前列地尔预处理对大鼠心肌缺血再灌注损伤的心脏超微结构的保护作用

目的 观察比较前列地尔预处理及经典缺血预处理对在体大鼠缺血 /再灌注心肌损伤的保护效应。方法 动物分为假手术对照组、缺血再灌注组、经典缺血预处理组、前列地尔预处理早期保护组及延迟保护组 ,透射电镜观察心肌超微结构的变化 ,同时用黄嘌呤氧化酶法测定心肌组织的超氧化物歧化酶 (SOD)活性和用硫代巴妥酸法测定丙二醛 (MDA)含量。结果 前列地尔预处理及经典缺血预处理均有保护心肌超微结构和抗氧化效应 ,与模型组相比 ,经典缺血预处理组、前列地尔预处理早期保护组及延迟保护组明显降低缺血再灌注后的心肌MDA含量 (P<0 .0 5 和升高T SOD (P<0 .0 5 水平。结论 前列地尔预处理对在体大鼠缺血 /再灌注心肌损伤具有保护效应 ,能模拟经典缺血预处理心肌保护效应。

不同类型冠心病患者血清脂联素水平及冠心病危险因素的变化

目的探讨不同类型冠心病患者血清脂联素水平和冠心病危险因素的变化及两者的相关性。方法冠心病患者90例:稳定型心绞痛组(SAP)22例,不稳定型心绞痛组(UAP)32例,急性心肌梗死组(AMI)36例;对照组(CG)30例。测定身高、体重、腰围、臀围、空腹血糖(FPG)、胰岛素(FINS)、总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)和血清脂联素(APN)水平,并计算体重指数(BMI)、腰臀比(WHR)及胰岛素敏感性指数(ISI)。结果冠心病组血清APN水平明显降低,且SAP、UAP、AMI三组血清APN水平依次降低。SAP组FINS升高、ISI降低;UAP组FINS、TC、TG升高,吸烟年限长,ISI降低;AMI组BMI、WHR、FINS、TC、TG、LDL-C升高,吸烟年限长,ISI、HDL-C降低。冠心病患者血清APN与BMI、WHR、FINS、TG、LDL-C呈负相关,与ISI、HDL-C呈正相关。结论冠心病患者血清APN水平降低,SAP、UAP、AMI三组血清APN水平依次降低,冠心病危险因素依次增多。冠心病患者血清APN水平与冠心病危险因素密切相关。

二甲双胍对糖尿病大鼠心肌保护作用的形态学观察

目的:观察传统的降糖药二甲双胍对糖尿病大鼠心肌的保护作用。方法:实验于2004-03/10在锦州医学院试验动物中心完成。①取雄性SD大鼠一次性尾静脉注射新鲜配置的20g/L链脲佐菌素溶液60mg/kg制备糖尿病模型,取造模成功(空腹血糖≥13.9mmol/L)大鼠50只单纯随机分为糖尿病组10只,胰岛素组和二甲双胍组各20只,另取10只尾静脉注射枸橼酸钠缓冲液的正常大鼠为正常对照组。②成模后第4天起,糖尿病组隔天皮下注射鱼精蛋白胰岛素1～2U/次维持存活,胰岛素组皮下注射普通胰岛素(4～6U/次,每天两三次),二甲双胍组灌胃二甲双胍20～30mg/(kg·d),正常对照组每天灌胃等量生理盐水。实验过程中胰岛素组和二甲双胍组大鼠空腹血糖控制在6.4mmol/L以下。③治疗12周后,大鼠断头处死,采血测血糖和血浆胰岛素,取左心室心肌组织,常规制作电镜切片,JEOL1200EX电子显微镜观察。结果:60只大鼠进入结果分析。①空腹血糖水平:胰岛素组和二甲双胍组显著低于糖尿病组[(7.84±3.6),(8.16±3.13),(14.00±4.00)mmol/L,P<0.05],与正常对照组比较差异不显著[(5.76±0.84)mmol/L,P>0.05]。②空腹血浆胰岛素水平:二甲双胍组与正常对照组比较差异不明显[(11.01±4.21),(9.48±3.56)mU/L,P>0.05],但低于胰岛素组和糖尿病组[(33.86±14.73),(23.39±13.85)mU/L,P<0.05]。③心肌超微结构:糖尿病组大鼠心肌纤维内肌节紊乱,肌原纤维变性,线粒体增多,常有肿胀变性。经二甲双胍和胰岛素治疗后糖尿病大鼠心肌超微结构病理改变明显减轻。结论:二甲双胍能抑制糖尿病大鼠的心肌病变,对心肌有良好的保护作用。

碱性成纤维细胞生长因子和神经生长因子联合诱导成年鼠骨髓基质细胞向神经元样细胞的分化

目的:探讨碱性成纤维细胞生长因子和神经生长因子联合诱导成年大鼠骨髓基质细胞分化为神经细胞的可能性和条件,为神经细胞的再生和脊髓内移植提供实验基础。方法:实验于2005-07/10在锦州医学院附属第一医院骨科实验室完成。选取清洁级、鼠龄1个月SD大鼠1只,拉颈处死后无菌条件下取出股骨,除去骨周围的肌肉组织,剪开骨两端,显露骨髓腔,以IMDM培养液从一端冲洗骨髓腔,将骨髓冲到平皿中,进行骨髓基质细胞的分离培养,传至第5代的骨髓基质细胞用于实验。诱导前24h先用含1μg/L碱性成纤维细胞生长因子及体积分数为0.2的胎牛血清的DMFM培养液培养,以促进细胞分裂,然后用神经生长因子作诱导剂,观察细胞形态的变化,并采用免疫组织化学法检测诱导后细胞表达神经丝蛋白、神经元烯醇化酶等特异性标志物情况。结果:①原代和传代培养时大鼠骨髓基质细胞的生长情况:原代培养2～4d细胞处于静止状态。第五六天可见有贴壁细胞开始伸展为椭圆型、短梭型、长梭型等,这些细胞即为骨髓间充质干细胞。至第14天骨髓基质细胞基本铺满瓶底,此时即可传代。传代后2～4d第1代细胞基本处于静止状态,第5天开始缓慢增殖,约在第8天长满瓶底,传代周期为六七天。②碱性成纤维细胞生长因子与神经生长因子联合诱导后骨髓基质细胞的形态变化:经碱性成纤维细胞生长因子预诱导2h后,骨髓基质细胞形态无明显变化,但胞体变大。神经生长因子诱导12h后,部分细胞分化,胞体向胞核收缩呈锥形,类似神经细胞,细胞突起之间呈渐进性变化,但无明显增殖现象。③大鼠骨髓基质细胞分化后的鉴定和转化率的测定:神经样细胞的胞体与突起,神经元烯醇化酶(γ-γ)和神经丝蛋白染色呈强阳性,而未分化的骨髓基质细胞为阴性。定量计数分析表达神经元烯醇化酶(γ-γ)为(69.6±3.8)%,表达神经丝蛋白为(71.3±3.3)%。结论:碱性成纤维细胞生长因子和神经生长因子联合应用能将骨髓基质细胞诱导成神经元样细胞,预诱导24h后撤离二者可增加细胞转化率,促进诱导后的细胞成熟,为细胞移植治疗脊髓损伤提供一种高效种子细胞生产方法。

糖尿病患者冠状动脉狭窄程度与血脂的关系研究

目的探讨2型糖尿病患者冠状动脉狭窄程度与血脂代谢异常的关系。方法将临床确诊为2型糖尿病且已行冠状动脉造影的80例患者,根据冠状动脉造影结果分为冠脉造影阴性组、轻度狭窄组和中、重度狭窄组,分别检测患者的总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)及空腹血糖(BG)。结果轻度狭窄组及中、重度狭窄组的TG、LDL-C、HDL-C及BG水平与冠脉造影阴性组间差异有显著性意义;轻度狭窄组与中、重度狭窄组的TG,LDL-C,HDL-C水平间差异均有显著性意义。结论糖尿病血脂代谢异常与患者的冠状动脉狭窄程度关系密切,TG,LDL-C及HDL-C水平可影响冠状动脉病变程度。

酶组织化学法观察缺血预处理对大鼠骨骼肌缺血再灌注损伤的保护作用

目的:采用酶组织化学法观察缺血预处理对大鼠骨骼肌缺血再灌注损伤是否有保护作用。方法:实验于2005-07/10在锦州医学院药理实验室完成。选取健康清洁级1月龄SD大鼠24只,随机分为3组:假手术对照组、缺血再灌注组、经典缺血预处理组,8只/组。①缺血再灌注组和经典缺血预处理组大鼠建立骨骼肌缺血/再灌注模型。大鼠腹腔麻醉后沿股鞘切开皮肤,分离股动静脉,制成切断患肢皮肤、肌肉和神经,仅保留股动静脉,用微血管夹阻断股动脉血供,制成右后肢缺血模型。②缺血再灌注组大鼠造模后缺血60min,再灌注20min。经典缺血预处理组大鼠用无创伤血管夹阻断股动静脉,给予10min的短暂缺血及10min的再灌注,3次循环后再次阻断股动静脉,缝合左大腿前方皮肤切口,缺血60min,剪开左大腿前方切口取出无创伤血管夹,观察血流恢复无血栓形成后,在动脉血流恢复的情况下可观察到患肢鼠爪由暗紫色转变为粉红色,再灌注20min。假手术对照组大鼠只穿线不结扎,股动脉旷置50min。③通过光镜观察各组骨骼肌结构的变化,同时以黄嘌呤氧化酶法测定各组大鼠骨骼肌组织的超氧化物歧化酶活性,硫代巴妥酸法测定丙二醛含量,酶组织化学法测定过氧化氢酶活性和琥珀酸脱氢酶活性。结果:实验选取健康清洁级SD大鼠24只,全部进入结果分析。①造模后光镜下各组大鼠肌细胞形态学观察结果:假手术对照组肌细胞正常,肌纤维完整;缺血再灌注组肌细胞部分溶解,肌纤维扭曲、断裂;经典缺血预处理组肌细胞点片状坏死,肌纤维基本完整。②各组大鼠血清丙二醛和总超氧化物歧化酶含量的比较:与缺血再灌注组比较,经典缺血预处理组的血清丙二醛含量明显降低[(11.22±0.94),(7.67±1.21)μmol/L,P<0.05],血清总超氧化物歧化酶含量明显升高[(97.97±7.71),(145.74±11.07)Nu/mL,P<0.05]。③各组大鼠骨骼肌过氧化氢酶和琥珀酸脱氢酶活性的变化:与缺血再灌注组比较,经典缺血预处理组过氧化氢酶和琥珀酸脱氢酶活性均明显升高[(10423.4±3357.4),(28410.2±2925.3)个,P<0.05;(44.30±9.75),(63.00±9.72)A,P<0.05]。结论:大鼠骨骼肌组织在缺血前给予缺血预处理,能够增强骨骼肌的抗氧化能力,提高骨骼肌对缺血再灌注损伤的耐受程度。提示酶组织化学法可以较准确地反映缺血预处理具有保护心肌结构和抗氧化效应。

缺血预处理及磺脲类降糖药物对在体大鼠缺血再灌注损伤心肌的作用

目的:观察经典缺血预处理对在体大鼠缺血再灌注心肌损伤的保护效应以及磺脲类降糖药物对其产生的影响。方法:将实验动物分为假手术组、缺血再灌注组、经典缺血预处理组和磺脲类降糖药物处理组,每组8只,观察经典缺血预处理和磺脲类降糖药物对心肌超微结构的影响,同时测定心肌组织丙二醛含量。结果:经典缺血预处理后缺血再灌注后的心肌丙二醛含量犤(0.99±0.26)μmol/g犦明显降低,与模型组犤(1.68±0.33)μmol/g犦比较,差异有显著性意义(P<0.05),而且保护心肌超微结构;磺脲类药物预处理组心肌丙二醛含量犤(1.71±0.26)μmol/g犦与模型组比较,差异无显著性意义,且心肌超微结构明显破坏。结论:磺脲类药物预处理可以取消经典缺血预处理对在体大鼠缺血再灌注心肌损伤的保护效应。

心肌缺血预适应的延迟相保护机制的研究进展

缺血预适应是一种内源性的保护机制 ,其延迟相保护越来越受到重视 ,其保护作用已在不同种属动物和临床病人中得到证实 ,其信号转导途径涉及触发物质、中介物质和效应物质 ,并已扩展到药理性预适应。

两种黏弹剂对超声乳化术兔角膜内皮细胞的影响

目的:观察在超声乳化术中使用两种不同黏弹剂(Viscoat和AmviscPlus)对角膜内皮细胞的保护作用,以及角膜内皮细胞损伤的形态学分析。方法:实验于2003-06/2004-01在锦州医学院实验动物中心实验室和锦州市亚东眼科医院实验动物中心实验室进行。3.5月龄纯种日本大耳白兔12只,雌雄不限,体质量1.8～2.0kg。随机分为3组:正常对照组(为正常的兔角膜内皮细胞),Viscoat组(应用Viscoat弥散性黏弹剂),AmviscPlus组(应用AmviscPlus内聚性黏弹剂),每组4只动物。于术前、术后即刻和术后6h采用TomeyEM-1000型接触性角膜内皮显微镜进行角膜内皮细胞形态学定量测定:角膜内皮细胞密度、细胞面积、变异系数及六边形细胞(正常角膜内皮细胞形态)百分率;术后6h光镜下计算内皮细胞存活率;术后6h透射电镜下观察各组角膜内皮细胞超微结构的变化。结果:12只大耳白兔均进入结果分析。①术前各组间各项指标均无显著性差异。②术后即刻角膜内皮细胞密度和平均面积各组间无显著性差异(P>0.05);术后6h,Viscoat和AmviscPlus组细胞密度均较正常对照组降低(P<0.05),平均面积均较正常对照组增加(P<0.05)。术后即刻和6h六边形细胞百分率均低于正常对照组(P<0.05),变异系数均大于正常对照组(P<0.05)。③角膜内皮细胞活性率Viscoat组高于AmviscPlus组[(93.78±3.14)%,(80.77±3.91)%,(P<0.05)]。④角膜中央1mm区域取材的透射电镜切片示Viscoat组角膜内皮损害小于AmviscPlus组。结论:角膜内皮细胞形态学分析较细胞密度和平均面积的改变能更灵敏地反映角膜内皮的变化。在相同的手术条件下,Viscoat黏弹剂对角膜内皮细胞的保护能力优于AmviscPlus。

夹层动脉瘤破裂——关于“剧烈胸痛、胸腔积液、贫血”的病案讨论

①病人为中年男性；②既往患有高血压；③胸痛由抬重物而诱发；④脉搏快，110次／分，左侧搏动明显弱于右侧；⑤血压低，100／60mmHg；⑥贫血貌，指甲较苍白；⑦气管轻度右移，胸骨上窝可触到搏动性肿块；⑧左侧胸部饱满，叩诊呈浊音，触诊语颤消失，听诊呼吸音消失，右肺呼吸音增强；⑨心界叩不出，心音低钝，心率110次／分；⑩血常规WBC10．1×10^9，Hb90g／L；（11）血清心肌酶学检查正常，肌钙蛋白T阴性。X线胸片示：左侧胸腔积液。

大鼠肝细胞线粒体周围内质网的三维重建

目的 研究肝细胞线粒体与内质网的空间结构关系。方法 通过连续超薄切片重建线粒体与其周围内质网的三维模型。结果 连续超薄切片和三维模型显示 :除极少量的线粒体与脂滴直接接触外 ,几乎每个线粒体都被内质网所包裹。大多数线粒体周围既有RER又有小囊泡状SER ,少数线粒体则仅有小的SER。这些内质网与线粒体紧密相贴如同线粒体外壳 ,二者的间隙小于 30nm ,其间无任何其它细胞器。结论 肝细胞线粒体通常在内质网包绕下执行生理功能 ,二者形成结构和功能紧密联系的整体。