小鼠肾小体的形态发生

目的 探讨小鼠肾小体形态的发生规律。 方法 应用光镜、电镜技术并结合体视学方法和图像分析技术对生前和生后小鼠肾脏中各发育阶段的肾小体进行形态学观察和立体计量学的测量。 结果 可见肾小体发育的 4个阶段 ,胚龄 14d时 ,Ⅰ、Ⅱ期肾小体出现 ,生后 7d消失。胚龄 16d时 ,Ⅲ、Ⅳ期肾小体出现 ,其体积从胚龄 16d到生后 4 0d增大约 70倍 ,数目从胚龄 16d到生后 7d增加约 2 0倍 ,生后 7d后基本恒定。 结论 小鼠肾小体于胚龄 14d发生 ,生后 7d前增殖明显 ,生后 7d后不再增殖 ,肾小体的发育以单个体积迅速增大为特点。

水通道蛋白-2、4在小鼠肾发育过程中的表达

目的观察水通道蛋白-2(AQP-2)和水通道蛋白-4(AQP-4)在小鼠肾脏发育过程中的表达位置,探讨其与肾脏发生发育的关系及作用。方法免疫组织化学SABC法染色和体视学半定量检测AQP-2、AQP-4的表达。结果AQP-2在胚龄17d的胎鼠可以明确检测到,其表达部位为集合管主细胞的管腔膜和胞浆内。体视学测量发现,从胚龄17d开始表达到生后1d的小鼠其管腔膜的面密度值逐渐增加,此后面密度值基本上没有变化。AQP-4在胚龄14d的胎鼠可见到微弱的表达,随着胚龄的增长其表达逐渐增加,到生后1d达到最大水平,以后随着日龄的增加表达量无明显变化,并且在每一个时期的表达量都远远小于AQP-2的表达量。AQP-4的表达部位为集合管的侧基底细胞膜。结论推测AQP-2对小鼠出生后肾脏水平衡的调节作用比较重要,而AQP-4对出生前水平衡的调节作用比较重要。

小鼠肾小体的生长曲线

目的:探讨小鼠肾脏发生发育过程中肾小体体积的增长规律。方法:光镜下应用体视学方法对生前和生后小鼠肾脏中各发育阶段的肾小体体积进行测量。结果:胚龄14 d时,逗号小体和S小体出现,生后7 d消失。胚龄16 d时,Ⅲ、Ⅳ期肾小体出现,其体积从胚龄16 d到生后40 d大约增大70倍。结论:小鼠肾小体于胚龄14 d发生,从生后7 d到生后40 d体积增长迅速。

小鼠出生后肾脏发育过程中的细胞增殖与凋亡

目的：观察小鼠出生后肾脏发育过程中增殖细胞核抗原(PCNA)的表达及细胞凋亡的特征,探讨出生后小鼠肾脏发育过程中细胞增殖与凋亡的规律及其关系。方法：应用免疫组织化学技术和原位末端标记法(TUNEL法)分别检测小鼠出生后1～70d肾脏中PCNA阳性的细胞和凋亡细胞。结果：小鼠出生后1～70d,皮质中的肾小体、肾小管、髓放线以及髓质中的肾小管和集合管的细胞,早期增殖活跃,随着肾脏发育成熟而表达逐渐减弱。同时,也存在着细胞凋亡现象,且凋亡高峰一般出现在增殖高峰之后。结论：细胞增殖与凋亡在小鼠生后肾脏发育的整个过程中普遍存在,生后1～7d细胞增殖旺盛,增殖高峰之后出现凋亡高峰,生后28～70d两者活动均减弱。

小鼠肾血管球滤过膜发育的电镜研究

目的研究发育中小鼠血管球滤过膜的变化。方法应用透射电镜观察胚胎和新生小鼠血管球滤过膜的超微结构。结果在肾小体的发育过程中,足细胞形状明显变薄,足突数量逐渐增多,其形状逐渐窄小,足突间裂孔和裂孔膜出现;足细胞下、内皮细胞下先后出现基膜,而后两种基膜融合形成一层较厚的基膜。随着毛细血管袢的不断增生,在足细胞下方出现新合成的环状或袋状的基膜片段;内皮细胞形状也明显变薄,出现大量内皮孔。结论在小鼠肾小体的发育过程中,足细胞和内皮细胞逐渐分化成熟,基膜最早来源于足细胞,随后内皮也参与合成基膜,发育晚期基膜的合成和更新主要由足细胞来完成。

小鼠肾小体发育中的细胞形态学变化

目的:探讨小鼠肾小体发生和发育过程中各种细胞的形态变化。方法:应用组织培养、后肾移植和光、电镜技术对发育不同阶段的肾小体进行观察。结果:胚龄13 d后肾尚未出现肾小体时,经培养5 d,或移植到受鼠5 d后出现了成熟的肾小体的结构。电镜下观察表明:上皮基膜先于内皮基膜出现,随后两层膜融合。早期内皮细胞无核部分是连续的,无小孔结构。在发育过程中,小孔结构增多。早期足细胞有两种类型,明型和暗型,细胞基部伸出小突起并穿过基膜与内皮细胞紧贴。结论:血管球来源于内源性后肾细胞。发育过程中足细胞与内皮有结构上的接触,上皮基膜先于内皮基膜出现,足细胞有两型。

二甲双胍对糖尿病大鼠心肌保护作用的形态学观察

目的:观察传统的降糖药二甲双胍对糖尿病大鼠心肌的保护作用。方法:实验于2004-03/10在锦州医学院试验动物中心完成。①取雄性SD大鼠一次性尾静脉注射新鲜配置的20g/L链脲佐菌素溶液60mg/kg制备糖尿病模型,取造模成功(空腹血糖≥13.9mmol/L)大鼠50只单纯随机分为糖尿病组10只,胰岛素组和二甲双胍组各20只,另取10只尾静脉注射枸橼酸钠缓冲液的正常大鼠为正常对照组。②成模后第4天起,糖尿病组隔天皮下注射鱼精蛋白胰岛素1～2U/次维持存活,胰岛素组皮下注射普通胰岛素(4～6U/次,每天两三次),二甲双胍组灌胃二甲双胍20～30mg/(kg·d),正常对照组每天灌胃等量生理盐水。实验过程中胰岛素组和二甲双胍组大鼠空腹血糖控制在6.4mmol/L以下。③治疗12周后,大鼠断头处死,采血测血糖和血浆胰岛素,取左心室心肌组织,常规制作电镜切片,JEOL1200EX电子显微镜观察。结果:60只大鼠进入结果分析。①空腹血糖水平:胰岛素组和二甲双胍组显著低于糖尿病组[(7.84±3.6),(8.16±3.13),(14.00±4.00)mmol/L,P<0.05],与正常对照组比较差异不显著[(5.76±0.84)mmol/L,P>0.05]。②空腹血浆胰岛素水平:二甲双胍组与正常对照组比较差异不明显[(11.01±4.21),(9.48±3.56)mU/L,P>0.05],但低于胰岛素组和糖尿病组[(33.86±14.73),(23.39±13.85)mU/L,P<0.05]。③心肌超微结构:糖尿病组大鼠心肌纤维内肌节紊乱,肌原纤维变性,线粒体增多,常有肿胀变性。经二甲双胍和胰岛素治疗后糖尿病大鼠心肌超微结构病理改变明显减轻。结论:二甲双胍能抑制糖尿病大鼠的心肌病变,对心肌有良好的保护作用。

糖尿病患者冠状动脉狭窄程度与血脂的关系研究

目的探讨2型糖尿病患者冠状动脉狭窄程度与血脂代谢异常的关系。方法将临床确诊为2型糖尿病且已行冠状动脉造影的80例患者,根据冠状动脉造影结果分为冠脉造影阴性组、轻度狭窄组和中、重度狭窄组,分别检测患者的总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)及空腹血糖(BG)。结果轻度狭窄组及中、重度狭窄组的TG、LDL-C、HDL-C及BG水平与冠脉造影阴性组间差异有显著性意义;轻度狭窄组与中、重度狭窄组的TG,LDL-C,HDL-C水平间差异均有显著性意义。结论糖尿病血脂代谢异常与患者的冠状动脉狭窄程度关系密切,TG,LDL-C及HDL-C水平可影响冠状动脉病变程度。

小鼠肾小体发育过程中的细胞凋亡及Bcl-2和Bax基因表达

目的探讨细胞凋亡及凋亡相关基因bcl-2和bax在小鼠不同发育阶段肾小体中表达的变化特征及其可能的生物学意义。方法采用末端脱氧核苷酸转移酶介导的缺口末端标记法(TUNEL染色法)及bcl-2和bax蛋白免疫组织化学方法,对发育不同阶段小鼠肾小体的细胞凋亡及Bcl-2和Bax基因蛋白表达进行观察。结果在小鼠肾小体发育的不同阶段均有TUNEL阳性细胞的表达,凋亡阳性细胞多出现在Ⅲ、Ⅳ期肾小体内,而此时bcl-2/bax比值明显降低。结论细胞凋亡高峰主要出现在Ⅲ、Ⅳ期肾小体,bcl-2/bax比值的降低可能是这一现象发生的重要机制之一。

小鼠肾脏髓襻细段发育的超微结构

目的 :探讨小鼠肾脏髓襻细段发生发育及逐渐成熟过程。方法 :应用光镜半薄切片和电镜超薄切片观察小鼠肾脏髓襻细段发育过程中的超微结构变化。结果和结论 :细段出现于胚胎后期 ,生后逐渐发育完善。上皮由立方细胞逐渐发育成扁平细胞过程中 ,细胞凋亡起着很大作用。细胞凋亡高峰时间发生在生后七天左右。超微结构观察发现生后细段完善主要位于长襻肾单位的细段。结论 :细段在胚胎晚期出现 ,生后发育。在这一过程中 ,特别是在细胞构筑过程中细胞凋亡起着重要作用。

不同成分灌注液对超声乳化术中兔角膜内皮细胞形态结构的影响(英文)

背景:灌注液的成分与其保护角膜内皮功能之间的联系一直是眼科界和制药业研究的热点课题。目的:观察超声乳化术中使用不同灌注液对兔眼角膜内皮细胞结构及功能的影响。设计:随机分组对照动物实验。单位:锦州医学院实验动物中心室,一所市级医院实验动物手术中心实验室。材料:实验于2004-09/2005-03在锦州医学院实验动物中心实验室和锦州市亚东眼科医院实验动物手术中心实验室进行。清洁级3.5月龄纯种日本大耳白兔16只,随机分为4组:正常对照组、生理盐水组、世可组和平衡盐液组,每组4只。灌注液世可(沈阳齐兴制药有限责任公司生产);平衡盐液(美国Alcon公司生产)。方法:用100mL/L水合氯醛(3mL/kg)腹腔麻醉,眼部用4%盐酸奥布卡因滴眼液表面麻醉。行双眼手术。使用美国Alcon超声乳化仪,常规显微手术器械,于上方巩膜缘后2mm作长约3.5mm的巩膜隧道切口,穿刺入前房,注入粘弹剂Viscoat(Alcon公司生产)0.25mL;环行撕囊,直径约5mm;超声乳化头置于中央区乳化吸出晶体核及皮质;术毕关闭切口。于术前和术后6h采用接触性角膜内皮显微镜进行角膜内皮细胞形态学定量测定:角膜内皮细胞密度、细胞面积、六边形细胞百分率和变异系数。术后6h应用锥蓝-茜素红活性染色,光镜下观察各组角膜内皮细胞微细结构的变化。主要观察指标:①角膜内皮细胞形态学定量分析(角膜内皮细胞密度、细胞平均面积、变异系数和六边形细胞百分率)。②角膜内皮细胞形态结构特征。结果:16只大耳白兔均进入结果分析。①术前各组间各项指标比较差异均无显著性。②细胞密度、细胞面积、六边形细胞百分率、变异系数:术后6h生理盐水组、世可组和平衡盐液组均低于正常对照组(P<0.05),世可组和平衡盐液组对比差异无显著性(P>0.05)。③光镜显示生理盐水组角膜内皮细胞形态改变明显,世可组和平衡盐液组角膜内皮细胞改变轻微,无细胞坏死。结论:在超声乳化术中,灌注液对角膜内皮的损伤为化学性损伤,在相同手术条件下,国产灌注液世可对角膜内皮细胞具有良好的保护作用。

增殖细胞核抗原在小鼠生后肾脏发育中的表达

目的:观察小鼠出生后肾脏发育过程中增殖细胞核抗原(PCNA)的表达特征,探讨出生后小鼠肾脏发育过程中细胞增殖的规律.方法:应用免疫组织化学技术检测小鼠出生后1、3、7、14、21、28和70d肾脏PCNA的表达.结果:小鼠出生后1～70d,皮质中的生肾区、肾小体、肾小管、髓放线以及髓质中的肾小管和集合管PCNA阳性细胞的表达具有一定的规律,早期PCNA阳性表达丰富,随着肾脏发育逐渐成熟而表达减弱直至消失.在70d成年小鼠肾脏中,没有检测到PCNA阳性细胞.结论:出生后小鼠肾脏皮质中的生肾区、肾小体、肾小管、髓放线以及髓质中小管的细胞增殖规律是由高逐渐降低的,直至成年完全停止.

活血化瘀注射液Ⅰ号对大鼠肾脏保存/再灌注损伤的影响

观察活血化瘀注射液I号 (HHI I)对同系大鼠肾移植中肾脏保存 /再灌注损伤的影响。方法 :供肾热缺血 5分钟、乳酸林格液中冷保存 3小时后进行同种大鼠间肾移植 ,随机分为HHI I组和对照组。HHI I组在开放血流前 30分钟大鼠颈静脉给予HHI I 1ml/ 10 0g体重、电子蠕动泵缓慢注入 ;常规组在相同的时间、以相同的速度、给予相同剂量的生理盐水。观察血流开放后 5分钟和移植后 2 4小时血和肾脏组织超氧化物歧化酶 (SOD)、丙二醛 (MDA)以及血肌酐 (Cre)含量、血浆内皮素 1(ET 1)水平、移植后 2 4小时肾脏血流(RBF)的变化以及肾脏组织学的光镜改变。结果 :HHI I组肾脏移植术后 2 4小时血Cre、血和肾脏组织的MDA及ET 1水平明显低于常规组 ,同时血和肾脏组织SOD的活力却明显高于对照组 ,RBF亦显著高于再灌组。此外 ,HHI I组的病理改变程度也比对照组轻。结论 :HHI I可保护移植肾、减少血流开放后的再灌注损伤。

大鼠肾小体发育的生长曲线

目的：探讨大鼠肾小体发育中体积生长曲线的变化规律。方法：采用连续切片技术,光镜观察并结合体视学分析方法,对不同发育阶段大鼠肾小体的体积进行测量,定量研究肾小体体积的变化规律。结果：胚龄16 d 时逗号小体及 S 小体出现,胚龄18 d,出现了Ⅲ期和Ⅳ期肾小体,生后7 d,逗号小体及 S 小体消失,肾小体的体积从胚龄18 d 到生后40 d 大约增大86倍。结论：大鼠肾小体于胚龄16 d 发生,生后40 d 达到成年水平。

大鼠肾脏发育中肾小体数目的变化

目的探讨胚胎及出生后大鼠肾脏发育过程中的肾小体数目的变化规律。方法采用光镜连续切片技术,结合体视学分析方法,对不同发育阶段大鼠肾小体数目的变化进行体视学测量。结果肾小体的数目从胚龄18天到出生后7天大约增大7倍,出生后7天达到高峰,出生后7天至出生后40天基本不再增加。结论大鼠肾小体的数目于胚龄18天到出生后7天逐渐增多,出生后7天之后基本稳定。

超声乳化术中3种黏弹剂对角膜内皮保护作用的比较

目的:观察超声乳化过程中,3种黏弹剂对角膜内皮细胞的保护作用。方法:实验于2003-06/2004-01在锦州医学院实验动物中心实验室和锦州市亚东眼科医院实验动物手术中心实验室进行。取纯种日本大耳白兔16只。随机抽出4只兔8只眼用于正常角膜内皮活性染色,其余按术中应用不同的黏弹剂分为3组:Viscoat组、AmviscPlus组和海诺特组。每组4只兔,每只兔双眼行超声乳化术,用接触性角膜内皮显微镜分别观察术前和术后6h角膜内皮细胞密度,并在术后6h经锥蓝-茜素红活性染色后,光镜下观察角膜内皮细胞形态结构的变化,同时计算内皮细胞存活率。结果:①角膜内皮细胞损失率:术后6h3组内皮细胞密度均低于术前(P<0.01),Viscoat组内皮细胞损失率低于AmviscPlus组和海诺特组(4.99±2.70)%,(8.22±1.52)%,(10.14±4.05)%,P<0.05),AmviscPlus组与海诺特组对比差异无显著性(P>0.05)。②内皮细胞存活率:术后6h,Viscoat组平均内皮细胞存活率高于AmviscPlus组和海诺特组[(93.78±3.14)%,(80.77±3.91)%,(84.91±6.71)%,P<0.01],AmviscPlus组与海诺特组比较差异无显著性(P>0.05)。③角膜内皮细胞形态结构特征:光镜显示Viscoat组角膜内皮细胞损害最小。结论:弥散性黏弹剂Viscoat对比其他粘弹性物质保护效果要好。

水通道蛋白-4在小鼠肾脏发育中的表达

目的观察水通道蛋白-4(AQP-4)在小鼠肾脏发育中的表达,探讨其与肾脏发生发育的关系及作用。方法用免疫组织化学(SABC法)显色观察AQP-4从胚龄12 d胎鼠到生后42 d小鼠肾脏的表达部位,用体视学对AQP-4在小鼠肾脏不同发育阶段中的表达进行定量检测。结果AQP-4在胚龄14 d的胎鼠肾脏可见微弱表达,其后随胚(日)龄的增长而增加,到生后1 d达最高,以后无明显变化。AQP-4的表达部位在胚龄14 d、16 d的小鼠为输尿管芽细胞的侧膜和基底膜(侧基底膜),在集合管出现以后则还表达在集合管细胞的侧基底膜。结论AQP-4在生前小鼠水平衡的调节作用比较重要,对生后小鼠主要起辅助作用。

大鼠肾小体发育中滤过屏障超微结构的演变

目的:探讨大鼠肾小体发育中滤过屏障超微结构的变化规律。方法:采用光镜、电镜技术,并结合体视学分析方法,对不同发育阶段大鼠滤过屏障超微结构的变化进行形态学观察和体视学测量。结果:在肾小体发育过程中,足细胞和内皮细胞的形状逐渐低平,内皮孔增多,足突及裂孔大量分化增多;足细胞下先出现电子密度较低的基膜,随后内皮细胞下才出现基膜,以后,二者融合形成一层电子密度较高的血管球基膜。结论:在大鼠肾小体的发育过程中,足细胞比内皮细胞先分泌基膜,然后二者融合形成血管球基膜。