限制性摄食对小鼠血中β羟丁酸水平及大脑皮质脂蛋白脂酶表达的影响

目的探讨限制性摄食对小鼠血中β羟丁酸(beta-hydroxybutyrate,βOHB)水平及大脑皮质脂蛋白脂酶(lipoprotein lipase,LPL)表达的影响。方法 50只健康成年C57BL/6J小鼠按体重随机分为5组,每组10只,分别于禁食0、8、12、16 h和24 h后采血,采用ELISA法测定βOHB的水平。另取20只小鼠按体重随机分为禁食组和对照组,每组10只,禁食组小鼠采用隔日禁食的方式连续处理4周,对照组小鼠自由摄食,实验末期称重并分析体脂比(体脂肪含量占体重的百分比),再分别采用Real-time RT-PCR法和Western bolt法检测大脑皮质LPL mRNA及其蛋白表达水平。结果小鼠血中βOHB水平随着禁食时间的延长而逐渐升高,禁食0、8、12、16和24 h后的小鼠血中βOHB水平(mmol/L)分别为(0.93±0.13)、(0.95±0.37)、(1.33±0.26)、(1.68±0.13)、(1.74±0.27);与禁食0 h比较,禁食12、16及24 h的小鼠血中βOHB水平均明显升高(P<0.05);禁食16 h和24 h的小鼠血中βOHB水平差异无统计学意义(P>0.05),但二者均明显高于禁食12 h的小鼠血中βOHB水平(P<0.05)。在整个实验期间隔日禁食组及对照组小鼠均未见异常表现,两组小鼠体重及体脂肪含量差异无统计学意义(P>0.05)。隔日禁食组小鼠大脑皮质LPL mRNA水平及蛋白表达均高于对照组(P<0.01;P<0.05)。结论禁食12～24 h的小鼠血中βOHB水平明显升高;隔日禁食处理4周可上调小鼠大脑皮质LPL mRNA及其蛋白表达水平。

AD模型小鼠脑组织AQP4、SNTA1表达水平的变化及DADS的干预研究

目的探讨二烯丙基二硫化物(DADS)对阿尔茨海默病(AD)模型小鼠的干预作用,为AD的防治提供理论依据。方法将20只5月龄APPswe/PS1d E9双转基因鼠按窝别和体质量分为AD模型组和AD干预组,同时将野生型小鼠分为野生对照组和野生干预组,每组10只。干预组小鼠每日1次灌胃给予50 mg/kg DADS,AD模型组小鼠和野生对照组小鼠每日1次灌胃等量溶媒,连续处理6月。采用水迷宫和旷场实验测定小鼠神经行为学变化。免疫组化法分析大脑皮质β-淀粉样蛋白(Aβ)沉积情况,q RT-PCR和Western blot法分别检测大脑皮质水通道蛋白4(AQP4)、α-互养蛋白(SNTA1)m RNA及蛋白的表达水平。结果与对照组相比,AD模型组小鼠水迷宫实验中定位航行逃避潜伏期延长、穿越平台次数减少,在旷场实验中中央停留时间延长、穿格次数和直立次数减少,大脑皮质Aβ沉积数量增多,AQP4m RNA及蛋白表达升高,SNTA1m RNA及蛋白的表达水平下降,差异均有统计学意义(P<0.05或P<0.01)。与AD模型组相比,DADS干预组小鼠的定位航行逃避潜伏期缩短、穿越平台次数增多,中央停留时间缩短、穿格次数和直立次数增多,大脑皮质Aβ沉积数量减少,AQP4及SNTA1 m RNA及蛋白的表达水平上调,差异均有统计学意义(P<0.05或P<0.01)。结论 AD模型小鼠大脑皮质AQP4表达升高,但SNTA1表达的降低可改变AQP4极性分布而影响AQP4的功能。DADS可明显减少AD模型小鼠大脑皮质Aβ沉积,改善认知能力,其作用机制可能与DADS调节AQP4表达及其极性分布有关。