二十二碳六烯酸抑制人结肠癌细胞系HT-29增殖

目的探讨二十二碳六烯酸(DHA)对人结肠癌细胞系HT-29的影响及其作用机制。方法将人结肠癌细胞系HT-29分为对照组,25、50和100μmol/L DHA处理组,以及100μmol/L DHA+30μmol/L 740Y-P处理组。MTT检测HT-29细胞增殖,annexin V-FITC/PI检测细胞凋亡,Western blot检测Bcl-2、Bax蛋白以及p-PI3K、p-Akt和p-mTOR蛋白表达,RT-qPCR检测NLRP3、Caspase-1和IL-1βmRNA相对表达量。结果与对照组相比,DHA 25、50和100μmol/L处理HT-29细胞后细胞存活率下降(P<0.05或P<0.01),细胞凋亡率增加(P<0.05),Bcl-2/Bax比值降低(P<0.05),PI3K、Akt和mTOR的磷酸化水平均下降(P<0.05或P<0.01),NLRP3、Caspase-1和IL-1βmRNA相对表达量均下降(P<0.05或P<0.01)。此外,DHA 100μmol/L和740Y-P 30μmol/L共同处理HT-29细胞后,细胞生存率、蛋白磷酸化水平(p-PI3K、p-Akt和p-mTOR)、mRNA相对表达量(NLRP3、Caspase 1和IL-1β)均低于对照组(P<0.05)和740Y-P 30μmol/L组(P<0.05),而高于DHA 100μmol/L组(P<0.05或P<0.01)。结论DHA抑制人结肠癌细胞系HT-29增殖,作用机制可能与抑制PI3K/Akt/mTOR和NLRP3/Caspase-1/IL-1β信号分子通路有关。

CYSC联合RBP对糖尿病肾病患者早期风险的诊断和预后评估的应用价值

本文以CYSC结合RBP在糖尿病肾病患者中的诊断和预后评估为研究主题,深入探讨了两者在糖尿病肾病早期诊断和治疗评估的应用价值。方法 通过前瞻性研究,我们收集了2023年期间在我院内分泌科就诊治疗的153例DN患者,及正常人群60例,分为DKD(糖尿病肾病患者)组(95例)、T2D(2型糖尿病患者)组(58例)、正常人群组(60例)的生化指标,并对DKD组中选取20例(贝那鲁肽治疗组)进行贝那鲁肽注射液治疗,40例(对照组)进行常规药物治疗,比较治疗前、治疗后1月,3月的生化指标水平,并进行了统计学分析。结果 CYSC和RBP水平与糖尿病肾病患者的肾功能损伤程度密切相关。较高的CYSC和RBP水平预示着更严重的肾功能损伤。统计分析显示,CYSC和RBP与其他肾功能指标(如肌酐、尿素)存在显著相关性(P<0.05),能够作为糖尿病肾病进展的早期预警指标。结论 CYSC和RBP水平在糖尿病肾病患者中的表现与疾病的严重程度呈现出显著的相关性。CYSC和RBP的结合使用,在糖尿病肾病的早期诊断和预后评估中显示出较高的准确性和预测价值。特别是在评估糖尿病肾病病程进展的风险时,CYSC和RBP的联合评估为临床提供了重要的参考信息。

血清Hcy、CEA联合检测在腺瘤性结肠息肉中的诊断价值

目的探讨血清同型半胱氨酸(homocysteine,Hcy)、癌胚抗原(carcinoembryonic antigen,CEA)及联合检测在腺瘤性结肠息肉中的诊断价值。方法选取2020年5月—2022年5月在金华市婺城区人民医院行结肠镜检查被诊断为结肠息肉的192例患者。根据组织病理结果分为腺瘤性结肠息肉组100例、非腺瘤性结肠息肉组92例,同期抽取94例健康体检者为对照组。比较3组中实验室指标,绘制受试者工作特征曲线(re‐ceiver operating characteristics,ROC)曲线,分析评估实验指标对腺瘤性结肠息肉诊断价值。结果腺瘤性结肠息肉组中血清Hcy、CEA水平均高于非腺瘤性结肠息肉组和健康对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。CEA、Hcy及联合检测诊断为腺瘤性结肠息肉的AUC值(95%CI)分别为0.826(0.776~0.887)、0.870(0.817~0.932)、0.926(0.886~0.966),联合检测的AUC值最大。结论腺瘤性结肠息肉患者血清Hcy、CEA水平升高,且CEA和Hcy联合检测对腺瘤性结肠息肉诊断具有一定的价值。

miRNA-4429靶向结合MCL1调控食管鳞状细胞癌细胞增殖、迁移与侵袭的机制研究

目的探讨miRNA-4429靶向结合髓样细胞白血病-1(MCL1)对食管鳞状细胞癌细胞增殖、凋亡、迁移与侵袭的影响。方法采用qRT-PCR法检测食管鳞状细胞癌细胞系和食管正常上皮细胞中miRNA-4429的相对表达量。采用脂质体转染法分别将miRNA-4429模拟物和模拟物对照转染至食管鳞状细胞癌EC9706细胞,分为实验组和对照组。应用CCK-8法、克隆形成实验、流式细胞术和Transwell小室实验等探究miRNA-4429对食管鳞状细胞癌细胞增殖、凋亡、迁移与侵袭的影响。构建MCL1的3'非编码区(3'UTR)野生型和突变型荧光素酶报告基因载体,应用荧光素酶报告基因实验验证MCL1是否为miRNA-4429的靶基因。采用Western blot法检测实验组和对照组MCL1蛋白的表达水平。结果4株食管鳞状细胞癌细胞中miRNA-4429相对表达量均明显低于食管正常上皮细胞(均P<0.01);而与对照组比较,实验组细胞中miRNA-4429相对表达量显著上调(P<0.01)。实验组细胞OD值在72、96 h均明显低于对照组(均P<0.01);与对照组比较,实验组细胞集落形成数明显降低(P<0.01)。与对照组比较,实验组细胞凋亡率明显升高(P<0.01)。实验组细胞迁移数及侵袭数均明显低于对照组(均P<0.01)。miRWalk、miRDB和miRTarBase预测结果表明,MCL1是miRNA-4429的作用靶基因。荧光素酶报告基因实验的结果表明,共转染MCL13'UTR-野生型荧光素酶报告载体后,与对照组比较,实验组荧光素酶相对活性降低(P<0.05);而共转染MCL13'UTR-突变型荧光素酶报告载体后,实验组与对照组荧光素酶相对活性比较差异无统计学意义(P>0.05)。实验组MCL1蛋白表达水平明显低于对照组(P<0.01)。结论食管鳞状细胞癌细胞株中miRNA-4429相对表达量降低,上调miRNA-4429表达可减弱食管鳞状细胞癌EC9706细胞的增殖、迁移和侵袭能力,促进细胞凋亡,其作用机制可能与靶向结合调控MCL1的表达有关。

胃泌素在结肠癌患者中的表达及其受体拮抗剂对人结肠癌细胞株的抑制作用及其对P38信号转导通路的影响

背景结肠癌(colon cancer,CC)是我国常见消化系统恶性肿瘤,早期缺乏特异性症状诊断率较低,导致患者丧失根治性机会,病死率较高,极大危害患者生命健康.胃泌素主要是由胃肠道G细胞分泌一种激素,与胃泌素受体结合后可刺激胃酸分泌,促进胃肠道黏膜生长.丝裂原活化蛋白激酶是一组能被胃泌素等激素激活的丝氨酸-苏氨酸蛋白激酶,负责细胞表面与细胞核内部间信号传递.目的分析胃泌素在CC患者中的表达,并探讨其受体拮抗剂对人CC细胞株的抑制作用及对P38信号转导通路的影响.方法将2016-01/2018-10我院病理科30例CC组织标本根据世界卫生组织恶性肿瘤分化程度标准分为低分化标本、中分化标本、高分化标本,采用免疫组化技术检测观察胃泌素在CC组织中表达情况,体外培养人CC细胞株SW480,将细胞分为对照组(不进行任何药物处理)、胃泌素组(分别加入6.25-200.00 mg/L胃泌素进行处理)、丙谷胺组(分别加入8.00-256.00 mg/L丙谷胺进行处理)、胃泌素联合丙谷胺组(加入12.5 mg/L胃泌素与8.00-256.00 mg/L丙谷胺进行处理),统计SW480中胃泌素受体/胆囊收缩素-B受体表达情况,比较各组CC细胞株SW480活力、细胞增殖指数、P38信号转导通路表达情况P38蛋白、磷酸化-P38蛋白、B淋巴细胞瘤-2(B lymphocyte tumor-2,SBcl-2)、细胞凋亡促进基因(BAX).结果CC组织分化程度越高,胃泌素表达阳性率越高;胃泌素组6.25-200.00 mg/L范围内SW480 OD值均高于对照组(P<0.05);胃泌素组12.50 mg/L时SW480 OD值最高(P<0.05);胃泌素组25.00-200.00 mg/L范围内SW480 OD值比较差异无统计学意义(P>0.05);丙谷胺组8.00-256.00 mg/L范围内SW480 OD值比较差异无统计学意义(P>0.05);胃泌素组联合丙谷胺组在12.50 mg/L胃泌素联合16.00 mg/L丙谷胺时,SW480OD值最低,低于对照组(P<0.05),之后随着丙谷胺浓度增加,SW480 OD值比较差异无统计学意义(P>0.05);胃泌素组(12.50 mg/L)细胞增殖指数高于丙谷胺组(16.00 mg/L)、胃泌素组联合丙谷胺组(12.5mg/L+16.00 mg/L)(P<0.05);胃泌素组(12.50 mg/L)P38蛋白、磷酸化-P38蛋白、BAX蛋白低于对照组、丙谷胺组(16.00 mg/L)、胃泌素组联合丙谷胺组(12.5mg/L+16.00 mg/L),Bcl-2蛋白表达高于对照组、丙谷胺组(16.00 mg/L)、胃泌素组联合丙谷胺组(12.5 mg/L+16.00 mg/L)(P<0.05).结论胃泌素可抑制人CC细胞株SW480的凋亡,且在CC组织中的表达与肿瘤分化程度有关,分化程度越高,其表达量越高,胃泌素受体拮抗剂在一定浓度范围内可拮抗胃泌素促增殖效应,其机制与上调P38、磷酸化-P38、BAX表达及下调Bcl-2表达有关.

新型冠状病毒肺炎患者粪便与咽拭子病毒核酸检测结果分析

目的探讨新型冠状病毒肺炎患者粪便与咽拭子病毒核酸检测的临床价值。方法回顾性分析2020年1月22日至2月27日金华市中心医院收治的17例新型冠状病毒肺炎患者的临床资料(包括人口学、临床表现)及咽拭子标本与粪便标本病毒核酸检测结果。结果17例患者中男10例,女7例,比例为1.4:1;年龄中位数为37岁;重型1例。其中初诊发热者13例(76.4%),无症状者1例(5.8%);初诊咽拭子病毒核酸检测阳性17例(100.0%);初诊胸部CT检查,未见病变2例(11.1%),肺部炎症15例(88.2%),其中磨玻璃片状影8例(47.0%)。17例患者均进行了粪便病毒核酸检测,阳性7例(41.1%)。其中咽拭子病毒核酸检测转阴性时间平均8.4 d,咽拭子病毒核酸检测转阴性后粪便病毒核酸检测持续阳性7例,最长可达到24 d。结论粪便新型冠状病毒核酸检测阳性持续时间长于咽拭子病毒核酸检测阳性持续时间。新型冠状病毒是否可经粪-口传播值得探讨。

DHA和EPA调控巨噬细胞表型抑制HT-29细胞生长

目的探讨二十碳五烯酸(EPA)和二十二碳六烯酸(DHA)通过调控巨噬细胞表型对HT-29细胞生长的影响。方法人单核细胞株THP-1诱导成M2型巨噬细胞后,与人结肠癌细胞株HT-29共培养,分别向共培养体系中加入DHA或EPA 0、10、20、40μmol/L处理48 h。MTT法检测HT-29细胞增殖情况,ELISA法检测上清液中TNF-α、IL-6、IL-1β和IL-10水平,实时荧光定量PCR检测巨噬细胞中CD86、诱导型一氧化氮合酶(iNOS)、精氨酸酶1(Arg1)和CD206 mRNA表达,Western blot法检测HT-29细胞磷酸化NF-κB p65(p-NF-κB p65)、磷酸化信号转导和转录激活因子3(p-STAT3)和NOD样受体热蛋白结构域相关蛋白3(NLRP3)蛋白表达。结果与DHA 0μmol/L比较,DHA 10、20、40μmol/L处理后HT-29细胞存活率降低,共培养上清液中TNF-α、IL-6、IL-1β水平升高,IL-10水平降低,巨噬细胞中CD86、iNOS mRNA表达升高,Arg1、CD206 mRNA表达降低,HT-29细胞中p-NF-κB p65、p-STAT3、NLRP3蛋白表达升高(P<0.05),且呈浓度依赖性(P<0.05)。与EPA 0μmol/L比较,EPA 10、20、40μmol/L处理后HT-29细胞存活率降低,共培养上清液中TNF-α、IL-6、IL-1β水平升高,IL-10水平降低,巨噬细胞中CD86、iNOS mRNA表达升高,Arg1、CD206 mRNA表达降低,HT-29细胞中p-NF-κB p65、p-STAT3、NLRP3蛋白表达升高(P<0.05),且呈浓度依赖性(P<0.05)。结论DHA和EPA通过促进M2型巨噬细胞向M1型巨噬细胞转化来抑制HT-29细胞生长。

妊娠早期糖尿病诊断中糖化血红蛋白阈值对妊娠结局的风险评估价值

目的 探究妊娠早期糖尿病诊断中不同糖化血红蛋白(HbA1c)范围对孕产妇妊娠结局风险评估价值。方法 选取2019年1月—2020年6月在金华市中心医院就诊的符合纳入标准并予以排除标准剔除的孕产妇356例为研究对象,根据HbA1c值将纳入孕产妇分为两组,HbA1c值>5.9%~6.4%为观察组(40例),HbA1c值≤5.9%为对照组(316例),比较两组孕产妇不良妊娠结局。结果 两组孕妇年龄[观察组(31.82±0.33)岁,对照组(30.01±0.24)岁]比较,差异无统计学意义(t=0.041,P>0.05);观察组孕妇BMI[(27.97±1.52)kg/m^(2)]高于对照组[(24.13±1.09)kg/m^(2)],差异有统计学意义(t=10.225,P<0.05);观察组孕妇分娩时机<32周比例(22.50%)高于对照组(4.11%),差异有统计学意义(χ^(2)=9.827,P<0.05);观察组孕妇引产、剖宫产、子痫前期、肩难产、羊水过多、感染及产后出血发生率均高于对照组,差异均有统计学意义(均P<0.05);观察组围生儿先天异常、围生期死亡、新生儿肥大及发育迟缓发生率均高于对照组,差异均有统计学意义(均P<0.05)。结论 HbA1c值为6.0%可作为孕早期筛查妊娠期糖尿病的诊断阈值,相比以往诊断妊娠期糖尿病,这一诊断阈值能在孕早期预测妊娠期糖尿病(GDM),可减少不良妊娠结局的发生。