转基因作物检测技术研究进展

转基因作物的广泛种植为人类社会带来了巨大的经济利益和社会效益,有效缓解了因土地不足或病虫害导致的粮食减产和不足的现状。由于目前转基因食品的生物安全仍存在不确定性,随着其种植面积的逐年增加,转基因食品检测在转基因生物安全监管中的作用越来越重要。因此,建立简单、快速、适用性强的转基因检测方法对转基因食品监管、评估和风险防范等具有重大的意义。本文针对目前三大类,分别为基于核酸水平的检测、基于蛋白水平的检测和基于代谢物水平检测的具体转基因检测技术的原理、应用和研究进展进行概述,并对相关的检测方法及其适用范围进行了简单概括,对比不同检测技术的优势和劣势,指出了目前转基因生物检测技术存在的问题,展望了未来转基因检测技术的发展方向,以期使人们对转基因检测技术的现状和发展趋势有较为清晰和全面的了解。

食用菌对重金属吸附作用的研究进展

食用菌作为一类丰富的微生物资源,可通过吸附环境中的重金属来降低环境污染,其在维持生态平衡中发挥着重要的作用。详细论述食用菌对重金属的吸附作用、吸附机制、耐受机制以及应用进展,以期对食用菌吸附重金属研究和食用菌在环境修复中的应用提供理论参考。

PCR技术鉴定肉品中鸭源性成分的方法研究

根据现行检验检疫行业标准《SN/T3731.5-2013》合成引物,利用聚合酶链式反应(Polymerase chain reaction,PCR)技术检测鲜肉及加工肉制品中的鸭源性成分。结果显示,此引物具有较强特异性(只对鸭源性成分有明显的特异性扩增),较高灵敏度(灵敏度为0.001 ng/μL)和较广的适用性(能准确检测市售肉制品)。表明该引物适用于肉及加工肉制品中的鸭源性成为掺假检测。以此引物为基础的检测方法不仅适用于食品和农畜产品的鸭源性成分检测,而且对此行业标准提供了重要补充,也为下一步相关行业标准的制(修)订提供了有益借鉴。

基于三重实时荧光聚合酶链反应构建黄牛和牦牛源性成分同步检测方法

目的建立一种拥有内源质控的三重实时荧光聚合酶链反应(polymerase chain reaction,PCR)技术,用以快速鉴定肉和乳中黄牛和牦牛的源性成分。方法首先对黄牛肉、牦牛肉、黄牛奶、牦牛奶等7种动物产品进行特异性检测,同时通过稀释梯度方法验证此方法的绝对检出限(limit of detection,LOD),最后通过黄牛和牦牛肉掺假模拟试验确定该方法的相对灵敏度。结果该方法的特异性强,能特异性地检测到来源于黄牛和牦牛肉和乳的DNA,稳定扩增的内源质控有效地避免了假阴性结果,本方法针对黄牛奶的绝对LOD为2.5×10^(-3)5.0×10‒3 ng,针对牦牛奶的绝对LOD为2.5×10^(-3)5.0×10^(‒2)ng,本方法对黄牛肉和牦牛肉混合肉的相对灵敏度可达0.1%牦牛肉。结论所建立的三重实时荧光PCR方法特异性强、灵敏度高,可实现黄牛和牦牛源性以及内源质控的同步检测,又能通过内源质控排除实验假阴性结果。

基于实时荧光PCR法定量检测食品中鸡源性成分

肉类食品真伪鉴定是目前食品安全检测领域的重点研究内容之一。为准确定量检测食品中的鸡源性成分,根据现行检验检疫标准(SN/T 2727—2010)合成引物及探针,并拓展了特异性、灵敏度、检出限和定量分析等试验。结果显示:特异性试验中,仅鸡成分检测出现特异性扩增,其他动物组织均未出现特异性扩增;梯度稀释鸡源性DNA模板原液进行灵敏度评价,发现引物和探针灵敏度较高,可以检测到100 fg级的鸡组分模板DNA,且建立的标准曲线具有良好的线性关系,R2达0.99以上,定量准确;加工制品中的验证试验结果显示,合成的引物及探针具有良好的适用性和定量检测能力。以上研究结果均说明,此引物和探针适用于市场食品中鸡源性成分的定性、定量检测。本研究为今后TaqMan实时荧光PCR法不同动物源性引物和探针的自主研发奠定了基础。

高通量测序技术在临床检验中的应用进展

高通量测序技术在临床检验中的应用加快了人们对疾病背后分子机制的认知并有效的提高了相关检验的准确度.本文将介绍高通量测序技术的发展、原理以及在临床检验中的应用进展.最后对高通量测序技术在临床检验中的前景进行展望.随着高通量测序技术在临床检验中更加广泛和深入的应用,相关疾病背后遗传背景(基因)的揭示会为诊断和治疗提供强有力的协助,使得疾病的诊断和治疗更加快速和准确.

基于TaqMan实时荧光PCR检测鲜肉及加工制品中的鸭源性成分

禽源性成分检测既可以预防禽流感又能分析肉类的掺假问题。本研究参考行业标准(SN/T 2727-2010),对鸭和其它12种不同源性动物DNA进行特异性检测;将鸭来源DNA模板原液进行梯度稀释确定其检出限,同时进行灵敏度实验和掺假实验;在加工制品中检测其适用性。结果表明:此引物和探针特异性强,只针对鸭有特异性扩增曲线,对其它12种动物源性无扩增曲线;当鸭模板DNA浓度为10fg·μL^-1时,仍能检测到鸭源性,灵敏度可达到1%,同时可以很好地检测掺假;此引物和探针在加工制品中检测结果良好,适用于加工肉制品的检测。本实验通过所建立标准曲线y=-3.4554x+42.663,R^2=0.9942,其PCR扩增效率为95%,可以有效地进行定量。同时利用灵敏度检测可以判断此方法的掺假检测能力较强。综上所述,本研究可以有效检测鸭源性的掺假问题,并能为标准提供一定的借鉴。

肉制品中大黄鱼源性成分的鉴定

为食品中大黄鱼源性成分的检测提供参考,根据饲料中鱼源性成分定性检测方法(SN/T2867-2011)合成引物(正向引物:5′-TAAGAGGGCCGGTAAAACTC-3′,反向引物:5′-GTGGGGTATCTAATCCCAG-3′),建立基于PCR技术检测鲜肉及加工肉制品中大黄鱼源性成分的检测方法。结果表明:检测大黄鱼成分的引物具有较好的特异性,可扩增出明显的条带,大小为224bp,与大黄鱼的目的基因条带一致,与NCBI中的大黄鱼线粒体DNA全序列(登录号:AP006002.1,Larimichthys crocea mitochondrial DNA,complete genome)具有99%的匹配率;检测灵敏度高,在样品模板DNA浓度为0有.0较01广n的g/适μL用时性也。可扩增出明显的条带;建立的检测方法能准确检测市售多种肉制品中大黄鱼源性成分。

TaqMan实时荧光PCR检测水牛源性成分

随着动物源性产品中掺假造假事件不断增多以及动物来源性疾病的传播风险逐渐加大,作为保障食品安全和维护消费者权益的高效检测手段,动物源性成分的检测技术已成为国内外的研究热点。根据出入境检验检疫行业标准SN/T 3730.7-2013《食品及饲料中常见畜类品种的鉴定方法第7部分:水牛成分检测实时荧光PCR法》合成引物和探针,利用TaqMan实时荧光聚合酶链式反应(Polymerase chain reaction, PCR)技术检测鲜肉及加工肉制品中的水牛源性成分。结果表明,所研究的引物和探针具有较强的特异性(只对水牛来源DNA具有明显扩增)和较高灵敏度(检出限可到达10 fg/μL,掺假灵敏度可达0.1%),同时具有较广泛的适用性(可以对市售加工制品进行准确的源性检测)。通过所建立的标准曲线能进行定量检测。