。方法：以新鲜离体兔胫骨干骺端截骨微型半环槽式外固定器不同速度牵伸延长为实验模型，利用压力传感器测定延长后膝关节接触压力值变化。实验按延长速度分为3组：0．5mm／次组，1mm／次组及1．5mm／次组，每组3例，共9例。实验前摄X线片测量胫骨长度，平均为10．13±0．87cm。按分组要求作骨断端牵伸延长，骨延长幅度为10mm，约为胫骨全长的10％左右。每次延长1min内完成，每5min延长一次。每次延长后即刻、3及5min时记录传感器应变值，然后换算成关节接触压力值。同时记录每次延长后骨断端分离距离变化（即骨延长幅度）。结果；1、关节接触压随延长幅度加大而加大，当骨延长幅度低于6％时，接触压增加趋势尚缓，但此后则上升趋势明显加快，尤以1．5mm／次组为甚，0．5及1mm／次组上升趋势相似。2、延长后即刻、3及5min3个时相点的关节接触压无显著性差异（P＞0．05）。3、固定器牵伸长度与骨延长幅度呈线性关系，但后者具有滞后性。结论：胫骨干骺端截骨延长可导致关节接触压增大，并与延长速度及幅度成正比，因而有诱发关节软骨高应力损伤的可能。在肢体延长时，特别是大幅度肢体延长，应采用一些有效的防护措施以防关节软骨损伤及关节功能?