胶原膜与膀胱移行上皮细胞相容性的体外研究

目的 检测制备的胶原膜与膀胱移行上皮细胞的细胞相容性 ,探讨胶原膜作为泌尿系腔道组织工程支架的可能性。 方法 1选用 8～ 12周新西兰白兔中分离培养的原代膀胱移行上皮细胞 ,以 1× 10 5/ cm2 种植到制备胶原膜上 ,于种植后 2、12和 2 4小时通过倒置显微镜及扫描电镜观察细胞与胶原膜的黏附。 2分别设立空白组 (无细胞 )、阴性对照组 (培养基 )、阳性对照组聚氯乙烯管 (Polyvinyl chloride,PVC)浸提液和实验组 (胶原膜浸提液 )。取 2～ 4代对数生长期的膀胱移行上皮细胞 ,接种于 96孔板中 ,每组各 5孔 ,1× 10 4 个 /孔 ,于接种后 2 4、72和 12 0小时 ,通过MTT法显色 ,并于酶标仪 4 90 nm波长下检测吸光度值 ,计算相对增殖率 ,对胶原膜与膀胱移行上皮细胞的相容性进行评估。 结果 移行上皮细胞 2小时后开始在胶原膜上黏附 ,随时间推移 ,黏附细胞数量增加 ;第 2 4、72和 12 0小时实验组吸光度值分别为 0 .5 90± 0 .0 2 4、1.0 6 5± 0 .0 4 0和 1.12 9± 0 .0 74 ,阴性对照吸光度值分别为 0 .6 39± 0 .0 6 8、1.0 2 2±0 .0 4 4和 1.0 87± 0 .111,阳性对照组吸光度值分别为 0 .30 2± 0 .0 2 9、0 .6 5 3± 0 .0 83和 0 .6 94± 0 .0 31,实验组吸光度值明显高于阳性对照组 ,有统计学意义

大鼠阴茎海绵体平滑肌细胞的原代培养及鉴定

目的探讨Wistar大鼠阴茎海绵体平滑肌细胞体外培养的方法及其生物学特性。方法采用组织培养法进行培养并行免疫组化鉴定,观察其形态及测定细胞活性。结果大鼠阴茎海绵体平滑肌细胞为梭,呈长轴平行排列,体外贴壁快,在合适的条件下能够生存并保持其稳定的生物学特性。结论大鼠阴茎海绵平滑肌细胞原培养方便可行,对研究阴茎勃起及ED机制有较大帮助。

衰老对大鼠阴茎组织成分及bcl-2、bax的影响和意义

目的 探讨大鼠衰老过程中阴茎组织中凋亡抑制基因 (bcl 2 )、凋亡促进基因 (bax)及阴茎组织成分等的变化与阴茎勃起的关系。 方法 以不同月龄 (2、8、16、2 4月 )大鼠为对象 ,进行了以下研究 :①阴茎组织Masson染色 ,显示平滑肌纤维、胶原纤维分布的变化 ;②应用免疫组化法检测阴茎组织中bcl 2、bax表达。 结果 ①随年龄增加阴茎组织中平滑肌纤维减少 ,胶原纤维增多 ;②大鼠阴茎组织中有bcl 2及bax表达 ,随年龄增加 ,成纤维细胞中bcl 2表达增强 ,bax表达减弱 ,而平滑肌细胞的变化正好相反。 结论 ①增龄对阴茎组织成分有明显影响 ,胶原纤维及平滑肌纤维的变化可能与勃起障碍的不可逆有关。②增龄的影响主要是引起平滑肌细胞的凋亡 ,而成纤维细胞则凋亡不明显 ,使阴茎组织中平滑肌细胞 /成纤维细胞失调。

L—Arginine及增龄对大鼠阴茎组织中NO—cGMP通路的影响研究

目的：探讨衰老过程中左旋精氨酸（L-Arginine)对大鼠阴茎组织中“NO-cGMP通路”的影响及意义。方法：将不同月龄（2，8，16，24月）大鼠随机分为实验组与治疗组（喂养L-Arginine)。进行了以下研究；（1）阴茎组织中一氧化氮（nitricoxide,NO),环磷酸鸟苷（cGmp)含量测定；（2）阴茎组织一氧化氮合酶（Nitric Oxide Synthase,NOS0活性及NADPH组化变化。结果 （随龄增加）：（1）阴茎组织中NO含量先升高后降低，8月龄最高，24月龄最低，NOS活性变化与其一致，各月龄组间差别均非常显著（P<0.001)；（2）cGMP含量表现为显著降低（P<0.001)；（3）NADPH-d染色显示；NOS阳性着色主要位于平滑肌细胞，随龄增加显著减少，其中2月龄最丰富，24月龄最少；（4）L-Arginine长时间喂养大鼠后，阴茎组织中NOS活性及NO，cGMP含量均显著增加（P<0.001),NADPH-d染色无明显改变。结论：（1）随月龄NOS活性的变化与大鼠性能力密切相关，而NO含量与NOS活性相关，NOS分布丰富，NO含量不一定高；（2）NOS主要存在于平滑肌细胞，而非内皮细胞及神经纤维；（3）阴茎组织中cGMP含量可能决定着平滑肌细胞舒缩状态；（4）cGMP不全由NO产生，可能存在非依赖NO途径；（5）L-Arginine增强NOS活性，增加NO，cGMP含量有明显作用。表明L-Arginine有用于治疗ED的潜在临床价值。

单核细胞趋化蛋白1转基因对膀胱肿瘤生物学行为的影响

目的 观察单核细胞趋化蛋白 1 (MCP 1 )局部表达对膀胱肿瘤生物学行为的影响。 方法 通过脂质体介导 ,利用逆转录病毒载体将MCP 1基因导入膀胱肿瘤皮下模型的瘤细胞中。观察肿瘤生长情况 ,测瘤重及病理学检查。 结果 转基因组肿瘤生长受抑制 ,第 1 5天后生长曲线明显下降 ,瘤体湿重 (2 .6 8± 0 .6 1 ) g ,较对照组 (3.87± 0 .78)g和空白组 (3.98± 0 .70 ) g显著减轻。转基因组肿瘤向周围组织的侵袭力减弱 ,瘤内呈弥漫分布的点状或小片状坏死 ,并以单核细胞和淋巴细胞浸润为主。 结论 MCP 1对免疫细胞的趋化与活化在抗膀胱肿瘤的免疫效应中有重要作用。