呼吸道感染病原菌的变化及耐药性分析

目的分析我院呼吸道感染病原菌的变化及耐药性趋势,为临床治疗和控制院内感染提供依据。方法收集我院2008～2009年患者呼吸道分泌物中病原菌的结构和耐药情况。结果 4464例呼吸道标本中分离出病原菌2451例,占54.9%。其中革兰阴性杆菌为主,占63.7%,位列前五位依次是:肺炎克雷伯菌、鲍氏不动杆菌、铜绿假单胞菌、大肠埃希菌、阴沟肠杆菌;革兰阳性菌占13.2%,前二位是缓症链球菌、金黄色葡萄球菌;真菌占19.5%,以白假丝酵母为主。药敏结果提示碳青霉烯类抗生素对革兰阴性杆菌作用最强,万古霉素对革兰阳性球菌高度敏感,其它抗生素均存在不同程度的耐药。结论革兰阴性杆菌是呼吸道感染的主要致病菌,且细菌的种类和耐药性在不断的发生变化,应根据微生物实验室检测合理用药,以抑制细菌耐药性的发展并提高感染性疾病的治疗效果。

ARDS患者中APACHEⅡ评分及PCT值对呼吸机应用的指导

回顾性分析我院呼吸科2014年5月-2015年5月以来收治ARDS患者78例，按照患者预后分为复苏成功组（A组）37例，复苏无效组（B组）24例及死亡组（C组）17例，比较机械通气前及脱机时APACHEⅡ评分及PCT值。结果脱机时A组和B组的APACHE评分及PCT值较机械通气前有所降低，C组在脱机时APACHEⅡ评分及PCT值较机械通气前升高（P〈0.05）。同A组比较，B组和C组在机械通气前和脱机时的APACHEⅡ评分及PCT值均高于A组（P〈0.05）。APACHEⅡ评分及PCT值高低及变化对ARDS患者机械通气的时机及脱机具有指导意义。

基层医院聘用护士工作中的安全问题与对策

聘用护士在护理队伍中所占比例逐步增大，她们承担着大量临床护理任务，其工作质量的高低与医疗安全息息相关。2002年起，我们通过认真分析工作中可能影响护理安全因素，采取及时有效的措施，防患于未然，效果显著。

慢性阻塞性肺疾病急性加重期气道病原体季节变化的前瞻性观察队列研究

目的探讨COPD急性加重期(AECOPD)慢性细菌性气道感染与病毒暴露之间的关系,以及这些事件的发生率和季节性。方法选取2015年7月到2016年6月间,我院呼吸科招募52例COPD急性加重期患者,男/女分别为29/23例,平均年龄70. 7±9. 9年。患者每月以及在AECOPD发病时接受痰液标本取样,进行细菌培养鉴定和病毒PCR分析,分析研究AECOPD与病原体的相互作用。结果总体上,AECOPD患者痰液样本的细菌(61. 7%vs 47. 3%,χ~2=7. 647,P=0. 0057)和病毒(32. 5%vs 7. 8%,χ~2=48. 8,P <0. 0001)的检出率要高于COPD稳定期患者。最常见的病原菌为非典型流感嗜血杆菌和肺炎链球菌,而最常见的病毒为鼻病毒。痰液样本中细菌与病毒同时检出的比率从COPD稳定期的4. 6%升高到AECOPD的22. 5%(χ~2=37. 38,P <0. 0001)。AECOPD病例的痰液标本的病原菌的分布呈季节性变化。AECOPD的就诊率从低季节的35. 0%上升到高季节的65. 0%,细菌性或病毒性导致的AECOPD的就诊率从低季节的64. 3%到高季节的75. 6%;对于病因阴性的AECOPD,由低季节的35. 7%下降到高季节的24. 4%(χ~2=1. 734,P=0. 1880)。结论 AECOPD病因随季节变化。冬季发病率上升可能是由于病原体存在增加以及非典型流感嗜血杆菌气道感染与病毒感染影响之间的相互作用所致。

结核分枝杆菌CFP10的基因克隆及表达

目的克隆结核分枝杆菌CFP10基因,在大肠杆菌中进行表达,为进一步研究其在结核病诊断中的价值奠定基础。方法以结核分枝杆菌H37Rv基因组DNA为模板,通过PCR方法对CFP10的基因进行扩增,以PET-30a(+)为载体构建重组质粒,将重组质粒先转化入大肠杆菌DH5α中,抽提质粒,进行双酶切鉴定,再转化到表达宿主菌BL21(DE3)中,以IPTG诱导表达,聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)分析蛋白表达形式。结果构建了具有正确基因序列的CFP10重组表达质粒,重组蛋白在大肠杆菌BL21(DE3)中以包涵体形式表达。结论目的基因克隆入宿主菌中并表达成功,为深入研究该蛋白的生物学、免疫学活性奠定了基础。

结核分枝杆菌脂多糖的提取及其检测血清结核抗体的研究

目的提取结核分枝杆菌(MTB)脂多糖抗原,检测结核血清参考品,评价其在血清学诊断中的价值。方法将MTB菌体冰浴超声破碎,用酚/氯仿、氯仿/甲醇抽提除去蛋白和脂质,再用DNase I酶和RNase酶作用除去DNA和RNA,得到初步纯化的脂多糖即LPS-1,LPS-1在去污剂Triton-X114作用后,分成含有阿拉伯甘露糖(AM)的水相即LPS-2和含有脂阿拉伯甘露糖(LAM)和脂甘露糖(LM)的有机相即LPS-3,以三种多糖作为抗原,通过ELISA方法检测结核阳性和阴性血清参考品。结果LPS-1对结核血清参考品检测的敏感性为71.7%,特异性为96%,LPS-3的敏感性为43.9%(18/41),而特异性达到100%。结论脂多糖抗原检测血清结核抗体显示出较强的特异性,可望成为结核病血清学的诊断组合抗原之一。

结核分支杆菌14KDa蛋白的基因克隆、表达、纯化及其抗原性的研究

目的基因克隆、表达、纯化结核分枝杆菌14KDa蛋白,研究其抗原性,评价其在血清学诊断中的价值。方法以结核分枝杆菌H37Rv基因组DNA为模板,应用PCR技术扩增14KDa蛋白基因片断,将其插入到高效表达载体PET-22b(+)上,构建重组质粒PET-22b(+)/14KDa,重组质粒在大肠杆菌中由IPTG诱导表达,表达产物经金属离子鳌合亲和层析方法纯化,免疫印迹和酶联免疫吸附(ELISA)试验分析重组蛋白的抗原性。结果构建了具有正确基因序列的14KDa蛋白重组质粒,在大肠杆菌BL21(DE3)中以可溶性蛋白形式表达,重组蛋白的表达量占菌体蛋白的40.8%,经过一步金属离子鳌合亲和层析后得到纯度为94.3%的目的蛋白。免疫印迹试验结果表明该蛋白能与羊抗结核血清发生特异免疫结合反应。应用ELISA方法对结核血清参考品进行检测,敏感性和特异性分别为75.6%和96.0%。结论获得了能高效表达14KDa蛋白的大肠杆菌工程菌,目的蛋白以可溶性形式表达,该重组蛋白具有良好的免疫原性,可望成为结核血清学的诊断抗原之一。

老年患者口服药物常见护理风险因素分析与对策

通过分析老年住院患者口服药中存在的风险因素,找出其对策并实施。探讨口服药物安全质量控制在老年住院患者中的应用。医务人员应该加强口服药各个环节的质量控制,从而提高口服给药的护理质量,有效减少口服药差错的发生。

机械通气联合纤维支气管镜治疗COPD并自发性气胸的疗效观察

目的:探讨机械通气联合纤维支气管镜对慢性阻塞性肺疾病(COPD)并自发性气胸的治疗方法。方法:收集我院机械通气治疗21例慢性阻塞性肺疾病急性加重期(AECOPD)合并严重呼吸衰竭及气胸的病例,其中17例机械通气前出现自发性气胸,4例机械通气后出现气胸,均予以大管胸腔闭式引流;小潮气量、高频率、低水平PEEP机械通气,联合床边纤维支气管镜吸痰和冲洗治疗。结果:16例好转出院,3例家属因经济原因放弃治疗死亡,2例因上机前已发生心跳呼吸停止10～15分钟,心肺复苏后合并脑死亡,多脏器功能衰竭死亡。结论:正压机械通气可能影响气胸的愈合,掌握好治疗方法,气胸下使用机械通气还是安全可靠的,一般病人愈后良好。

COPD患者血清IL-6和C反应蛋白水平3年随访与预后关系

目的观察COPD患者血清IL-6和C反应蛋白(CRP)在3年随访中的变化与预后的关系。方法61例处于COPD稳定期的患者,测定其呼吸功能、血清IL-6和CRP水平、6min步行距离和身体指数作为基线,每年同一时期测定相同指标,跟踪随访3年。结果3年后IL-6水平明显高于基线值的患者(<0.05)的6min步行距离实验表现明显变差(<0.05);而CRP水平变化不明显(跃0.05)。结论 IL-6水平与COPD患者的预后有明显的相关性。

急性一氧化碳中毒患者的护理体会

在生产和生活环境中，含碳物质燃烧不全，都可产生一氧化碳（CO），如不注意煤气管道的密闭和环境的通风等预防措施，吸人过量后可发生急性C0中毒。CO急性中毒时，CO与血红蛋白（Hb）相结合形成碳氧血红蛋白（COHb），致使Hb丧失携氧的能力，造成各器官组织缺氧，使脑和心等重要器官受损。因此，对急性CO中毒患者及时采取有效的急救与护理,对降低病死率至关重要，我科于2004年7月～2007年4月共抢救急性CO中毒患者52例，取得较高的急救成功率，现报道如下。

结核分枝杆菌38ku蛋白的制备及其抗原性研究

目的基因克隆、表达、纯化结核分枝杆菌38ku蛋白,研究其抗原性,评价其在血清学诊断中的价值。方法2003年2月至2004年3月在中国药品生物制品检定所菌苗室以结核分枝杆菌H37Rv基因组DNA为模板,通过聚合酶链反应(PCR)方法对38ku蛋白基因进行扩增,以PET-30a(+)为载体构建重组质粒,在大肠埃希菌中表达38ku蛋白,通过金属离子螯合亲和层析方法纯化重组蛋白,免疫印迹和酶联免疫吸附试验(ELISA)方法分析该重组蛋白的抗原性。结果构建了具有正确基因序列的38ku蛋白重组质粒,在大肠埃希菌BL21(DE3)中以包涵体形式表达,经过一步金属离子螯合亲和层析后得到纯度为92.7%的目的蛋白。免疫印迹试验结果表明该蛋白能与羊抗结核血清发生特异免疫结合反应。应用ELISA方法对结核血清参考品进行检测,敏感度和特异度分别为80.5%(33/41)和96.0%(25/26)。结论大肠埃希菌工程菌以包涵体的形式表达38ku蛋白,该蛋白具有良好的免疫原性,可望成为结核血清学的诊断抗原之一。