LINC00337调控miR-145抑制宫颈癌细胞增殖的机制研究

目的探究LINC00337和miR-145在调节宫颈癌细胞增殖方面的作用及机制。方法将人宫颈癌HeLa细胞分为si-337组、si-337 NC组和空白对照组,通过RT-PCR检测人宫颈癌细胞HeLa、正常宫颈细胞Ect1/E6E7中LINC00337、miR-145的表达情况。通过MTS法检测各个转染组细胞的增殖情况,并使用双荧光素酶报告基因检测各组细胞的荧光素酶活性,确定LINC00337与miR-145之间的靶向关系。结果与正常宫颈细胞相比,LINC00337在Hela细胞中的表达显著升高(P<0.05),miR-145表达显著降低(P<0.05)。si-337组的A490值均低于空白对照组、si-337 NC组(P<0.05)。双荧光素酶报告基因显示LINC00337 mimic组双荧光素酶活性相较于其他四组明显降低(P<0.05),LINC00337抑制剂组双荧光素酶活性相较于其他四组显著增强(P<0.05)。结论LINC00337可能是通过靶向结合并下调miR-145的表达达到抑制宫颈癌细胞增殖的作用。

耐力运动训练通过SIRTl信号通路保护力竭运动大鼠心肌

目的观察力竭运动模型大鼠耐力运动训练后心脏沉默信息转录调控因子1（SIRTl）、乙酰化叉头转录因子1（Ac-FOX01）的表达变化，探讨耐力运动训练心肌保护的作用机制。方法将雄性Wistar大鼠按完全随机法分为4组，即对照组（n=20）、力竭运动组（力竭组，n=20）、耐力运动训练＋力竭运动组（TE组，n=18）、耐力运动训练＋Sirtinol（选择性SIRTl抑制剂）＋力竭运动组（TSE组，n=17）。对照组和力竭组大鼠常规饲养5周。TE组和TSE组大鼠进行5周耐力运动训练（游泳），TSE组大鼠运动前30min腹腔注射Sirtinol（2mg／kg）。5周后，力竭组、TE组和TSE组大鼠各进行一次性力竭游泳运动。于力竭运动后留取各组大鼠心肌组织，分别采用实时荧光定量逆转录聚合酶链反应及Westernblot法检测心肌SIRTlmRNA和蛋白表达，Westernblot法检测心肌Ac-FOX01、抗凋亡蛋白Bcl-2和促凋亡蛋白Bax的表达，TUNEL法检测心肌细胞凋亡指数。结果（1）各组大鼠心肌组织SIRTlmRNA和蛋白表达：力竭组大鼠心肌组织SIRTlmRNA表达水平明显低于对照组（P〈0．01），TE组则明显高于力竭组（P〈0．01），TSE组又明显低于TE组（P〈0．01）。力竭组大鼠心肌组织SIRTl蛋白表达水平明显低于对照组（P〈0．01），TE组则明显高于力竭组（P〈0．01），TSE组又明显低于TE组（P〈0．01）。（2）各组大鼠心肌组织Ac-FOX01、Bcl-2和Bax的蛋白表达：力竭组大鼠心肌组织Bcl-2表达水平明显低于对照组（P〈0．01），Ac-FOX01和Bax则均明显高于对照组（P均〈0．01）。TE组大鼠心肌组织Bcl-2蛋白表达水平则明显高于力竭组（P〈0．01），Ac-FOX01和Bax均明显低于力竭组（P均〈0．01）。TSE组大鼠心肌组织Bcl-2蛋白表达水平又明显低于TE组（P〈0．01），Ac-FOX01和Bax均明显高于TE组（P均〈0．01）。（3）各组大鼠心肌细胞凋亡指数：力竭组大鼠心肌细胞凋亡指数明显大于对照组[（42．10±1．47）％比（17．31±1．32）％，P〈0．01]，TE组[（15．69±1．81）％]则明显小于力竭组（P〈0．01），而TSE组[（35．34±1．36）％]又明显大于TE组（P〈0．01）。结论耐力运动训练可以激活大鼠心脏SIRTl信号通路，上调SIRTl的表达，调节FOX01的去乙酰化水平，抑制心肌细胞凋亡，从而发挥心肌保护作用。