小鼠胚胎后肾移植的胚龄选择

目的:观察小鼠不同胚龄的后肾植入同种异体远交系成年宿主体内后的生长变化,分析小鼠胚胎后肾移植的胚龄选择、血管起源。方法:实验于2003-06/2004-06在锦州医学院组织与胚胎学教研室完成。实验选用普通级昆明系小白鼠24只,同笼饲养。以观察到阴道栓脱落的最早时间计为胚龄0d,以观察到仔鼠出生的最早时间计为生后0d。以随机数字表法取胚龄13,14,16d的胎鼠及生后1d的仔鼠,即胚龄13d组、胚龄14d组、胚龄16d组、生后1d组,每组8只。受体动物选择普通级体质量20g～25g的成年健康雄性小白鼠32只。对胚龄13d的小鼠胚胎离体后肾4只进行组织培养,观察10d后肾小体的发育情况。选择胚龄13,14,16d及生后1d的小鼠后肾植入同种远交系成年宿主大网膜内10d后,采用光镜及电镜技术观察后肾脏各部(特别是肾小体)的发育情况。结果:各组进行实验的后肾及宿主小白鼠32只均进入结果分析。①胚龄13d的小鼠肾脏中无成熟的肾小体,此胚龄的离体后肾经组织培养和移植后均可以生长和分化,产生成熟的肾小体。②胚龄14,16d及生后1d的小鼠肾脏中,已出现了成熟肾小体,后肾移植后则出现了排斥反应,间质水肿、出血区及淋巴细胞浸润,肾小体萎缩,甚至完全被纤维组织所取代;且排斥反应强弱与胚龄有关,胚龄越大,排斥反应越强。③培养前的后肾结构与移植前胚龄13d小鼠胚胎的后肾结构相同;培养10d后,可见出现了发育中各个阶段肾小体,电镜下可见血管球结构完整。结论:在供体后肾肾小体出现之前移植,其排斥反应轻微,生长发育良好,表明血管球形成之前是移植的最佳时间。

小鼠胚胎肾小球滤过膜早期发育的超微结构

目的 观察小鼠胚胎肾小球滤过膜早期发育。方法 应用透射电镜观察小鼠胚龄 10、14、18d时肾小球超微结构改变。结果 毛细血管侵入S小体第一弯曲时诱导足细胞分泌基膜 ,然后足突、毛细血管内皮孔出现 ,内皮产生基膜 ,最后内皮基膜与足细胞产生和基膜融合成一层共有的基膜。结论 毛细血管诱导足细胞分泌基膜之后再诱导足突产生 ;足细胞基膜和足突出现后内皮才发育成有孔型内皮 ,并开始分泌内皮基膜 。

几种枸橼酸盐溶液低温储存兔肾的比较 (组织学、组织化学观察)

应用三种枸橼酸盐溶液(低渗、等渗、高渗)低温储存兔肾48小时,观察其组织学、组织化学变化。结果表明高渗枸橼酸盐溶液储存的肾脏,其组织结构、酶组织化学反应最好。

受体megalin和cubilin介导白蛋白吸收的免疫组织化学研究

目的及方法 采用免疫荧光双标记技术对培养的opossum肾 (OK)细胞膜受体megalin和cubilin的表达及其与荧光标记的白蛋白摄取的关系进行研究。结果 不同荧光标记的受体megalin及cubilin同时表达在相同的OK细胞上 ,分布主要局限在细胞膜 ,而且形式相似。被摄取的荧光标记的白蛋白点状分布在OK细胞内。此外 ,有受体megalin和cubilin表达的细胞就有白蛋白的摄取 ;反之 ,既不表达受体megalin和cubilin的细胞 ,也没有白蛋白的摄取。结论 这种白蛋白的摄取与受体megalin和cubilin表达的特征提示 ,两种大分子糖蛋白受体megalin和cubilin与白蛋白的摄取有密切相关性 ,很可能在肾小管重吸收白蛋白中起到相互作用。

神经型一氧化氮合酶在早期糖尿病大鼠肾组织中的表达

目的:观察早期糖尿病大鼠肾组织内神经型一氧化氮合酶的表达变化。方法:实验于2005-03/10在锦州医学院科学实验中心与组织胚胎学实验室完成。60只两三月龄大鼠随机数字表法分成糖尿病模型组和正常对照组,每组30只。禁食12h后糖尿病组一次性腹腔注射链脲佐菌素50mg/kg,建立链脲佐菌素诱导的糖尿病大鼠模型,对照组注射相同体积的柠檬酸缓冲液。分别在第1,2,4周3个时间点处死动物,取肾组织,采用亚硝酸还原酶法检测一氧化氮的含量;采用免组织化学染色法检查致密斑处神经型一氧化氮合酶的表达,采用Mivnt细胞图像分析系统测定一氧化氮合成酶在致密斑处阳性细胞的灰度值。结果:在实验过程中,无动物死亡,全部进入结果分析。①1周时糖尿病模型组大鼠肾组织神经型一氧化氮合成酶含量明显低于正常对照组,差异有显著性意义[(1068.01±61.61),(2329.99±200.62)mmol/L,P<0.05];2,4周时糖尿模型病组大鼠肾组织神经型一氧化氮合成酶含量逐渐升高,2周时与对照组差异无显著性意义[(2334.59±192.40),(2372.11±193.34)mmol/L,P>0.05];4周时差异有显著性意义[(4939.51±133.44),(2407.30±174.94)mmol/L,P<0.05]。②1周病程时糖尿病模型组大鼠肾皮质一氧化氮水平低于正常对照组,差异有显著性意义[(8.56±1.25),(11.23±2.08)μmol/L,P<0.05],2周病程时高于同期正常对照组,差异有显著性意义[(13.71±1.86),(9.93±2.01)μmol/L,P<0.05],4周病程时显著高于同期正常对照组,差异有极显著性意义[(16.29±2.46),(10.99±1.64)μmol/L,P<0.01]。③各病程糖尿病模型组大鼠血糖均高于正常对照组大鼠,差异有显著性意义(P<0.01)。结论:在糖尿病大鼠肾脏病变的早期,肾组织内一氧化氮合成减少,可能主要是由于神经型一氧化氮合酶合成减少造成的。

α-平滑肌肌动蛋白在小鼠肾小体胚胎发育中的表达

目的了解α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)在小鼠肾小体胚胎发育过程中的表达规律及α-SMA与肾小体发育成熟的关系。方法采用免疫组织化学方法测定不同胚龄小鼠肾小体的α-SMA的表达。结果α-SMA在小鼠肾小体胚胎发育过程中经历了早期肾小体无表达,近成熟肾小体系膜区强阳性表达,成熟肾小体的阴性表达。结论α-SMA在小鼠肾小体胚胎发育中的表达具有一定的时空顺序,肾小体内α-SMA的表达是短暂的发育现象,与肾小体系膜的发育成熟密切相关。

IAPP免疫反应细胞在成年大鼠胃肠胰系统的分布与形态学研究

用免疫组织化学和免疫电镜双标记法研究了胰岛淀粉样多肽（ＩＡＰＰ）免疫反应细胞在正常大鼠胃肠胰系统的分布、定位和形态特征，并观察了ＩＡＰＰ与胰岛素在胰腺的共存。结果表明，大鼠胰腺和胃肠道各段均见有ＩＡＰＰ免疫反应细胞。在胰腺，ＩＡＰＰ与胰岛素共存于胰岛的Ｂ细胞内，也共存在散在于外分泌部的胰岛素免疫反应细胞内。胃肠道粘膜内ＩＡＰＰ免疫反应细胞主要存在于上皮和固有膜。它们的数量以胃和十二指肠较多，结肠较少。本研究首次发现ＩＡＰＰ免疫反应细胞在空肠、回肠和结肠内均有分布。这为进一步探讨ＩＡＰＰ在调节糖代谢和协调胰岛素分泌及通过刺激胃议素调节胰腺外分泌功能提供了形态学依据。

小鼠肾脏发育中的细胞凋亡

目的 研究小鼠肾脏发育过程中的细胞凋亡规律及形态学特点。 方法 应用光镜、电镜技术和TUNEL法分别对不同胚龄、生后日龄小鼠肾脏细胞凋亡进行了观察。 结果 皮质凋亡细胞多出现在生肾区S小体之间和肾小体内 ,凋亡高峰期在胚龄 14～ 18d之间。髓质凋亡细胞出现在肾小管上皮内 ,凋亡高峰期在生后 7d左右。超微结构观察可见皮质和髓质凋亡细胞主要表现为核固缩 ,染色质凝集 ,细胞皱缩。皮质和髓质凋亡细胞结局为 ,被邻近细胞吞噬 ,或脱落到肾小管腔内。 结论 小鼠肾脏发育过程中确有细胞凋亡 ;皮质中细胞凋亡与生肾区的出现和肾小体发育完善有关 。

缺血时间对肾脏影响的实验研究

目的 :研究不同热缺血时间大鼠肾脏的变化及移植肾的存活情况。方法 :选择不同热缺血时间点 (零时、15min、30min、6 0min) ,观察缺血后光镜下和透射电镜下肾脏组织的病理改变以及肾组织谷胱肽过氧化物酶(GSH -PH)、Na+-K+ATP酶和Ca2 +-ATP酶活性、丙二醛 (MDA)水平的变化 ,也测定缺血后肾静脉血和肾组织乳酸脱氢酶 (LDH)的水平。并在不同热缺血时间 ,分别进行大鼠肾移植 ,观察手术后的存活率和肾功能的变化。结果 :随缺血时间的增加 ,肾脏病理改变逐渐加重。在缺血 30min肾组织内GSH -PX、Na+-K+ATP酶、Ca2 +-ATP酶的活力明显下降 ,而LDH在缺血 15min后就已经明显升高。缺血 30min开始肾组织内MDA水平就已明显增高。不同热缺血时间的肾脏进行大鼠肾移植 ,随着缺血时间的延长 ,所需要的灌注液使用量增加 ,术后 2 4h血肌酐的水平升高 ,而灌洗的效果、以及术后的存活率均下降。结论 :单纯低温保存在鼠肾移植热缺血时间以不超过 30min为宜。

大鼠肝细胞线粒体形态的三维重建

目的研究同一细胞内不同形态线粒体的数量、大小和超微结构。方法用三维重建和体视学测量的方法，研究成年大鼠肝细胞线粒体的形态类型。结果肝细胞线粒体按形态可分为５个基本类型：Ⅰ型（球形、椭球形和盘状）线粒体约占线粒体总数的２１．４％；Ⅱ型（杆状）约占３２．４％；Ⅲ型（不规则形）约占２３．８％，Ⅳ型（分支形）约占１９．６％，Ⅴ型（出芽形）仅占２．８％。Ⅰ～Ⅴ型线粒体的平均体积分别为０．１１、０．２１、０．３２、０．５１和０．６４μｍ３。体现学分析显示，各型线粒体的体积密度有差异（Ｐ＜０．０５或Ｐ＜０．０１），Ⅱ型线粒体体积密度最大，然后是Ⅲ、Ⅳ和Ⅰ型，Ⅴ型线粒体体积密度最小。Ⅰ、Ⅱ和Ⅴ型线粒体嵴膜密度均高于Ⅲ或Ⅳ型（Ｐ＜０．０５）。结论肝细胞内不同形态的线粒体都占有一定的比例，他们不仅体积差异很大，其超微结构亦有不同。

小鼠肾发育中层黏连蛋白表达的实验研究

目的观察层黏连蛋白(LN)在小鼠肾发育过程中的表达规律及层黏连蛋白与细胞极性的关系。方法用免疫组织化学链霉菌素亲和生物素-过氧化物酶连接法测定不同胚龄和日龄小鼠肾层黏连蛋白的表达。结果层黏连蛋白在肾组织中的表达随着胚龄增大和肾成熟程度而增加。在生后肾组织中的单个细胞、多个细胞无腔形成和多个细胞有腔形成时均有表达。在肾发育过程中层黏连蛋白表达于输尿管芽周围、肾小体基膜、肾小管基膜、肾小囊基膜和肾间质,且肾小管基膜着色早于肾小体基膜。结论在肾发生和成熟过程中,层黏连蛋白参与细胞极性的形成,层黏连蛋白的分布具有一定的时空顺序,对基膜的发生、成熟起重要作用。

发育期小鼠肾小体细胞增殖与凋亡的研究

目的研究小鼠肾小体发育过程中细胞增殖与凋亡的变化规律。方法采用PCNA免疫组织化学方法、末端脱氧核苷酸转移酶介导的缺口末端标记法(TUNEL染色法)和光、电镜技术,对发育不同阶段肾小体的细胞增殖和凋亡进行观察。结果PCNA免疫组织化学染色显示:在Ⅰ和Ⅱ期肾小体内几乎所有细胞PCNA呈强阳性反应,Ⅲ、Ⅳ期肾小体PCNA阳性细胞数逐渐减少,Ⅴ期肾小体PCNA阳性细胞少见。TUNEL阳性细胞多出现在出生前,主要在Ⅲ、Ⅳ期肾小体表达。电镜观察:早期肾小体所有细胞核分裂象机率均高,Ⅲ期肾小体中的内皮细胞、足细胞核分裂象机率高,Ⅳ期肾小体中只见到内皮细胞核分裂象,Ⅴ期细胞核分裂象少见。电镜下所见的细胞凋亡多在Ⅲ、Ⅳ期肾小体,其中以内皮细胞、肾小囊壁层细胞凋亡居多。结论细胞增殖与凋亡行为在小鼠肾小体发育的整个过程中普遍存在,协同参与了调控肾小体正常发育过程。

活血化瘀注射液Ⅰ号对肾脏缺血/再灌注时ICAM-1与P-selectin表达的影响

目的 :观察活血化瘀注射液Ⅰ号 (HHI -Ⅰ )对肾脏缺血再灌注损害时粘附分子ICAM 1、P selectin表达影响的保护作用。方法 :先建立大鼠肾脏缺血模型 ,随机分为正常对照组、缺血组 (缺血 1h)、再灌注组 (缺血 1h、再灌注 1h)、丹参组和HHI Ⅰ组 ,后两组在再灌注组的基础上分别给不同的中药。观察各组实验大鼠肾脏组织超氧化物歧化酶 (SOD)、丙二醛 (MDA) ,以及内皮素 - 1(ET - 1)、肾脏血流量 (RBF)的变化 ;并观察光镜下肾脏组织学改变 ,同时免疫组化检查肾脏细胞间粘附分子 - 1(ICAM - 1)和P -选择素 (P -selectin)的表达水平。结果 :再灌注组的病理损害在各组中最重 ,而HHI -Ⅰ和丹参组的病变明显减轻。同正常组相比 ,再灌注组肾脏组织SOD活力下降、MDA含量上升 ,RBF ,ICAM - 1、P -selectin表达水平升高。HHI -Ⅰ组和丹参组肾脏ICAM - 1、P -selectin表达水平低于再灌注组。结论 :HHI -Ⅰ减轻肾脏缺血 /再灌注的病理损害 ,维持肾脏SOD活力 ,增加RBF、减少MDA含量的机制很可能是降低ICAM - 1、P -selectin在肾脏的表达。

二甲双胍对糖尿病大鼠心肌保护作用的形态学观察

目的:观察传统的降糖药二甲双胍对糖尿病大鼠心肌的保护作用。方法:实验于2004-03/10在锦州医学院试验动物中心完成。①取雄性SD大鼠一次性尾静脉注射新鲜配置的20g/L链脲佐菌素溶液60mg/kg制备糖尿病模型,取造模成功(空腹血糖≥13.9mmol/L)大鼠50只单纯随机分为糖尿病组10只,胰岛素组和二甲双胍组各20只,另取10只尾静脉注射枸橼酸钠缓冲液的正常大鼠为正常对照组。②成模后第4天起,糖尿病组隔天皮下注射鱼精蛋白胰岛素1～2U/次维持存活,胰岛素组皮下注射普通胰岛素(4～6U/次,每天两三次),二甲双胍组灌胃二甲双胍20～30mg/(kg·d),正常对照组每天灌胃等量生理盐水。实验过程中胰岛素组和二甲双胍组大鼠空腹血糖控制在6.4mmol/L以下。③治疗12周后,大鼠断头处死,采血测血糖和血浆胰岛素,取左心室心肌组织,常规制作电镜切片,JEOL1200EX电子显微镜观察。结果:60只大鼠进入结果分析。①空腹血糖水平:胰岛素组和二甲双胍组显著低于糖尿病组[(7.84±3.6),(8.16±3.13),(14.00±4.00)mmol/L,P<0.05],与正常对照组比较差异不显著[(5.76±0.84)mmol/L,P>0.05]。②空腹血浆胰岛素水平:二甲双胍组与正常对照组比较差异不明显[(11.01±4.21),(9.48±3.56)mU/L,P>0.05],但低于胰岛素组和糖尿病组[(33.86±14.73),(23.39±13.85)mU/L,P<0.05]。③心肌超微结构:糖尿病组大鼠心肌纤维内肌节紊乱,肌原纤维变性,线粒体增多,常有肿胀变性。经二甲双胍和胰岛素治疗后糖尿病大鼠心肌超微结构病理改变明显减轻。结论:二甲双胍能抑制糖尿病大鼠的心肌病变,对心肌有良好的保护作用。

丹参防治肠鼠噪声性内耳损伤的形态学研究

本文将豚鼠暴露于120dB(SPL)白噪声2小时.防治组动物声暴露前后肌注复方丹参注射液.形态学观察表明,经丹参处理的动物内耳血管纹,毛细胞微细结构的恢复明显优于未经丹参处理的动物,为丹参防治噪声性耳聋的临床应用提供某些形态学依据.

低甲和高甲大鼠肾单位远部细胞超微结构的变化——形态计量学研究

用甲状腺机能低下(低甲)和甲状腺机能亢进(高甲)动物模型,对大鼠肾皮质远端肾单位进行了电镜下细胞形态计量学分析。结果表明,低甲时远端肾单位的远端小管曲部细胞、远端小管直部细胞和集合小管主细胞的截面积(A)、侧基底面细胞质膜面密度(Sv)和周界长度[B(A)]、线粒体体密度(Vv)、及远端小管直部细胞和集合小管主细胞的游离面细胞质膜面密度和周界长度、集合小管直部细胞游离面微绒毛长度均明显下降。高甲时集合小管闰细胞的截面积和线粒体体密度增加。由此可见,甲状腺激素是影响远端肾单位细胞膜和线粒体形态结构的主要因素之一。

不同成分灌注液对超声乳化术中兔角膜内皮细胞形态结构的影响(英文)

背景:灌注液的成分与其保护角膜内皮功能之间的联系一直是眼科界和制药业研究的热点课题。目的:观察超声乳化术中使用不同灌注液对兔眼角膜内皮细胞结构及功能的影响。设计:随机分组对照动物实验。单位:锦州医学院实验动物中心室,一所市级医院实验动物手术中心实验室。材料:实验于2004-09/2005-03在锦州医学院实验动物中心实验室和锦州市亚东眼科医院实验动物手术中心实验室进行。清洁级3.5月龄纯种日本大耳白兔16只,随机分为4组:正常对照组、生理盐水组、世可组和平衡盐液组,每组4只。灌注液世可(沈阳齐兴制药有限责任公司生产);平衡盐液(美国Alcon公司生产)。方法:用100mL/L水合氯醛(3mL/kg)腹腔麻醉,眼部用4%盐酸奥布卡因滴眼液表面麻醉。行双眼手术。使用美国Alcon超声乳化仪,常规显微手术器械,于上方巩膜缘后2mm作长约3.5mm的巩膜隧道切口,穿刺入前房,注入粘弹剂Viscoat(Alcon公司生产)0.25mL;环行撕囊,直径约5mm;超声乳化头置于中央区乳化吸出晶体核及皮质;术毕关闭切口。于术前和术后6h采用接触性角膜内皮显微镜进行角膜内皮细胞形态学定量测定:角膜内皮细胞密度、细胞面积、六边形细胞百分率和变异系数。术后6h应用锥蓝-茜素红活性染色,光镜下观察各组角膜内皮细胞微细结构的变化。主要观察指标:①角膜内皮细胞形态学定量分析(角膜内皮细胞密度、细胞平均面积、变异系数和六边形细胞百分率)。②角膜内皮细胞形态结构特征。结果:16只大耳白兔均进入结果分析。①术前各组间各项指标比较差异均无显著性。②细胞密度、细胞面积、六边形细胞百分率、变异系数:术后6h生理盐水组、世可组和平衡盐液组均低于正常对照组(P<0.05),世可组和平衡盐液组对比差异无显著性(P>0.05)。③光镜显示生理盐水组角膜内皮细胞形态改变明显,世可组和平衡盐液组角膜内皮细胞改变轻微,无细胞坏死。结论:在超声乳化术中,灌注液对角膜内皮的损伤为化学性损伤,在相同手术条件下,国产灌注液世可对角膜内皮细胞具有良好的保护作用。

甲状腺低功大鼠肾小体的微细结构——体视学研究

本文应用体视学方法对甲状腺低功大鼠肾小体微细结构进行了测算.结果表明,甲状腺低功大鼠肾小体平均体积(V)减少,毛细血管体积减少、线密度(Lv)下降、长度减少,但其基膜的调和平均厚度(th)无明显改变.为研究甲状腺低功时肾小体功能的改变提供了形态学依据.

大鼠肾脏发育中肾小体数目的变化

目的探讨胚胎及出生后大鼠肾脏发育过程中的肾小体数目的变化规律。方法采用光镜连续切片技术,结合体视学分析方法,对不同发育阶段大鼠肾小体数目的变化进行体视学测量。结果肾小体的数目从胚龄18天到出生后7天大约增大7倍,出生后7天达到高峰,出生后7天至出生后40天基本不再增加。结论大鼠肾小体的数目于胚龄18天到出生后7天逐渐增多,出生后7天之后基本稳定。

发育期小鼠肾小体细胞凋亡的研究

目的 研究小鼠肾小体发育过程中的细胞凋亡规律及形态学特点。 方法 应用光镜、电镜技术和脱氧核糖核酸末端转移酶介导的dUTP缺口末端标记法 (TUNEL法 )分别对不同胚龄和生后日龄小鼠肾小体内细胞凋亡进行观察。 结果 胚龄 14d肾小体发生时就出现细胞凋亡 ,胚龄 18d左右达到高峰 ,随后缓慢下降。肾小体内凋亡细胞以内皮细胞和足细胞多见。凋亡细胞的两种结局 :1 被邻近的细胞所吞噬 ;2 落入肾小体的毛细血管腔或肾小囊中。 结论 小鼠肾小体的整个发育过程均存在细胞凋亡现象 ,肾小体内细胞凋亡与肾小体发育的完善有关。